Original Title: Synthesis and evaluation of antioxidant and β-glucuronidase inhibitory activity of hesperidin glycosides
Source: doi.org/10.34044/j.anres.2020.54.2.07
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការសំយោគ និងការវាយតម្លៃសកម្មភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្ម និងការទប់ស្កាត់អង់ស៊ីម β-glucuronidase នៃក្លីកូស៊ីត hesperidin

ចំណងជើងដើម៖ Synthesis and evaluation of antioxidant and β-glucuronidase inhibitory activity of hesperidin glycosides

អ្នកនិពន្ធ៖ Natwadee Poomipark (Thammasat University), Titaporn Chaisin (Thammasat University), Jarunee Kaulpiboon (Thammasat University)

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2020, Agriculture and Natural Resources

វិស័យសិក្សា៖ Biochemistry

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ការសិក្សានេះដោះស្រាយបញ្ហានៃការស្រូបយកមានកម្រិត និងភាពរលាយក្នុងទឹកទាបរបស់ hesperidin ដែលជាសារជាតិ flavonoid ធម្មជាតិមានអត្ថប្រយោជន៍ដល់សុខភាព តាមរយៈការសំយោគក្លីកូស៊ីត (glycoside) របស់វា។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ អ្នកស្រាវជ្រាវបានធ្វើឲ្យប្រសើរឡើងនូវប្រតិកម្មបំប្លែងរចនាសម្ព័ន្ធដោយប្រើអង់ស៊ីម recombinant cyclodextrin glycosyltransferase (CGTase) និងបានវាយតម្លៃលក្ខណៈសម្បត្តិរបស់ផលិតផលដែលទទួលបាន។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Native Hesperidin (Baseline)
សារជាតិ Hesperidin ដើម (មិនទាន់សំយោគ)
មានសកម្មភាពប្រឆាំងការរលាក (តាមរយៈការទប់ស្កាត់អង់ស៊ីម β-glucuronidase) ខ្ពស់ជាងគេរហូតដល់ ៥១.៣៤%។ មិនងាយរលាយក្នុងទឹក ដែលធ្វើឱ្យការស្រូបយកទៅប្រើប្រាស់ក្នុងរាងកាយ (Bioavailability) មានកម្រិតទាប និងមានសកម្មភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្មខ្សោយ។ សកម្មភាពប្រឆាំងការរលាកខ្ពស់ (៥១.៣៤%) ប៉ុន្តែមិនរលាយក្នុងទឹក និងមានកម្រិត IC50 នៃ DPPH = ១១៩២.៣៩ µM។
Hesperidin glucoside (HG1)
ក្លីកូស៊ីត Hesperidin glucoside (HG1)
មានភាពរលាយក្នុងទឹកបានល្អប្រសើរ (៥៣៣.៥ mg/mL) និងមានសកម្មភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្មខ្ពស់ជាង hesperidin ដើម។ សកម្មភាពប្រឆាំងការរលាកថយចុះមកត្រឹម ២៣.៧៩% បើធៀបនឹងសារជាតិដើម។ ភាពរលាយ ៥៣៣.៥ mg/mL, កម្រិត IC50 នៃ DPPH = ១០១៥.០៩ µM, សកម្មភាពទប់ស្កាត់ការរលាក ២៣.៧៩%។
Hesperidin maltoside (HG2)
ក្លីកូស៊ីត Hesperidin maltoside (HG2)
មានភាពរលាយក្នុងទឹកខ្ពស់បំផុត (៥៨២.៥ mg/mL) និងមានសកម្មភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្មល្អបំផុតក្នុងចំណោមផលិតផលដែលបានសំយោគ។ សកម្មភាពប្រឆាំងការរលាកធ្លាក់ចុះទាបបំផុត (១៦.៤៤%) ដោយសារកំណើននៃការភ្ជាប់ម៉ូលេគុលគ្លុយកូស។ ភាពរលាយ ៥៨២.៥ mg/mL, កម្រិត IC50 នៃ DPPH = ៥៦៤.៨១ µM, សកម្មភាពទប់ស្កាត់ការរលាក ១៦.៤៤%។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការសិក្សានេះទាមទារឧបករណ៍មន្ទីរពិសោធន៍កម្រិតខ្ពស់សម្រាប់ការសំយោគអង់ស៊ីម និងការវិភាគម៉ូលេគុលជីវសាស្ត្រ។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះធ្វើឡើងនៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ (in vitro) នៅសាកលវិទ្យាល័យ Thammasat ប្រទេសថៃ ដោយប្រើប្រាស់ hesperidin ពាណិជ្ជកម្មទិញពីប្រទេសជប៉ុន។ ទោះបីជាលទ្ធផលបង្ហាញពីសក្តានុពលមែន ប៉ុន្តែវាមិនទាន់ត្រូវបានធ្វើតេស្តលើគំរូសត្វ ឬមនុស្ស (in vivo) នោះទេ។ សម្រាប់ប្រទេសកម្ពុជា ដែលសម្បូរទៅដោយដំណាំអម្បូរក្រូច (ប្រភពនៃ hesperidin) ការស្រាវជ្រាវនេះមានតម្លៃណាស់ក្នុងការកែច្នៃកសិផលក្នុងស្រុក។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

