Original Title: Establishment of Micropropagation Protocol for Double Petunia “Pink Diamond” from Leaf Tissues
Source: doi.org/10.31817/vjas.2025.8.1.06
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការបង្កើតប្រូតូកូលបន្តពូជតាមវិធីមីក្រូសម្រាប់ផ្កា Petunia ទងត្រួតប្រភេទ “Pink Diamond” ពីជាលិកាស្លឹក

ចំណងជើងដើម៖ Establishment of Micropropagation Protocol for Double Petunia “Pink Diamond” from Leaf Tissues

អ្នកនិពន្ធ៖ Pham Thi Huyen Trang (Faculty of Agronomy, Vietnam National University of Agriculture), Phung Thi Thu Ha (Faculty of Agronomy, Vietnam National University of Agriculture)

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2025, Vietnam Journal of Agricultural Sciences

វិស័យសិក្សា៖ Agronomy

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ការសិក្សានេះដោះស្រាយបញ្ហានៃការបន្តពូជយឺត និងភាពងាយរងគ្រោះពីជំងឺក្នុងវិធីសាស្ត្រប្រពៃណី ដោយបង្កើតប្រូតូកូលបន្តពូជតាមវិធីមីក្រូ (Micropropagation) ប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាពសម្រាប់ផ្កា Petunia hybrida ដើមទងត្រួតប្រភេទ 'Pink Diamond' ដើម្បីបំពេញតម្រូវការទីផ្សារ។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ ការស្រាវជ្រាវនេះបានប្រើប្រាស់បច្ចេកទេសបណ្តុះជាលិកាក្នុងកែវពិសោធន៍ (In vitro tissue culture) ដោយសាកល្បងកម្រិតអរម៉ូន និងសារធាតុចិញ្ចឹមផ្សេងៗដើម្បីស្វែងរករូបមន្តល្អបំផុតសម្រាប់ដំណាក់កាលនីមួយៗនៃការលូតលាស់។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
MS medium + BA (1.0 mg/L)
មជ្ឈដ្ឋាន MS បន្ថែមអរម៉ូន BA (1.0 mg/L)
ជម្រុញការបង្កើតកាលុស (Callus) និងការដុះពន្លកបានយ៉ាងល្អប្រសើរ និងផ្តល់ពន្លកមានគុណភាពរឹងមាំ។ ការប្រើប្រាស់កំហាប់ BA ខ្ពស់ពេក (លើសពី 1.0 mg/L) ធ្វើឱ្យអត្រាដុះពន្លកធ្លាក់ចុះ និងគុណភាពពន្លកខ្សោយ។ ផ្តល់អត្រាបង្កើតកាលុស ៩៤.៤៤% អត្រាដុះពន្លក ៨៣.៣៣% និងចំនួន ១៥.២៨ ពន្លកក្នុងមួយជាលិកា។
MS medium + α-NAA (0.5 - 2.0 mg/L)
មជ្ឈដ្ឋាន MS បន្ថែមអរម៉ូន α-NAA (0.5 - 2.0 mg/L)
អាចជម្រុញការបង្កើតកាលុស និងឫសបានខ្លះៗនៅតំបន់គល់ស្លឹក។ មិនមានប្រសិទ្ធភាពក្នុងការជម្រុញឱ្យកាលុសលូតលាស់ចេញជាពន្លកបានទាល់តែសោះ ដោយសារអរម៉ូន Auxin រារាំងការដុះពន្លក។ អត្រាបង្កើតកាលុសចន្លោះពី ៥០% ទៅ ៨៨.៨៩% ប៉ុន្តែអត្រាដុះពន្លកគឺ ០%។
MS medium + Activated Charcoal (0.1 g/L)
មជ្ឈដ្ឋាន MS បន្ថែមធ្យូងសកម្ម (0.1 g/L) សម្រាប់ការដុះឫស
ជួយស្រូបយកសារធាតុពុលក្នុងមជ្ឈដ្ឋាន និងជម្រុញការលូតលាស់ប្រវែងពន្លក ស្លឹក និងឫសបានល្អបំផុតនៅដំណាក់កាលចុងក្រោយ។ ប្រសិនបើប្រើកំហាប់ធ្យូងសកម្មខ្ពស់ពេក វាអាចស្រូបយកសារធាតុចិញ្ចឹមចាំបាច់ ដែលធ្វើឱ្យការលូតលាស់ឫសនិងពន្លកថយចុះយ៉ាងខ្លាំង។ បង្កើតឫសបានច្រើនបំផុត (១៦ ឫស/កូនរុក្ខជាតិ) និងពន្លកមានប្រវែង ៣.២២ សង់ទីម៉ែត្រ។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការសិក្សានេះទាមទារនូវឧបករណ៍មន្ទីរពិសោធន៍បណ្តុះជាលិកាទំនើប និងសារធាតុគីមីកសិកម្មជាក់លាក់ ដែលតម្រូវឱ្យមានការវិនិយោគជាមូលដ្ឋាន។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះត្រូវបានអនុវត្តនៅក្នុងប្រទេសវៀតណាម ដោយប្រើប្រាស់ពូជផ្កា Petunia hybrida ដែលមានប្រភពពីតំបន់ Da Lat (អាកាសធាតុត្រជាក់) និងធ្វើការពិសោធន៍ក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ទីក្រុងហាណូយ។ សម្រាប់បរិបទប្រទេសកម្ពុជា ដែលភាគច្រើនមានអាកាសធាតុក្តៅ ការផ្សាំកូនរុក្ខជាតិនៅក្រៅកែវ (Ex vitro) អាចជួបប្រទះបញ្ហាប្រឈមខ្លាំង ដែលតម្រូវឱ្យមានការសាងសង់ផ្ទះកញ្ចក់ដែលអាចគ្រប់គ្រងសីតុណ្ហភាព (២០-២៥ អង្សាសេ) បានយ៉ាងតឹងរ៉ឹង។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

