Original Title: In vitro Antimicrobial Activity of Bacillus spp. Against Pathogenic Vibrio spp. in Black Tiger Shrimp (Penaeus monodon)
Source: li01.tci-thaijo.org
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

សកម្មភាពប្រឆាំងមេរោគនៅក្នុងបំពង់សាកល្បង (In vitro) នៃប្រភេទបាក់តេរី Bacillus spp. ប្រឆាំងនឹងបាក់តេរីបង្កជំងឺ Vibrio spp. ក្នុងបង្គាខ្លា (Penaeus monodon)

ចំណងជើងដើម៖ In vitro Antimicrobial Activity of Bacillus spp. Against Pathogenic Vibrio spp. in Black Tiger Shrimp (Penaeus monodon)

អ្នកនិពន្ធ៖ Vichai Domrongpokkaphan (Department of Biotechnology, Faculty of Agro-Industry, Kasetsart University, Bangkok 10900, Thailand), Penkhae Wanchaitanawong (Department of Biotechnology, Faculty of Agro-Industry, Kasetsart University, Bangkok 10900, Thailand)

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2006 Kasetsart J. (Nat. Sci.)

វិស័យសិក្សា៖ Aquaculture

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ជំងឺបង្កដោយបាក់តេរី Vibrio (ជាពិសេស V. harveyi) កំពុងបង្កឱ្យមានការខាតបង់សេដ្ឋកិច្ចយ៉ាងធ្ងន់ធ្ងរដល់ឧស្សាហកម្មចិញ្ចឹមបង្គាខ្លា (Penaeus monodon) ខណៈដែលការប្រើប្រាស់ថ្នាំអង់ទីប៊ីយោទិចកំពុងបណ្តាលឱ្យមានបញ្ហាបរិស្ថាន និងភាពស៊ាំរបស់បាក់តេរី។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ ការសិក្សានេះបានធ្វើការចម្រាញ់បាក់តេរីពពួក Bacillus ពីលំពែងនិងថ្លើមបង្គាខ្លា ដើម្បីធ្វើតេស្តសកម្មភាពប្រឆាំងមេរោគលើបាក់តេរីពពួក Vibrio ចំនួន៤ប្រភេទតាមរយៈវិធីសាស្ត្រមន្ទីរពិសោធន៍។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Agar well diffusion assay
ការធ្វើតេស្តសាយភាយលើរន្ធចាហួយ (Agar Well Diffusion Assay)
ងាយស្រួលក្នុងការអនុវត្ត និងមានប្រសិទ្ធភាពក្នុងការពិនិត្យរកមើលសកម្មភាពប្រឆាំងមេរោគបឋម និងកំណត់កំហាប់អប្បបរមា (MIC) របស់បាក់តេរីច្រើនប្រភេទក្នុងពេលតែមួយ។ មិនអាចឆ្លុះបញ្ចាំងពីសកម្មភាពប្រកួតប្រជែងជាក់ស្តែងរបស់បាក់តេរីនៅក្នុងមជ្ឈដ្ឋានរាវ ឬក្នុងស្រះចិញ្ចឹមបង្គាផ្ទាល់នោះទេ ព្រោះចលនានៃម៉ូលេគុលត្រូវបានកំណត់ដោយភាពរឹងរបស់ចាហួយ។ បានរកឃើញបាក់តេរី Bacillus ៤ប្រភេទ (B17, B19, B21, B25) ដែលមានតំបន់រារាំង (inhibition zone) ធំជាងគេ និងមានកំហាប់អប្បបរមា (MIC) កម្រិត 5.0x10^5 cfu/ml។
Broth co-culture assay
ការធ្វើតេស្តប្រកួតប្រជែងនៅក្នុងទឹកស៊ុបបណ្តុះមេរោគ (Broth Co-culture Assay)
អាចតាមដានអត្រានៃការរស់រាន និងការលូតលាស់របស់បាក់តេរីបង្កជំងឺតាមពេលវេលាជាក់ស្តែង ដែលផ្តល់លទ្ធផលប្រហាក់ប្រហែលនឹងបរិស្ថានរាវក្នុងស្រះចិញ្ចឹម។ ទាមទារការតាមដានរៀងរាល់ម៉ោងកំណត់យ៉ាងតឹងរ៉ឹង (០, ១២, ២៤, ៣៦, ៤៨ ម៉ោង) ដែលចំណាយពេលយូរ និងកម្លាំងពលកម្មច្រើនក្នុងការរាប់ចំនួនបាក់តេរី (plate counting)។ បាក់តេរី Bacillus B17 និង B21 ក្នុងកំហាប់ 5.0x10^7 cfu/ml អាចទប់ស្កាត់ការលូតលាស់របស់ Vibrio harveyi ទាំងស្រុងក្នុងរយៈពេលត្រឹមតែ ១២ម៉ោង។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការស្រាវជ្រាវនេះទាមទារបរិក្ខារមន្ទីរពិសោធន៍មីក្រូជីវសាស្ត្រស្តង់ដារ និងមជ្ឈដ្ឋានបណ្តុះបាក់តេរីជាក់លាក់។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះប្រមូលសំណាកបាក់តេរី Bacillus ចេញពីបង្គាខ្លា (Penaeus monodon) និងធ្វើតេស្តក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍សាកលវិទ្យាល័យ Kasetsart ប្រទេសថៃ។ លក្ខខណ្ឌអាកាសធាតុ និងបរិស្ថានស្រះចិញ្ចឹមបង្គានៅប្រទេសកម្ពុជាមានលក្ខណៈស្រដៀងគ្នានឹងប្រទេសថៃ ដែលធ្វើឱ្យការស្រាវជ្រាវនេះមានតម្លៃជិតស្និទ្ធ ប៉ុន្តែការសាកល្បងដោយផ្ទាល់ជាមួយពូជបង្គា និងបាក់តេរីក្នុងតំបន់ឆ្នេររបស់កម្ពុជាពិតជាមានភាពចាំបាច់ ដើម្បីធានាប្រសិទ្ធភាពអតិបរមា។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

