Original Title: Enzyme Production of Trichoderma spp. Isolated from Soil and Mushroom Spawn
Source: doi.org/10.14456/thaidoa-agres.2024.6
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការផលិតអង់ស៊ីមរបស់ផ្សិត Trichoderma spp. ដែលបំបែកចេញពីដី និងមេផ្សិត

ចំណងជើងដើម៖ Enzyme Production of Trichoderma spp. Isolated from Soil and Mushroom Spawn

អ្នកនិពន្ធ៖ Payungsak Rauyaree (Biotechnology Research and Development Office, Department of Agriculture), Tassanaporn Tassakorn (Plant Protection Research and Development Office, Department of Agriculture)

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2024, Thai Agricultural Research Journal

វិស័យសិក្សា៖ Agricultural Biotechnology

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ការស្រាវជ្រាវនេះដោះស្រាយបញ្ហានៃការស្វែងរកភ្នាក់ងារជីវសាស្រ្ត (Biocontrol agents) ដ៏មានប្រសិទ្ធភាពដើម្បីជំនួសការប្រើប្រាស់សារធាតុគីមីកសិកម្ម។ វាផ្តោតលើការវាយតម្លៃសមត្ថភាពរបស់ផ្សិត Trichoderma ក្នុងការផលិតអង់ស៊ីមដែលអាចបំបែកកោសិការបស់មេរោគរុក្ខជាតិ។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ ការសិក្សានេះបានប្រើប្រាស់បច្ចេកទេសតំបន់បំបែកកោសិកាដើម្បីវាយតម្លៃការផលិតអង់ស៊ីម និងប្រើប្រាស់ការវិភាគលំដាប់ហ្សែនដើម្បីកំណត់អត្តសញ្ញាណប្រភេទផ្សិត។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Zone Clearing Technique on CMC Agar
បច្ចេកទេសតំបន់បំបែកកោសិការលើមជ្ឈដ្ឋាន CMC សម្រាប់អង់ស៊ីម Cellulase
ងាយស្រួលអនុវត្ត មើលឃើញលទ្ធផលផ្ទាល់ភ្នែកតាមរយៈរង្វង់ថ្លាជុំវិញកូឡូនីផ្សិត។ ត្រូវការប្រើប្រាស់សារធាតុពណ៌ (Congo red) សម្រាប់ការអានលទ្ធផល និងចំណាយពេល ៧២ ម៉ោង។ សំណាក T-14 បង្ហាញតម្លៃសមត្ថភាពអ៊ីដ្រូលីស៊ីស (HC value) ខ្ពស់បំផុតរហូតដល់ 7.13។
Zone Clearing Technique on Czapek-Dox Agar + Pectin
បច្ចេកទេសតំបន់បំបែកកោសិការលើមជ្ឈដ្ឋាន Czapek-Dox សម្រាប់អង់ស៊ីម Pectinase
មានប្រសិទ្ធភាពក្នុងការកំណត់សម្គាល់ផ្សិតដែលអាចបំបែក pectin ដែលជាប្រភពកាបូន។ ទាមទារការប្រើប្រាស់សារធាតុរាវ iodine-potassium iodide ដើម្បីបង្ហាញតំបន់ដែលមិនជាប់ពណ៌។ សំណាក T-1 ផ្តល់នូវតម្លៃ HC ខ្ពស់បំផុតរហូតដល់ 7.73 ធៀបនឹងសំណាកដទៃទៀត។
Zone Clearing Technique on Starch Agar
បច្ចេកទេសតំបន់បំបែកកោសិការលើមជ្ឈដ្ឋាន Starch Agar សម្រាប់អង់ស៊ីម Amylase
មានភាពសាមញ្ញ និងផ្តល់សូចនាករច្បាស់លាស់ក្នុងការកំណត់អត្តសញ្ញាណអង់ស៊ីមរំលាយម្សៅ។ ត្រូវប្រើប្រាស់សារធាតុ 3% Iodine សម្រាប់រយៈពេល ១៥ នាទី និងលាងសម្អាតដោយទឹកចម្រោះ។ សំណាក T-22 សម្រេចបានតម្លៃ HC ខ្ពស់ជាងគេគឺ 5.00 ក្នុងចំនោមសំណាកទាំង ២៩។
ITS Gene Sequencing (ITS4 and ITS5)
ការវិភាគលំដាប់ហ្សែនតំបន់ ITS ដោយប្រើប្រាស់គូ Primer ITS4 និង ITS5
មានភាពសុក្រឹតនិងភាពជាក់លាក់ខ្ពស់ក្នុងការកំណត់អត្តសញ្ញាណដល់កម្រិតប្រភេទ (Species) នៃផ្សិត។ ទាមទារការចំណាយថវិកាច្រើន និងត្រូវការឧបករណ៍បច្ចេកវិទ្យាទំនើប ឬត្រូវបញ្ជូនសំណាកទៅក្រៅប្រទេស។ បញ្ជាក់ថាសំណាក T-1, T-14 និង T-22 គឺជា Trichoderma asperellum ដែលមានអត្រាភាពដូចគ្នា ៩៩-១០០% ។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការសិក្សានេះមិនបានបញ្ជាក់ពីការចំណាយលម្អិតនោះទេ ប៉ុន្តែវាទាមទារនូវឧបករណ៍មន្ទីរពិសោធន៍ជីវវិទ្យា និងសារធាតុគីមីសម្រាប់បណ្ដុះផ្សិត ព្រមទាំងសេវាកម្មខាងក្រៅសម្រាប់ការវិភាគហ្សែន។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះបានប្រមូលសំណាកពីដី និងកាកសំណល់ដាំផ្សិតនៅក្នុងខេត្តចម្ការមួយចំនួនរបស់ប្រទេសថៃ ដូចជាខេត្ត Kanchanaburi និង Ratchaburi ជាដើម។ ដោយសារប្រទេសថៃនិងកម្ពុជាមានលក្ខខណ្ឌអាកាសធាតុ អេកូឡូស៊ី និងប្រភេទដំណាំកសិកម្មស្រដៀងគ្នា លទ្ធផលនេះអាចមានភាពពាក់ព័ន្ធ និងអាចយកមកអនុវត្តបានច្រើននៅកម្ពុជា។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

