Original Title: Isolation and Selection of Bacillus pumilus against Colistin-Resistant Escherichia coli F4
Source: doi.org/10.31817/vjas.2025.8.2.01
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការបំបែក និងការជ្រើសរើស Bacillus pumilus ដើម្បីប្រឆាំងនឹង Escherichia coli F4 ដែលស៊ាំនឹងថ្នាំ Colistin

ចំណងជើងដើម៖ Isolation and Selection of Bacillus pumilus against Colistin-Resistant Escherichia coli F4

អ្នកនិពន្ធ៖ Nguyen Thi Lan (Faculty of Veterinary Medicine, Vietnam National University of Agriculture), Nguyen Thi Thu Hang (Faculty of Veterinary Medicine, Vietnam National University of Agriculture), Tran Hiep (Faculty of Animal Sciences, Vietnam National University of Agriculture), Hoang Minh Son (Faculty of Veterinary Medicine, Vietnam National University of Agriculture), Hoang Viet Giang (Faculty of Food Science and Technology, Vietnam National University of Agriculture), Hoang Minh Duc (Faculty of Veterinary Medicine, Vietnam National University of Agriculture)

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2025 Vietnam Journal of Agricultural Sciences

វិស័យសិក្សា៖ Veterinary Medicine

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ជំងឺរាគរូសនៅក្នុងកូនជ្រូកដែលបង្កឡើងដោយបាក់តេរី Escherichia coli ស៊ាំនឹងថ្នាំអង់ទីប៊ីយ៉ូទិក ជាពិសេសសេរ៉ូទីប F4 នៅតែជាបញ្ហាប្រឈមដ៏ធំ និងបណ្តាលឱ្យមានការខាតបង់សេដ្ឋកិច្ចយ៉ាងធ្ងន់ធ្ងរដល់ឧស្សាហកម្មចិញ្ចឹមជ្រូក ដែលទាមទារឱ្យមានការស្វែងរកជម្រើសថ្មីដើម្បីជំនួសថ្នាំអង់ទីប៊ីយ៉ូទិក។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ ការសិក្សានេះបានធ្វើការបំបែក និងវាយតម្លៃលក្ខណៈរបស់បាក់តេរី Bacillus pumilus ពីសំណាកលាមកជ្រូកដែលមានសុខភាពល្អ តាមរយៈវិធីសាស្ត្រមួយចំនួន ដើម្បីស្វែងរកភ្នាក់ងារប្រូបាយអូទិក (Probiotic) ។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
16S rRNA Sequencing & MALDI-TOF
ការវិភាគលំដាប់ហ្សែន 16S rRNA និង MALDI-TOF សម្រាប់ការកំណត់អត្តសញ្ញាណ
