Original Title: Isolation of stigmasterol from Kra Don (Careya arborea Roxb.) and bioactivities of its crude extracts against free radicals and human immunodeficiency virus
Source: doi.org/10.34044/j.anres.2021.55.1.05
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការចម្រាញ់យកសារធាតុ stigmasterol ពីរុក្ខជាតិ Kra Don (Careya arborea Roxb.) និងសកម្មភាពជីវសាស្រ្តនៃសារធាតុចម្រាញ់ឆៅរបស់វាប្រឆាំងនឹងរ៉ាឌីកាល់សេរី និងវីរុសភាពស៊ាំរបស់មនុស្ស

ចំណងជើងដើម៖ Isolation of stigmasterol from Kra Don (Careya arborea Roxb.) and bioactivities of its crude extracts against free radicals and human immunodeficiency virus

អ្នកនិពន្ធ៖ Sorawit Bapia (Kasetsart University), Nattawut Srisombata (Kasetsart University), Siriluk Ratanabunyong (Kasetsart University), Kiattawee Choowongkomon (Kasetsart University), Srunya Vajrodaya (Kasetsart University), Narong Wongkantrakorn (Kasetsart University), Sutsawat Duangsrisai (Kasetsart University)

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2021, Agriculture and Natural Resources

វិស័យសិក្សា៖ Phytochemistry and Pharmacognosy

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ការសិក្សានេះមានគោលបំណងស្វែងរកប្រភពឱសថថ្មីៗពីធម្មជាតិ ដើម្បីប្រយុទ្ធប្រឆាំងនឹងរ៉ាឌីកាល់សេរីដែលបង្កជំងឺផ្សេងៗ និងទប់ស្កាត់ការរីករាលដាលនៃវីរុសភាពស៊ាំរបស់មនុស្ស (HIV-1) ខណៈពេលដែលបញ្ហានៃការស៊ាំនឹងថ្នាំកំពុងកើនឡើងយ៉ាងខ្លាំង។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ អ្នកស្រាវជ្រាវបានធ្វើការចម្រាញ់សារធាតុពីសំបកដើម ឈើ និងស្លឹករបស់រុក្ខជាតិ Careya arborea ដោយប្រើសារធាតុរំលាយមេតាណុល រួចយកទៅធ្វើតេស្តសកម្មភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្ម និងវីរុស រួមទាំងការបំបែករកសារធាតុសកម្ម។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Stem bark methanolic extract
សារធាតុចម្រាញ់ពីសំបកដើមដោយប្រើមេតាណុល
មានសមត្ថភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្មខ្ពស់បំផុត និងមានប្រសិទ្ធភាពរារាំងអង់ស៊ីម HIV-1 RT បានយ៉ាងល្អឥតខ្ចោះ។ វាសម្បូរទៅដោយសារធាតុ Polyphenol ដែលមានសក្តានុពលខ្ពស់ជាឱសថ។ ទាមទារបរិមាណសំបកដើមច្រើនដែលអាចប៉ះពាល់ដល់ការលូតលាស់របស់រុក្ខជាតិ និងត្រូវការបច្ចេកទេសស្មុគស្មាញដើម្បីបំបែកយកសារធាតុបរិសុទ្ធ។ អត្រារារាំងអង់ស៊ីម HIV-1 RT ខ្ពស់ដល់ទៅ ១៤៣,៣៣% និងតម្លៃ IC50 នៃ DPPH គឺ ៦២៣,៩៦ μg/mL។
Leaf methanolic extract
សារធាតុចម្រាញ់ពីស្លឹកដោយប្រើមេតាណុល
ងាយស្រួលប្រមូលផលដោយមិនសូវប៉ះពាល់ដល់ដើមរុក្ខជាតិ និងមានផ្ទុកបរិមាណ Flavonoid ខ្ពស់ជាងគេ។ វាមានសមត្ថភាពរារាំងមេរោគ HIV-1 បានល្អផងដែរ។ សមត្ថភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្មជារួមមានកម្រិតទាបជាងបើធៀបនឹងសំបកដើម។ អត្រារារាំងអង់ស៊ីម HIV-1 RT គឺ ១២៤,៣៦% និងមានបរិមាណ Flavonoid សរុប ៣០,៦២ mg QE/g។
Standard Anti-HIV Drug (Nevirapine)
ឱសថស្តង់ដារប្រឆាំងមេរោគអេដស៍ (Nevirapine)
ជាឱសថដែលត្រូវបានទទួលស្គាល់ និងប្រើប្រាស់យ៉ាងទូលំទូលាយក្នុងការព្យាបាលជាក់ស្តែងសម្រាប់អ្នកផ្ទុកមេរោគ HIV។ មានហានិភ័យនៃការកើនឡើងនូវភាពស៊ាំនឹងថ្នាំ (Drug resistance) របស់វីរុស និងអាចមានផលប៉ះពាល់បន្ទាប់បន្សំ។ ផ្តល់អត្រារារាំង ៩៨,៨២% ក្នុងកម្រិតកំហាប់ 300 μM។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការសិក្សានេះទាមទារចំណាយច្រើនលើការបំពាក់ឧបករណ៍មន្ទីរពិសោធន៍កម្រិតខ្ពស់ និងសារធាតុគីមីសម្រាប់វិភាគរចនាសម្ព័ន្ធម៉ូលេគុលឱសថ។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះធ្វើឡើងដោយប្រើប្រាស់សំណាករុក្ខជាតិ Careya arborea មកពីខេត្ត Chai Nat ប្រទេសថៃ ដែលជាតំបន់ព្រៃរបោះ។ កម្រិតសារធាតុសកម្មអាចមានការប្រែប្រួលអាស្រ័យលើលក្ខខណ្ឌអាកាសធាតុ គុណភាពដី និងអាយុកាលរបស់រុក្ខជាតិ។ ចំណុចនេះមានសារៈសំខាន់សម្រាប់កម្ពុជា ពីព្រោះរុក្ខជាតិនេះ (ហៅថាដើមកណ្ដោល) ក៏មានដុះច្រើននៅតំបន់ព្រៃរបោះក្នុងប្រទេសកម្ពុជា ដែលទាមទារឱ្យមានការសិក្សាផ្ទៀងផ្ទាត់ឡើងវិញនូវកម្រិតសារធាតុសកម្មក្នុងបរិបទភូមិសាស្ត្រក្នុងស្រុក។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