ការប្រើប្រាស់ផ្សិត Trichoderma spp. ជាភ្នាក់ងារជីវសាស្រ្ត គឺមានសក្តានុពលខ្លាំងសម្រាប់វិស័យកសិកម្មនៅកម្ពុជា ដើម្បីកាត់បន្ថយការពឹងផ្អែកលើការប្រើប្រាស់ថ្នាំគីមី។

ការជំរុញការប្រើប្រាស់ផ្សិត Trichoderma asperellum នឹងជួយលើកកម្ពស់ស្តង់ដារកសិកម្មសរីរាង្គនៅកម្ពុជា ព្រមទាំងការពារបរិស្ថានពីសំណល់ថ្នាំគីមីពុលរុក្ខជាតិ។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. ការប្រមូល និងបំបែកសំណាកផ្សិតមូលដ្ឋាន: ចុះប្រមូលសំណាកដី និងកាកសំណល់ដាំផ្សិតតាមមូលដ្ឋាននៅកម្ពុជា រួចយកមកបណ្ដុះលើមជ្ឈដ្ឋាន PDA (Potato Dextrose Agar) ដើម្បីបំបែកយកកូឡូនីផ្សិត Trichoderma spp. សុទ្ធ។
  2. ការធ្វើតេស្តសមត្ថភាពផលិតអង់ស៊ីម: អនុវត្តវិធីសាស្ត្រ Zone Clearing Technique លើមជ្ឈដ្ឋានជម្រើសមានដូចជា CMC និង Starch agar ដើម្បីស្វែងរកកូឡូនីដែលមានសមត្ថភាពបំបែកកោសិកាបានល្អបំផុត (តម្លៃ HC ខ្ពស់)។
  3. ការកំណត់អត្តសញ្ញាណប្រភេទផ្សិត (Molecular Identification): ស្រង់យក DNA ពីសំណាកផ្សិតដែលមានសក្តានុពល និងបញ្ជូនទៅធ្វើតេស្ត ITS Sequencing រួចប្រើប្រាស់កម្មវិធី NCBI BLAST ដើម្បីបញ្ជាក់ឱ្យច្បាស់ពីប្រភេទ (Species) របស់វា។
  4. ការសាកល្បងប្រសិទ្ធភាពក្នុងផ្ទះកញ្ចក់: យកប្រភេទផ្សិត Trichoderma asperellum ដែលត្រូវបានជ្រើសរើស ទៅសាកល្បងបាញ់ផ្ទាល់លើកូនដំណាំក្នុងផ្ទះកញ្ចក់ ដើម្បីវាយតម្លៃសមត្ថភាពទប់ស្កាត់ជំងឺរុក្ខជាតិ (Biocontrol Efficacy) និងការលូតលាស់របស់រុក្ខជាតិពិតប្រាកដ។
  5. ការបង្កើតគម្រោងសាកល្បងសហគមន៍កសិកម្ម: សហការជាមួយសហគមន៍កសិកម្ម និងវិទ្យាស្ថានស្រាវជ្រាវ (ឧ. វិទ្យាស្ថានស្រាវជ្រាវនិងអភិវឌ្ឍន៍កសិកម្មកម្ពុជា CARDI) ដើម្បីពង្រីកផលិតកម្មមេផ្សិតនេះជាទំហំអាជីវកម្ម និងបណ្តុះបណ្តាលកសិករពីរបៀបប្រើប្រាស់។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Trichoderma spp. (ផ្សិតទ្រីកូដឺម៉ា) ជាប្រភេទផ្សិតម្យ៉ាងដែលមានប្រយោជន៍ក្នុងវិស័យកសិកម្ម ដែលមានសមត្ថភាពផលិតអង់ស៊ីមបំបែកកោសិកា និងប្រើប្រាស់ជាភ្នាក់ងារជីវសាស្រ្តដើម្បីទប់ស្កាត់និងកម្ចាត់ផ្សិតចង្រៃបង្កជំងឺលើរុក្ខជាតិ។ ដូចជាទាហានការពារស្រុក ដែលចាំវាយប្រហារ និងកម្ចាត់សត្រូវ (មេរោគរុក្ខជាតិ) មិនឱ្យមកបំផ្លាញដំណាំ។