វិធីសាស្ត្រក្នុងការបំប្លែងសារជាតិធម្មជាតិដើម្បីបង្កើនភាពរលាយក្នុងទឹកនេះ គឺមានសក្តានុពលខ្ពស់សម្រាប់ការអភិវឌ្ឍវិស័យឱសថ និងចំណីអាហារនៅកម្ពុជា។

សរុបមក ការអនុវត្តបច្ចេកទេសនេះអាចជួយបង្កើនតម្លៃបន្ថែមដល់កសិផលកម្ពុជា និងត្រួសត្រាយផ្លូវសម្រាប់ការផលិតឱសថធម្មជាតិដែលមានប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. សិក្សាអំពីមូលដ្ឋានគ្រឹះនៃអង់ស៊ីម និងប្រតិកម្ម: ចាប់ផ្តើមដោយការស្វែងយល់ពីយន្តការនៃប្រតិកម្ម Transglycosylation និងមុខងាររបស់អង់ស៊ីម CGTase ព្រមទាំងរចនាសម្ព័ន្ធគីមីរបស់ Flavonoids តាមរយៈសៀវភៅជីវគីមី ឬអត្ថបទស្រាវជ្រាវអនឡាញ។
  2. ការទាញយកសារជាតិ Hesperidin ពីប្រភពក្នុងស្រុក: អនុវត្តការទាញយកសារជាតិ Hesperidin ពីសំបកក្រូចពោធិ៍សាត់ ឬក្រូចសើច ដោយប្រើប្រាស់វិធីសាស្ត្រ Solvent Extraction នៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍សាកលវិទ្យាល័យរបស់អ្នក។
  3. បណ្តុះបណ្តាលជំនាញវិភាគសមាសធាតុ: ហ្វឹកហាត់ប្រើប្រាស់ឧបករណ៍វិភាគសំខាន់ៗដូចជា TLC (Thin Layer Chromatography) និង HPLC សម្រាប់ការបំបែក និងត្រួតពិនិត្យភាពបរិសុទ្ធនៃសារធាតុចម្រាញ់។
  4. ការធ្វើតេស្តសកម្មភាពជីវសាស្រ្ត: អនុវត្តការធ្វើតេស្ត DPPH Radical Scavenging Assay ក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ដើម្បីវាយតម្លៃសមត្ថភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្មនៃសារធាតុចម្រាញ់របស់អ្នក ធៀបនឹងស្តង់ដារ Trolox ឬវីតាមីន C។
  5. ពង្រីកការស្រាវជ្រាវទៅលើការបំប្លែងរចនាសម្ព័ន្ធ: សហការជាមួយមន្ទីរពិសោធន៍ដែលមានបច្ចេកវិទ្យាខ្ពស់ (ឧ. វិទ្យាស្ថានប៉ាស្ទ័រកម្ពុជា ឬសាកលវិទ្យាល័យដៃគូ) ដើម្បីសាកល្បងប្រើប្រាស់អង់ស៊ីម ឬ β-Cyclodextrin ក្នុងការបង្កើនភាពរលាយនៃសារធាតុសកម្មរបស់អ្នក។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Transglycosylation (ការបំប្លែងរចនាសម្ព័ន្ធដោយបញ្ជូនម៉ូលេគុលស្ករ) គឺជាដំណើរការគីមីដែលអង់ស៊ីមផ្តាច់ម៉ូលេគុលស្ករពីសារធាតុមួយ (អ្នកផ្តល់) ហើយយកទៅភ្ជាប់នឹងសារធាតុមួយទៀត (អ្នកទទួល) ដើម្បីបង្កើតជាសារធាតុថ្មីដែលមានលក្ខណៈរូប និងគីមីល្អប្រសើរជាងមុន (ដូចជាការកើនឡើងនៃភាពរលាយក្នុងទឹក)។ ដូចជាការដោះគ្រឿងបន្លាស់ពីរថយន្តមួយ យកទៅបំពាក់លើរថយន្តមួយទៀតដើម្បីឱ្យវាមានដំណើរការល្អជាងមុន។