វិធីសាស្រ្ត និងលទ្ធផលនៃការស្រាវជ្រាវនេះមានសក្តានុពលខ្ពស់សម្រាប់អនុវត្តនៅសាកលវិទ្យាល័យ និងស្ថាប័នស្រាវជ្រាវនានាក្នុងប្រទេសកម្ពុជា។

ការប្រើប្រាស់បច្ចេកវិទ្យាចម្រាញ់ និងវិភាគទំនើបលើរុក្ខជាតិក្នុងស្រុក នឹងជួយលើកកម្ពស់សមត្ថភាពស្រាវជ្រាវរបស់កម្ពុជា ព្រមទាំងអាចឈានទៅរកការរកឃើញរូបមន្តឱសថថ្មីៗប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាព។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. ជំហានទី១៖ ការប្រមូលសំណាក និងការរៀបចំរុក្ខជាតិ: ចុះប្រមូលសំណាកសំបកដើម ឈើ និងស្លឹកនៃរុក្ខជាតិ Careya arborea ពីតំបន់ព្រៃរបោះ។ យកមកលាងសម្អាត ហាលឱ្យស្ងួតក្នុងម្លប់នៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ រួចកិនជាម្សៅម៉ត់ដោយប្រើម៉ាស៊ីនកិន (Electric grinder) ដើម្បីត្រៀមធ្វើការចម្រាញ់។
  2. ជំហានទី២៖ ការចម្រាញ់សារធាតុឆៅ (Crude Extraction): ត្រាំម្សៅរុក្ខជាតិក្នុងសារធាតុរំលាយ Methanol ក្នុងរយៈពេលកំណត់ រួចច្រោះយកទឹកមេតាណុលនោះមកបញ្ចេញរំហួតដោយប្រើម៉ាស៊ីន Rotary Evaporator នៅសម្ពាធទាប ដើម្បីទទួលបានសារធាតុចម្រាញ់ឆៅ (Crude methanolic extract)។
  3. ជំហានទី៣៖ ការធ្វើតេស្តសកម្មភាពជីវសាស្រ្ត (Bioassays): យកសារធាតុចម្រាញ់ទៅធ្វើតេស្តរកសមត្ថភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្មតាមវិធីសាស្ត្រ DPPH, NO, SOD និង FRAP និងធ្វើតេស្តសកម្មភាពរារាំងអង់ស៊ីមរបស់វីរុស ដោយប្រើ Reverse Transcriptase Assay Kit រួចអានលទ្ធផលជាមួយ Fluorescence Microplate Reader
  4. ជំហានទី៤៖ ការបំបែក និងទាញយកសារធាតុ (Fractionation & Isolation): ធ្វើការញែកសារធាតុតាមកម្រិតប៉ូលែរ (Polarity) ដោយប្រើ Liquid-Liquid Extraction (Water/Chloroform) រួចយកផ្នែកដែលមិនសូវរលាយក្នុងទឹក (Lipophilic extract) ទៅបំបែកបន្តដោយប្រើប្រព័ន្ធ Column Chromatography (Silica gel) ដោយប្រើល្បាយសូលុយស្យុង n-hexane និង ethyl acetate
  5. ជំហានទី៥៖ ការវិភាគរចនាសម្ព័ន្ធគីមី (Structural Elucidation): ប្រមូលប្រភាគ (Fractions) ដែលមានសារធាតុប្រហាក់ប្រហែលគ្នា (ពិនិត្យតាមរយៈ TLC) មកបន្សុទ្ធបន្ត រួចបញ្ជូនសំណាកបរិសុទ្ធទៅវិភាគរចនាសម្ព័ន្ធម៉ូលេគុល ដោយប្រើម៉ាស៊ីន Nuclear Magnetic Resonance (NMR) និង APCI-Mass Spectrometry ដើម្បីបញ្ជាក់ថាវាជាសារធាតុ Stigmasterol