ផ្តល់លទ្ធផលច្បាស់លាស់ និងមានភាពជឿជាក់ខ្ពស់ក្នុងការកំណត់អត្តសញ្ញាណប្រភេទបាក់តេរីដល់កម្រិតអំបូរ (Species level)។ ទាមទារឧបករណ៍ទំនើប ជំនាញបច្ចេកទេសខ្ពស់ និងមានការចំណាយច្រើនលើម៉ាស៊ីន PCR និងសេវាកម្មអានលំដាប់ហ្សែន។ បានកំណត់អត្តសញ្ញាណបាក់តេរីចំនួន ៣ ប្រភេទយ៉ាងច្បាស់លាស់ថាជា Bacillus pumilus
Agar Well Diffusion Method
វិធីសាស្ត្ររន្ធនៅលើចាហួយ សម្រាប់វាយតម្លៃសកម្មភាពប្រឆាំងបាក់តេរី
ងាយស្រួលអនុវត្ត ចំណាយតិច និងផ្តល់លទ្ធផលអាចមើលឃើញផ្ទាល់ភ្នែកយ៉ាងរហ័សអំពីទំហំនៃការរារាំងបាក់តេរី។ ជាការធ្វើតេស្តក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ (In vitro) ដែលមិនតំណាងឱ្យបរិយាកាសដ៏ស្មុគស្មាញ និងអន្តរកម្មពិតប្រាកដនៅក្នុងពោះវៀនសត្វទាំងស្រុងនោះទេ។ បង្ហាញពីទំហំតំបន់រារាំង (Inhibition zone) ពី ១៦ ទៅ ១៩ មីលីម៉ែត្រ ប្រឆាំងនឹង E. coli F4។
In vitro Gastrointestinal Tolerance Tests
ការធ្វើតេស្តភាពធន់ក្នុងបរិយាកាសត្រាប់តាមក្រពះពោះវៀន (កម្រិត pH និងអំបិលប្រមាត់)
អនុញ្ញាតឱ្យវាយតម្លៃសមត្ថភាពរស់រានរបស់បាក់តេរីប្រូបាយអូទិកមុនពេលយកទៅសាកល្បងផ្ទាល់លើសត្វ ដែលជួយសន្សំសំចៃពេលវេលា និងថវិកា។ មិនបានគិតបញ្ចូលពីកត្តាជីវសាស្រ្តផ្សេងៗទៀតដូចជា អង់ស៊ីមរំលាយអាហារ ឬការប្រកួតប្រជែងជាមួយបាក់តេរីធម្មជាតិក្នុងពោះវៀន។ បាក់តេរីមានអត្រារស់រានខ្ពស់ចន្លោះពី ៧៧.៩៧% ទៅ ៩៥.៣៨% ក្នុងលក្ខខណ្ឌ pH 3.0 និង ៨២.៦១% ទៅ ៩៣.៦២% ក្នុងលក្ខខណ្ឌអំបិលប្រមាត់ 0.3%។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការសិក្សានេះទាមទារនូវសម្ភារៈ និងឧបករណ៍មន្ទីរពិសោធន៍កម្រិតមធ្យមទៅខ្ពស់ ជាពិសេសសម្រាប់ការវិភាគផ្នែកជីវសាស្ត្រម៉ូលេគុល និងបច្ចេកទេសមីក្រូជីវសាស្ត្រ។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះត្រូវបានធ្វើឡើងដោយប្រមូលសំណាកលាមកជ្រូកចំនួន ១០០ ពីកសិដ្ឋាននៅទីក្រុងហាណូយ និងខេត្ត Hung Yen ប្រទេសវៀតណាម។ ដោយសារតែលក្ខខណ្ឌអាកាសធាតុ ពូជជ្រូក និងរបបចំណីអាចមានភាពស្រដៀងគ្នានឹងកម្ពុជា លទ្ធផលនេះអាចមានភាពពាក់ព័ន្ធខ្ពស់ ប៉ុន្តែប្រព័ន្ធមីក្រូជីវសាស្រ្តក្នុងពោះវៀនជ្រូក (Gut microbiome) និងប្រភេទបាក់តេរី E. coli ឆ្លងរាលដាលនៅកម្ពុជាអាចមានភាពខុសប្លែកគ្នា ដែលតម្រូវឱ្យមានការសិក្សាផ្ទៀងផ្ទាត់បន្ថែមក្នុងស្រុក។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