លទ្ធផលនៃការសិក្សានេះមានសក្តានុពលខ្ពស់សម្រាប់វិស័យវារីវប្បកម្មនៅប្រទេសកម្ពុជា ជាពិសេសក្នុងការកាត់បន្ថយការប្រើប្រាស់ថ្នាំអង់ទីប៊ីយោទិចដែលអាចប៉ះពាល់ដល់បរិស្ថាន។

ការប្រើប្រាស់ពពួកបាក់តេរី Bacillus ជាភ្នាក់ងារត្រួតពិនិត្យជីវសាស្រ្ត គឺជាដំណោះស្រាយប្រកបដោយនិរន្តរភាព សុវត្ថិភាពខ្ពស់ និងផ្តល់អត្ថប្រយោជន៍សេដ្ឋកិច្ចដល់ឧស្សាហកម្មចិញ្ចឹមបង្គានៅកម្ពុជា។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. ញែក និងកំណត់អត្តសញ្ញាណបាក់តេរីបឋម: ចុះប្រមូលសំណាកបង្គាខ្លាដែលរស់រានមានសុខភាពល្អពីតំបន់កសិដ្ឋានផ្សេងៗ ហើយប្រើប្រាស់ចាហួយបណ្តុះ TCBS Agar និង Nutrient Agar លាយជាមួយ NaCl ១.៥% ដើម្បីញែកយកបាក់តេរី Bacillus spp. ពីផ្នែកលំពែងនិងថ្លើម (Hepatopancreas) របស់វា។
  2. ធ្វើតេស្តសកម្មភាពប្រឆាំងមេរោគជាមូលដ្ឋាន: អនុវត្តវិធីសាស្ត្រ Agar Well Diffusion Assay នៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ ដើម្បីពិនិត្យមើលសមត្ថភាពរបស់បាក់តេរី Bacillus ដែលញែកបាន ក្នុងការរារាំងការលូតលាស់របស់បាក់តេរីបង្កជំងឺ Vibrio harveyi ដោយវាស់អង្កត់ផ្ចិតនៃតំបន់រារាំង (Inhibition zone)។
  3. កំណត់កំហាប់អប្បបរមា (MIC) និងធ្វើតេស្តប្រកួតប្រជែង: រៀបចំការធ្វើតេស្ត Broth Co-culture Assay ដោយប្រើប្រាស់ Shaker incubator ដើម្បីតាមដានអន្តរកម្មរវាងបាក់តេរីមានប្រយោជន៍ និងមេរោគក្នុងមជ្ឈដ្ឋានរាវរៀងរាល់ ១២ម៉ោងម្តង សំដៅស្វែងរកកំហាប់ដ៏ល្អបំផុតដែលទប់ស្កាត់មេរោគបាន ១០០%។
  4. ផលិតជាទម្រង់ម្សៅ និងធ្វើតេស្តសាកល្បងនៅកសិដ្ឋាន: សហការជាមួយមន្ទីរពិសោធន៍បច្ចេកវិទ្យាជីវៈ ដើម្បីប្រើប្រាស់ម៉ាស៊ីន Spray dryer ក្នុងការបំប្លែងបាក់តេរី Bacillus ដែលមានសក្តានុពលទៅជាទម្រង់ម្សៅ រួចយកទៅលាយជាមួយចំណីបង្គាសាកល្បងនៅកសិដ្ឋានពិតប្រាកដ ដើម្បីវាស់វែងអត្រារស់រានមានជីវិតជាក់ស្តែង។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