Cyclodextrin glycosyltransferase (CGTase) (អង់ស៊ីម CGTase) វាគឺជាប្រភេទអង់ស៊ីមម្យ៉ាងដែលជួយជំរុញប្រតិកម្ម Transglycosylation ពោលគឺវាមានតួនាទីកាត់ និងតភ្ជាប់ម៉ូលេគុលស្ករ ដើម្បីបង្កើតជាសមាសធាតុអូលីហ្គោសាការីត (oligosaccharides) ឬក្លីកូស៊ីតថ្មីៗដែលមានអត្ថប្រយោជន៍ខ្ពស់។ ដូចជាជាងកាត់ដេរដ៏ជំនាញម្នាក់ ដែលកាត់យកក្រណាត់ពីអាវមួយ ទៅដេរភ្ជាប់នឹងខោមួយទៀតឱ្យកាន់តែស្អាតនិងមានប្រយោជន៍។
Hesperidin (សារជាតិ Hesperidin) ជាប្រភេទសារជាតិ Flavonoid ធម្មជាតិដែលសម្បូរនៅក្នុងអម្បូរផ្លែក្រូច។ វាមានអត្ថប្រយោជន៍ដល់សុខភាពយ៉ាងច្រើនដូចជា ប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្ម និងប្រឆាំងការរលាក ប៉ុន្តែវាមានចំណុចខ្សោយគឺពិបាករលាយក្នុងទឹក ដែលធ្វើឱ្យរាងកាយពិបាកស្រូបយក។ ដូចជាថ្នាំប៉ូវធម្មជាតិនៅក្នុងសំបកក្រូច ដែលជួយការពាររាងកាយយើងពីជំងឺផ្សេងៗ។
Glycoside (ក្លីកូស៊ីត) ជាសមាសធាតុគីមីដែលកើតឡើងពីការតភ្ជាប់រវាងម៉ូលេគុលស្ករ (sugar) ជាមួយនឹងម៉ូលេគុលផ្សេងទៀតដែលមិនមែនជាស្ករ (aglycone)។ នៅក្នុងការស្រាវជ្រាវនេះ ការតភ្ជាប់ស្ករទៅនឹង hesperidin គឺដើម្បីបង្កើតជាក្លីកូស៊ីតដែលងាយរលាយក្នុងទឹក។ ដូចជាការចងដុំថ្ម (សារធាតុដើម) ជាមួយពោងកៅស៊ូ (ម៉ូលេគុលស្ករ) ដើម្បីឱ្យវាអាចអណ្តែតក្នុងទឹកបាន (រលាយក្នុងទឹក)។
Bioavailability (សមត្ថភាពស្រូបយកទៅប្រើប្រាស់ក្នុងរាងកាយ) គឺជាកម្រិត និងអត្រានៃសារធាតុសកម្ម (ដូចជាឱសថ ឬសារធាតុចិញ្ចឹម) ដែលអាចជ្រាបចូលទៅក្នុងចរន្តឈាម ហើយអាចឱ្យរាងកាយយកទៅប្រើប្រាស់ប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាពនៅកន្លែងដែលត្រូវការ។ ប្រៀបដូចជាការស្រោចទឹកដំណាំ បើទោះជាយើងស្រោចទឹកច្រើន (ញ៉ាំថ្នាំច្រើន) តែបើសារធាតុដីមិនល្អ (Bioavailability ទាប) ដើមឈើក៏មិនអាចស្រូបយកទឹកនោះបានដែរ។