ការរកឃើញ និងការប្រើប្រាស់ភ្នាក់ងារប្រូបាយអូទិកជំនួសថ្នាំអង់ទីប៊ីយ៉ូទិក គឺមានសារៈសំខាន់ខ្លាំងណាស់ និងស្របតាមតម្រូវការជាក់ស្តែងសម្រាប់វិស័យចិញ្ចឹមសត្វនៅកម្ពុជា។

ជារួម ការអភិវឌ្ឍប្រូបាយអូទិកពីបាក់តេរី B. pumilus គឺជាដំណោះស្រាយប្រកបដោយសក្តានុពល និងនិរន្តរភាព ដើម្បីប្រយុទ្ធប្រឆាំងនឹងភាពស៊ាំនឹងថ្នាំ និងលើកកម្ពស់ផលិតភាពជ្រូកនៅកម្ពុជា។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. ស្វែងយល់ពីបច្ចេកទេសបណ្តុះមេរោគ: ចាប់ផ្តើមអនុវត្តការបំបែក និងបណ្តុះបាក់តេរីពីសំណាកលាមកសត្វ ដោយប្រើប្រាស់មជ្ឈដ្ឋាន Tryptone Soya Agar (TSA) និង BHI broth រួចសិក្សាពីលក្ខណៈរូបរាងកោសិកាតាមរយៈមីក្រូទស្សន៍។
  2. អនុវត្តការកំណត់អត្តសញ្ញាណបាក់តេរីតាមបែបម៉ូលេគុល: រៀនប្រើប្រាស់ម៉ាស៊ីន PCR និងបច្ចេកទេសស្រង់ DNA ព្រមទាំងអនុវត្តការប្រូមីត (Amplify) ហ្សែន 16S rRNA ជាមួយនឹង Universal Primers (8F, 1429R) សម្រាប់បញ្ជាក់ពូជបាក់តេរីឱ្យបានច្បាស់លាស់។
  3. សាកល្បងសមត្ថភាពប្រឆាំងបាក់តេរី និងធ្វើតេស្តសុវត្ថិភាព: អនុវត្តការធ្វើតេស្ត Agar well diffusion method ដើម្បីវាស់វែងទំហំតំបន់រារាំងរបស់ប្រូបាយអូទិកទៅលើបាក់តេរីបង្កជំងឺដូចជា E. coli និងធ្វើតេស្តនៅលើ Blood agar ដើម្បីប្រាកដថាវាគ្មានសកម្មភាពបំបែកគ្រាប់ឈាមក្រហម។
  4. វាយតម្លៃស្ថិរភាពប្រូបាយអូទិក: រៀបចំការធ្វើតេស្តត្រាប់តាមលក្ខខណ្ឌក្រពះពោះវៀន ដោយពិនិត្យមើលអត្រារស់រានរបស់បាក់តេរីក្នុងសូលុយស្យុង PBS ដែលមានកម្រិត pH 3.0 និងអំបិលប្រមាត់ 0.3% bile salt រយៈពេល៣ម៉ោង។
  5. អនុវត្តគម្រោងស្រាវជ្រាវក្នុងស្រុក: សហការជាមួយមន្ទីរពិសោធន៍បសុពេទ្យ និងកសិដ្ឋានចិញ្ចឹមជ្រូកក្នុងស្រុក ដើម្បីប្រមូលសំណាក និងវាយតម្លៃប្រសិទ្ធភាពបាក់តេរីប្រូបាយអូទិក ប្រឆាំងទៅនឹងបាក់តេរី E. coli ស៊ាំនឹងថ្នាំអង់ទីប៊ីយ៉ូទិកដែលកំពុងរាលដាលនៅកម្ពុជា។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Probiotics (ប្រូបាយអូទិក) មីក្រូសរីរាង្គមានជីវិត (ជាទូទៅជាបាក់តេរីល្អ) ដែលនៅពេលផ្តល់ឱ្យសត្វ ឬមនុស្សក្នុងបរិមាណសមស្រប វាផ្តល់ផលប្រយោជន៍ដល់សុខភាព ដូចជាជួយរក្សាតុល្យភាពមេរោគក្នុងពោះវៀន ជួយការរំលាយអាហារ និងពង្រឹងប្រព័ន្ធភាពស៊ាំ។ ដូចជាកងទ័ពការពារស្រុកដែលជួយទប់ទល់នឹងសត្រូវ (មេរោគអាក្រក់) មិនឱ្យចូលមកយាយីក្នុងពោះវៀនរបស់សត្វ។
Colistin-resistant (ភាពស៊ាំនឹងថ្នាំ Colistin) សមត្ថភាពរបស់បាក់តេរីក្នុងការរស់រានមានជីវិត ទោះបីជាមានវត្តមានថ្នាំអង់ទីប៊ីយ៉ូទិក Colistin (ដែលជាថ្នាំសង្គ្រោះចុងក្រោយបង្អស់) ក៏ដោយ។ ភាពស៊ាំនេះច្រើនតែកើតឡើងនៅពេលបាក់តេរីទទួលបានហ្សែនបំប្លែងថ្មី (ឧ. ហ្សែន mcr-1) ដែលការពារភ្នាសកោសិការបស់វា។ ដូចជាចោរដែលចេះពាក់អាវក្រោះពិសេសការពារគ្រាប់កាំភ្លើង ធ្វើឱ្យប៉ូលិស (ថ្នាំពេទ្យខ្លាំងៗ) មិនអាចបាញ់សម្លាប់បាន។