In vitro (នៅក្នុងបំពង់សាកល្បង ឬលក្ខខណ្ឌមន្ទីរពិសោធន៍) ការធ្វើពិសោធន៍ ឬការសិក្សាដែលប្រព្រឹត្តទៅនៅខាងក្រៅសារពាង្គកាយមានជីវិត ដូចជានៅក្នុងចានប៉េទ្រី (Petri dish) ឬបំពង់សាកល្បង ដើម្បីសង្កេតមើលប្រតិកម្មផ្សេងៗដោយគ្រប់គ្រងបរិស្ថានបានយ៉ាងច្បាស់លាស់។ ដូចជាការសាកល្បងដាំគ្រាប់ពូជនៅលើក្រដាសសើមក្នុងកែវ ជាជាងយកទៅដាំក្នុងដីផ្ទាល់ ដើម្បីងាយស្រួលមើលពីរបៀបដែលវាដុះពន្លក។
Minimum Inhibitory Concentration - MIC (កំហាប់អប្បបរមាដែលអាចទប់ស្កាត់ការលូតលាស់) កម្រិតកំហាប់ទាបបំផុតនៃសារធាតុប្រឆាំងមេរោគ (ឬចំនួនបាក់តេរីមានប្រយោជន៍) ដែលអាចបញ្ឈប់ការលូតលាស់ និងការកើនឡើងចំនួនរបស់បាក់តេរីបង្កជំងឺបានទាំងស្រុងនៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍។ ដូចជាចំនួនប៉ូលីសតិចបំផុតដែលត្រូវការជាចាំបាច់ ដើម្បីអាចគ្រប់គ្រង និងទប់ស្កាត់កុំឱ្យមានចោរលួចក្នុងភូមិមួយបាន។
Agar well diffusion assay (ការធ្វើតេស្តសាយភាយលើរន្ធចាហួយ) វិធីសាស្ត្រមន្ទីរពិសោធន៍សម្រាប់វាស់ស្ទង់ប្រសិទ្ធភាពប្រឆាំងមេរោគ ដោយការចោះរន្ធនៅលើចាហួយដែលមានបណ្តុះមេរោគ រួចដាក់សារធាតុសាកល្បងចូលទៅក្នុងរន្ធនោះ ដើម្បីមើលទំហំរង្វង់ដែលមេរោគមិនអាចលូតលាស់បាន (Inhibition zone)។ ដូចជាការទម្លាក់ដុំថ្មចូលទៅក្នុងទឹកដែលដក់ស្ងប់ រួចសង្កេតមើលរលកទឹកដែលសាយភាយចេញជារង្វង់ ដើម្បីដឹងពីកម្លាំងរបស់ដុំថ្មនោះ។
Biocontrol agents / Probiotics (ភ្នាក់ងារត្រួតពិនិត្យជីវសាស្រ្ត ឬ ប្រូបាយអូទិក) ពពួកអតិសុខុមប្រាណ ឬបាក់តេរីមានប្រយោជន៍ដែលត្រូវបានប្រើប្រាស់ដើម្បីកម្ចាត់ ឬទប់ស្កាត់ការលូតលាស់របស់មេរោគបង្កជំងឺតាមរយៈការប្រកួតប្រជែងយកចំណី ឬការបញ្ចេញសារធាតុរារាំង ជាជម្រើសជំនួសការប្រើប្រាស់ថ្នាំអង់ទីប៊ីយោទិច។ ដូចជាការចិញ្ចឹមឆ្មា ដើម្បីដេញចាប់កណ្តុរក្នុងផ្ទះ ជាជាងការប្រើប្រាស់ថ្នាំបំពុលកណ្តុរដែលអាចប៉ះពាល់ដល់សុខភាពមនុស្ស។