High-performance liquid chromatography (HPLC) (ក្រូម៉ាតូក្រាមរាវកម្រិតខ្ពស់) ជាបច្ចេកទេសមន្ទីរពិសោធន៍មួយប្រភេទដែលប្រើសម្រាប់បំបែក កំណត់អត្តសញ្ញាណ និងវាស់បរិមាណសមាសធាតុនីមួយៗដែលលាយឡំគ្នានៅក្នុងសូលុយស្យុង ដោយរុញវាឆ្លងកាត់បំពង់ដែលមានសារធាតុចាប់ជាប់ខុសៗគ្នា។ ដូចជាការប្រើប្រាស់កន្ត្រងចម្រោះដែលមានរន្ធតូចធំខុសៗគ្នា ដើម្បីបំបែកគ្រាប់ខ្សាច់ គ្រាប់ក្រួស និងគ្រាប់ថ្មចេញពីគ្នាក្នុងពេលតែមួយ។
Mass spectrometry (MS) (បច្ចេកទេសម៉ាស់ស្ប៉ិចត្រូម៉ែត / ការពន្លាតម៉ាស) ជាឧបករណ៍វិភាគដ៏សុក្រឹតដែលប្រើសម្រាប់វាស់ទម្ងន់ម៉ូលេគុលនៃសមាសធាតុគីមី ដោយបំបែកវាជាអ៊ីយ៉ុង រួចវាស់សមាមាត្រម៉ាសធៀបនឹងបន្ទុក (m/z) ដើម្បីផ្ទៀងផ្ទាត់ដឹងពីរចនាសម្ព័ន្ធពិតប្រាកដរបស់វា។ ដូចជាជញ្ជីងវេទមន្តដែលអាចថ្លឹងទម្ងន់ និងប្រាប់ពីប្រភេទពិតប្រាកដនៃវត្ថុធាតុនីមួយៗ ទោះបីជាវាមានទំហំតូចប៉ុនធូលីក៏ដោយ។
DPPH radical scavenging assay (ការធ្វើតេស្តចាប់យករ៉ាឌីកាល់សេរី DPPH) គឺជាវិធីសាស្ត្រមន្ទីរពិសោធន៍ដ៏ពេញនិយមមួយក្នុងការវាស់ស្ទង់សមត្ថភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្មរបស់សារធាតុណាមួយ ដោយសង្កេតមើលការផ្លាស់ប្តូរពណ៌ពីស្វាយទៅលឿង នៅពេលដែលសារធាតុនោះទៅបន្សាបរ៉ាឌីកាល់សេរី DPPH។ ដូចជាការធ្វើតេស្តមើលកម្លាំងទាហាន (សារធាតុប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្ម) ថាតើអាចកម្ចាត់សត្រូវ (រ៉ាឌីកាល់សេរី) ដែលចូលមកបំផ្លាញទីក្រុងបានលឿននិងខ្លាំងប៉ុណ្ណា។
β-glucuronidase (អង់ស៊ីម β-glucuronidase) ជាអង់ស៊ីមមួយប្រភេទនៅក្នុងរាងកាយ ដែលនៅពេលមានសកម្មភាពខ្លាំងជ្រុល វាត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ទៅនឹងការរលាក ឬការខូចខាតជាលិកាផ្សេងៗ។ ការទប់ស្កាត់អង់ស៊ីមនេះ គឺជាសូចនាករនៃការវាយតម្លៃសកម្មភាពប្រឆាំងការរលាក។ ដូចជាម៉ាស៊ីនរំលាយសំរាមក្នុងទីក្រុង បើវាដំណើរការលឿនពេកខុសប្រក្រតី វាអាចនឹងចាប់ផ្តើមកាត់បំផ្លាញទាំងរបស់ល្អៗ ធ្វើឱ្យទីក្រុងខូចខាត (រាងកាយរលាក)។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