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Free radicals (រ៉ាឌីកាល់សេរី) ម៉ូលេគុលអស្ថិរភាពដែលអាចបំផ្លាញរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកាសំខាន់ៗក្នុងរាងកាយ (ដូចជាប្រូតេអ៊ីន ខ្លាញ់ និង DNA) ដែលបណ្តាលឱ្យមានភាពចាស់ជរា និងជំងឺរ៉ាំរ៉ៃផ្សេងៗ។ ប្រៀបដូចជាច្រែះដែលស៊ីដែកបន្តិចម្តងៗ វាបំផ្លាញកោសិការាងកាយយើងពីខាងក្នុងដោយសារប្រតិកម្មគីមីមិនល្អ។
HIV-1 reverse transcriptase (អង់ស៊ីមបម្លែងបញ្ច្រាសរបស់វីរុស HIV-1) ជាអង់ស៊ីមដ៏សំខាន់ដែលវីរុសអេដស៍ប្រើដើម្បីចម្លងព័ត៌មានសេនេទិចពីរីបូនុយក្លេអ៊ីក (RNA) ទៅជា DNA មុននឹងបញ្ចូលខ្លួនទៅក្នុងកោសិកាមនុស្សដើម្បីបន្តពូជ។ ប្រៀបដូចជាម៉ាស៊ីនកូពីអក្សរដែលមេរោគប្រើដើម្បីថតចម្លងប្លង់មេរបស់វា មុននឹងបញ្ជូនទៅផលិតមេរោគថ្មីៗរាប់លានទៀតក្នុងរាងកាយយើង។
Stigmasterol (សារធាតុស្ទីកម៉ាស្ទែរ៉ុល) ជាប្រភេទសារធាតុស្តេរ៉ូលរុក្ខជាតិ (Phytosterol) ដែលមានសកម្មភាពជីវសាស្ត្រខ្ពស់ អាចជួយប្រឆាំងនឹងការរលាក ការពារអុកស៊ីតកម្ម និងមានសក្តានុពលប្រឆាំងវីរុស។ ប្រៀបដូចជាកូឡេស្តេរ៉ុលល្អរបស់រុក្ខជាតិ ដែលដើរតួជាកងការពារជួយទប់ស្កាត់ការខូចខាតកោសិកា និងទប់ទល់មេរោគ។
Column chromatography (បច្ចេកទេសក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីប្រភេទជួរឈរ) ជាបច្ចេកទេសមន្ទីរពិសោធន៍សម្រាប់បំបែកសារធាតុគីមីនីមួយៗចេញពីល្បាយចម្រុះ ដោយពឹងផ្អែកលើល្បឿនខុសគ្នានៃការរំកិលខ្លួនរបស់សារធាតុទាំងនោះឆ្លងកាត់បំពង់ដែលមានផ្ទុកសារធាតុរឹង (ដូចជា Silica gel)។ ប្រៀបដូចជាការប្រណាំងរត់ឆ្លងកាត់ផ្លូវមានឧបសគ្គ សារធាតុណាដែលស្រាលនិងរហ័សជាងនឹងរត់ដល់គោលដៅមុន ធ្វើឱ្យយើងអាចចាប់យកពួកវាដាច់ដោយឡែកពីគ្នាបាន។