Enterotoxigenic Escherichia coli / ETEC (បាក់តេរី Escherichia coli បង្កជាតិពុលក្នុងពោះវៀន) ប្រភេទបាក់តេរី E. coli ដែលអាចតោងជាប់នឹងជញ្ជាំងពោះវៀនតាមរយៈរោមរបស់វា (fimbriae ដូចជា F4) ហើយបញ្ចេញជាតិពុល (Enterotoxins) ដែលបណ្តាលឱ្យកោសិកាពោះវៀនបញ្ចេញជាតិទឹកច្រើនខុសធម្មតា បង្កជាជំងឺរាគរូសធ្ងន់ធ្ងរ និងអាចបណ្តាលឱ្យស្លាប់។ ដូចជាភ្ញៀវពុលដែលចូលមកតោងជាប់ក្នុងផ្ទះ (ពោះវៀន) រួចបញ្ចេញឧស្ម័នពុល ធ្វើឱ្យម្ចាស់ផ្ទះក្អួតចង្អោរ និងរាករូសរហូតដល់អស់កម្លាំង។
Hemolytic activity (សកម្មភាពបំបែកគ្រាប់ឈាមក្រហម) សមត្ថភាពរបស់បាក់តេរីក្នុងការផលិតអង់ស៊ីម ឬជាតិពុលដែលបំផ្លាញកោសិកាគ្រាប់ឈាមក្រហម។ ក្នុងការជ្រើសរើសប្រូបាយអូទិក បាក់តេរីត្រូវតែគ្មានសកម្មភាពនេះ (non-hemolytic ឬ γ-hemolysis) ដើម្បីធានាថាវាមិនបង្កគ្រោះថ្នាក់ដល់រាងកាយសត្វពេលវាចូលទៅក្នុងប្រព័ន្ធរំលាយអាហារ។ ដូចជាសត្រូវដែលចូលមកទម្លុះបំបែកគ្រាប់ប៉េងប៉ោង (គ្រាប់ឈាមក្រហម) នៅក្នុងខ្លួនរបស់យើង។ បាក់តេរីល្អ (ប្រូបាយអូទិក) គឺមិនត្រូវមានអាវុធសម្រាប់បំបែកប៉េងប៉ោងនេះទេ។
16S rRNA sequencing (ការអានលំដាប់ហ្សែន 16S rRNA) បច្ចេកទេសជីវសាស្ត្រម៉ូលេគុលដែលប្រើប្រាស់សម្រាប់កំណត់អត្តសញ្ញាណ និងចំណាត់ថ្នាក់ពូជបាក់តេរីយ៉ាងច្បាស់លាស់ ដោយការវិភាគលើលំដាប់កូដហ្សែន 16S rRNA ដែលមានវត្តមាន និងមានលក្ខណៈពិសេសខុសៗគ្នានៅក្នុងគ្រប់ប្រភេទបាក់តេរីទាំងអស់។ ដូចជាការស្កេនក្រសោបស្នាមម្រាមដៃ ឬលេខអត្តសញ្ញាណប័ណ្ណ ដើម្បីដឹងច្បាស់ថាជននេះ (បាក់តេរី) ជាអ្នកណា និងមកពីគ្រួសារណា។
Agar well diffusion method (វិធីសាស្ត្ររន្ធនៅលើចាហួយ) វិធីសាស្ត្រក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ដើម្បីវាស់ស្ទង់សមត្ថភាពប្រឆាំងបាក់តេរីបង្កជំងឺ។ គេចោះរន្ធតូចៗលើបន្ទះចាហួយដែលមានបណ្តុះមេរោគ រួចចាក់សារធាតុសាកល្បង (ឧ. ទឹកបណ្តុះប្រូបាយអូទិក) ចូល។ បើសារធាតុនោះមានប្រសិទ្ធភាព វានឹងបង្កើតជា "តំបន់រារាំង" (Inhibition zone) ដែលគ្មានមេរោគអាចដុះជុំវិញរន្ធនោះបាន។ ដូចជាការទម្លាក់គ្រាប់បែកទឹកលាងចានចូលកណ្តាលហ្វូងស្រមោច ហើយស្រមោចនាំគ្នារត់ចេញ បង្កើតបានជារង្វង់ទទេមួយនៅជុំវិញរន្ធនោះ។
Bacteriocins (បាក់តេរីយូស៊ីន) ជាសមាសធាតុប្រូតេអ៊ីន ឬពហុប៉ិបទីត ដែលផលិតដោយបាក់តេរីមួយប្រភេទ (ឧ. ប្រូបាយអូទិក) ដើម្បីសម្លាប់ ឬរារាំងការលូតលាស់របស់បាក់តេរីផ្សេងទៀតដែលរស់នៅក្នុងបរិស្ថានប្រកួតប្រជែងជាមួយវា ជួយឱ្យវាអាចរស់រាន និងគ្រប់គ្រងទីតាំងនោះបាន។ ដូចជាអាវុធគីមី ឬថ្នាំពុលដែលរុក្ខជាតិ ឬសត្វបញ្ចេញដើម្បីសម្លាប់គូសត្រូវដែលមកដណ្តើមទីជម្រក និងចំណីរបស់វា។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