Hydrolysis capacity / HC value (តម្លៃសមត្ថភាពអ៊ីដ្រូលីស៊ីស) ជារង្វាស់ដែលប្រើដើម្បីវាយតម្លៃសមត្ថភាពរបស់អតិសុខុមប្រាណក្នុងការផលិតអង់ស៊ីមបំបែកសារធាតុ ដោយវាស់ពីទំហំនៃរង្វង់ថ្លាដែលកើតឡើងជុំវិញកូឡូនីផ្សិតធៀបនឹងទំហំកូឡូនីផ្ទាល់។ ដូចជាការវាស់ទំហំរណ្ដៅដែលគ្រាប់បែកមួយអាចបំផ្ទុះបាន ដើម្បីដឹងថាគ្រាប់បែកនោះមានថាមពលកម្រិតណា។
Cellulase (សែលុយឡាស) ជាប្រភេទអង់ស៊ីមដែលបំបែកសែលុយឡូស (សមាសធាតុចម្បងនៃជញ្ជាំងកោសិការុក្ខជាតិ និងផ្សិតមួយចំនួន) ទៅជាស្ករសាមញ្ញ ដែលជួយពន្លឿនការរលួយកាកសំណល់រុក្ខជាតិ និងបំផ្លាញជញ្ជាំងកោសិកាមេរោគ។ ដូចជាកន្ត្រៃដ៏មុតស្រួចដែលកាត់សរសៃអំបោះ (សែលុយឡូស) ឱ្យទៅជាកម្ទេចតូចៗងាយស្រួលរលាយ។
Pectinase (ប៉ិចទីណាស) ជាអង់ស៊ីមដែលបំបែកសារធាតុប៉ិចទីន (pectin) ដែលជាសារធាតុស្អិតភ្ជាប់រវាងកោសិការុក្ខជាតិ ធ្វើឱ្យកោសិកាដាច់ចេញពីគ្នា និងងាយស្រួលរំលាយ ឬធ្វើឱ្យមេរោគងាយជ្រៀតចូល។ ដូចជាសារធាតុរំលាយកាវ ដែលធ្វើឱ្យឥដ្ឋ (កោសិកា) ដែលបិទជាប់គ្នាដោយស៊ីម៉ងត៍ (ប៉ិចទីន) របើកចេញពីគ្នា។
Zone clearing technique (បច្ចេកទេសតំបន់បំបែក) ជាវិធីសាស្ត្រក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ដើម្បីពិនិត្យមើលការផលិតអង់ស៊ីម ដោយបណ្ដុះមេរោគលើចានចាហួយ រួចសង្កេតមើលការកើតឡើងនូវរង្វង់ថ្លាជុំវិញមេរោគ ដែលបញ្ជាក់ថាវាបានបំបែកសារធាតុចិញ្ចឹមនៅតំបន់នោះ។ ដូចជាការបោះដុំថ្មចូលក្នុងពំនូកខ្សាច់ ហើយសង្កេតមើលរង្វង់រណ្ដៅដែលកើតឡើងជុំវិញដុំថ្មនោះ ដើម្បីដឹងពីកម្លាំងនៃការប៉ះទង្គិច។
Internal Transcribed Spacer / ITS (តំបន់ហ្សែន ITS) ជាផ្នែកមួយនៃលំដាប់ DNA ដែលមិនបញ្ចេញកូដ (non-coding DNA) ដែលត្រូវបានគេប្រើជាម៉ាកឃ័រ (marker) ស្តង់ដារដើម្បីកំណត់អត្តសញ្ញាណ និងបែងចែកប្រភេទ (Species) របស់ផ្សិតឱ្យបានច្បាស់លាស់។ ដូចជាការស្កេនក្រយៅដៃ ឬបាកូដ (Barcode) របស់មនុស្សម្នាក់ៗ ដើម្បីដឹងច្បាស់ថាគាត់ជានរណា និងមកពីគ្រួសារណា។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