Vibrio harveyi (បាក់តេរី វីប្រ៊ីអូ ហារវេយី) ជាប្រភេទបាក់តេរីសមុទ្រដែលបង្កជំងឺ Luminous vibriosis ធ្វើឱ្យបង្គាបញ្ចេញពន្លឺក្នុងទីងងឹត និងបណ្តាលឱ្យបង្គាឈឺនិងងាប់យ៉ាងច្រើន ដែលបង្កការខាតបង់សេដ្ឋកិច្ចយ៉ាងធ្ងន់ធ្ងរដល់កសិដ្ឋានចិញ្ចឹមបង្គា។ វាដូចជាសត្វល្អិតចង្រៃម៉្យាងដែលចូលចិត្តបំផ្លាញដំណាំ ប៉ុន្តែវាមានលក្ខណៈពិសេសអាចបញ្ចេញពន្លឺនាពេលយប់។
Hepatopancreas (លំពែងនិងថ្លើមបង្គា) សរីរាង្គដ៏សំខាន់មួយនៅក្នុងពោះវៀនរបស់សត្វគ្មានឆ្អឹងកង (ដូចជាបង្គា និងក្តាម) ដែលបំពេញមុខងាររួមបញ្ចូលគ្នាដូចជាថ្លើមនិងលំពែងរបស់មនុស្ស ដើម្បីរំលាយអាហារ បឺតស្រូបជីវជាតិ និងច្រោះជាតិពុល។ ជា "រោងចក្រចម្រាញ់" និង "ឃ្លាំងស្តុកថាមពល" ដ៏សំខាន់នៅក្នុងខ្លួនបង្គា ដែលប្រៀបបាននឹងក្រពះ ថ្លើម និងពោះវៀនមនុស្សបញ្ចូលគ្នា។
Exoenzymes (អង់ស៊ីមបញ្ចេញក្រៅ) ប្រភេទប្រូតេអ៊ីនរំលាយ (អង់ស៊ីម) ដែលបាក់តេរីបញ្ចេញទៅក្នុងមជ្ឈដ្ឋានជុំវិញខ្លួន ដើម្បីបំបែកម៉ូលេគុលអាហារធំៗ ឬបំផ្លាញកោសិការបស់បាក់តេរីផ្សេងទៀតដែលជាសត្រូវប្រជែងទីតាំងរបស់វា។ ដូចជាសត្វពីងពាងដែលព្រួសទឹកមាត់រំលាយសាច់សត្វល្អិតនៅខាងក្រៅខ្លួនវាឱ្យក្លាយជាទឹក រួចទើបបឺតជញ្ជក់យកមកធ្វើជាចំណី។
Colony forming unit / cfu/ml (ឯកតាកំណត់ចំនួនកោសិកាបាក់តេរី) រង្វាស់ដែលប្រើក្នុងមីក្រូជីវសាស្ត្រ ដើម្បីប៉ាន់ប្រមាណចំនួនកោសិកាបាក់តេរីដែលមានជីវិតនិងអាចបន្តពូជបង្កើតជាកញ្ចុំបាក់តេរីថ្មីបាន នៅក្នុងវត្ថុរាវចំណុះ ១ មីលីលីត្រ។ ប្រៀបដូចជាការរាប់ចំនួនគ្រាប់ពូជដែលនៅរស់និងអាចដុះជាដើមឈើបាន ក្នុងចំណោមគ្រាប់ពូជមួយក្តាប់ដៃ។
Broth co-culture (ការបណ្តុះរួមគ្នាក្នុងមជ្ឈដ្ឋានរាវ) ការបណ្តុះមេរោគបង្កជំងឺ និងបាក់តេរីមានប្រយោជន៍ចូលគ្នាក្នុងដបទឹកស៊ុបតែមួយដែលមានសារធាតុចិញ្ចឹម ដើម្បីសង្កេតមើលការប្រកួតប្រជែង ការរារាំង និងការរស់រានមានជីវិតរបស់ពួកវាតាមពេលវេលាជាក់ស្តែងរៀងរាល់ម៉ោងកំណត់។ ដូចជាការដាក់សត្វសត្រូវពីរបញ្ចូលគ្នាក្នុងទ្រុងតែមួយ ដើម្បីមើលថាតើសត្វមួយណាអាចវាយឈ្នះ និងរស់រានមានជីវិតបានយូរជាង។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