Nuclear Magnetic Resonance (NMR) spectroscopy (ការវិភាគរចនាសម្ព័ន្ធដោយស្ប៉ិចត្រូស្កូពីអនុភាពម៉ាញេទិកនុយក្លេអ៊ែរ) ជាឧបករណ៍វិភាគកម្រិតខ្ពស់ដែលប្រើប្រាស់ដែនម៉ាញេទិកដើម្បីកំណត់ទីតាំងជាក់លាក់នៃអាតូមអ៊ីដ្រូសែន និងកាបូន សម្រាប់គូសប្លង់រចនាសម្ព័ន្ធពិតប្រាកដរបស់ម៉ូលេគុលណាមួយ។ ប្រៀបដូចជាការថតស្កែន MRI សម្រាប់ម៉ូលេគុល ដែលបង្ហាញឱ្យអ្នកវិទ្យាសាស្ត្រឃើញច្បាស់ថាតើអាតូមនីមួយៗតភ្ជាប់គ្នាយ៉ាងដូចម្តេច។
IC50 (កំហាប់រារាំងពាក់កណ្តាលអតិបរមា) ជារង្វាស់បញ្ជាក់ពីកំហាប់នៃសារធាតុណាមួយដែលត្រូវការចាំបាច់ដើម្បីទប់ស្កាត់សកម្មភាពជីវសាស្ត្រ (ដូចជាការកើនឡើងនៃវីរុស ឬរ៉ាឌីកាល់សេរី) ឱ្យបាន ៥០ភាគរយនៃការលូតលាស់សរុប។ ប្រៀបដូចជាការស្វែងរកបរិមាណថ្នាំតិចបំផុតដែលចាំបាច់ត្រូវប្រើ ដើម្បីសម្លាប់ ឬបញ្ឈប់សត្រូវឱ្យបានពាក់កណ្តាល។
Phenolic compounds (សមាសធាតុផេណូលីក) ជាក្រុមសារធាតុគីមីបន្ទាប់បន្សំរបស់រុក្ខជាតិដែលសម្បូរទៅដោយបណ្តុំអ៊ីដ្រុកស៊ីល (Hydroxyl groups) ដែលមានសមត្ថភាពខ្ពស់ក្នុងការចាប់យកនិងបន្សាបរ៉ាឌីកាល់សេរី។ ប្រៀបដូចជាឡេការពារកម្តៅថ្ងៃធម្មជាតិរបស់រុក្ខជាតិ ដែលជួយការពារកោសិកាពីការបំផ្លាញដោយបរិស្ថានខាងក្រៅ។
Lipophilic extract (សារធាតុចម្រាញ់ដែលរលាយក្នុងខ្លាញ់) ជាផ្នែកនៃសារធាតុចម្រាញ់ពីរុក្ខជាតិដែលអាចរលាយបានល្អនៅក្នុងខ្លាញ់ ប្រេង ឬសារធាតុរំលាយដែលគ្មានប៉ូល (Non-polar solvents) ហើយមិនរលាយក្នុងទឹកឡើយ។ ប្រៀបដូចជាប្រេងដែលអណ្តែតបំបែកចេញពីទឹក វាផ្ទុកនូវសារធាតុពិសេសៗដែលមិនចុះសម្រុងជាមួយទឹក។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