វិធីសាស្ត្របន្តពូជតាមវិធីមីក្រូនេះមានសារៈសំខាន់ និងអាចអនុវត្តបានយ៉ាងមានសក្តានុពលសម្រាប់ការពង្រីកវិស័យដាំផ្កាលម្អនៅកម្ពុជា។

ជារួម បច្ចេកទេសនេះផ្តល់នូវមូលដ្ឋានគ្រឹះដ៏រឹងមាំសម្រាប់អ្នកស្រាវជ្រាវ និងសហគ្រិនកម្ពុជា ក្នុងការបង្កើតខ្សែចង្វាក់ផលិតកម្មពូជផ្កាលម្អក្នុងស្រុកដែលមានគុណភាពខ្ពស់ និងធន់នឹងជំងឺ។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. ការរៀបចំសម្ភារៈ និងមន្ទីរពិសោធន៍: រៀបចំបន្ទប់ពិសោធន៍ដោយមានបំពាក់ Laminar Airflow Cabinet និងម៉ាស៊ីន Autoclave។ បន្ទាប់មក រៀបចំមជ្ឈដ្ឋាន MS medium ដោយបន្ថែមអរម៉ូន BA (1.0 mg/L), ស្ករស៊ុយក្រូស 30 g/L និង Agar (6.5 g/L) សម្រាប់ដំណាក់កាលបំបែកជាលិកា និងកែប្រែ pH ទៅ 5.8 មុនពេលចំហុយសម្លាប់មេរោគ។
  2. ការសម្លាប់មេរោគ និងការកាត់ជាលិកាស្លឹក: ជ្រើសរើសស្លឹកផ្កា Petunia hybrida 'Pink Diamond' ដែលមានសុខភាពល្អ យកមកសម្លាប់មេរោគដោយប្រើសូលុយស្យុង HgCl2 0.1% រយៈពេល ១០ នាទី បន្ទាប់មកលាងជាមួយទឹកចម្រោះ (Distilled water) ឱ្យបាន ៣ ដង និងកាត់ជាបំណែកតូចៗទំហំ 0.5 x 0.5 cm ដើម្បីដាក់បណ្តុះ។
  3. ការជម្រុញការលូតលាស់ពន្លកដោយប្រើរូបមន្តសន្សំសំចៃ: បន្ទាប់ពីកាលុសដុះពន្លក ត្រូវប្តូរពន្លកទៅកែវថ្មីដែលមានមជ្ឈដ្ឋាន MS លាយជាមួយស្ករ 40 g/L និងទឹកដូងខ្ចី (Coconut water 10% ទៅ 15%) ដែលជាប្រភពសារធាតុចិញ្ចឹមតាមធម្មជាតិងាយរក និងជួយកាត់បន្ថយការចំណាយលើការទិញអរម៉ូនថ្លៃៗ។
  4. ការបណ្តុះឫសដោយប្រើធ្យូងសកម្ម: នៅពេលពន្លកលូតលាស់បានប្រវែងប្រហែល ១.៥ ទៅ ២ សង់ទីម៉ែត្រ ត្រូវកាត់ប្តូរវាទៅមជ្ឈដ្ឋានថ្មីដែលមានស្ករ 30 g/L និងបន្ថែមធ្យូងសកម្ម Activated Charcoal (0.1 g/L) ដោយមិនប្រើអរម៉ូន ដើម្បីជម្រុញការដុះឫស និងបឺតស្រូបសារធាតុពុលផ្សេងៗក្នុងជែល។
  5. ការផ្សាំកូនរុក្ខជាតិទៅក្នុងបរិស្ថានខាងក្រៅ (Acclimatization): ក្រោយបណ្តុះបាន ១០ថ្ងៃ យកកូនរុក្ខជាតិដែលមានឫសរឹងមាំចេញពីកែវ លាងជែលចេញឱ្យស្អាតដោយប្រុងប្រយ័ត្ន រួចយកទៅដាំក្នុងថាសដែលមានដី Peat moss 100% និងរក្សាទុកក្នុងផ្ទះសំណាញ់ (Poly-house) ដែលមានសំណើម ៧០-៧៥% និងសីតុណ្ហភាព ២០-២៥ អង្សាសេ រយៈពេល ៤ សប្តាហ៍ដើម្បីឱ្យវាសម្របខ្លួន។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Micropropagation (ការបន្តពូជតាមវិធីមីក្រូ) បច្ចេកទេសបណ្តុះជាលិការុក្ខជាតិនៅក្នុងកែវពិសោធន៍ដែលគ្មានមេរោគ ដើម្បីបង្កើតកូនរុក្ខជាតិថ្មីរាប់ពាន់ដើមពីបំណែកតូចមួយនៃរុក្ខជាតិមេក្នុងរយៈពេលខ្លី និងរក្សាបាននូវសេនេទិចដូចរុក្ខជាតិដើម។ ដូចជាការថតចម្លង (Copy) រុក្ខជាតិមួយដើមឱ្យទៅជារាប់ពាន់ដើម ដែលមានលក្ខណៈដូចបេះបិទទៅនឹងដើមដើម ដោយប្រើប្រាស់ត្រឹមតែបំណែកស្លឹកមួយសន្លឹកប៉ុណ្ណោះ។
Callogenesis (ការបង្កើតកាលុស) ដំណើរការនៃការបង្កើតកាលុស (Callus) ដែលជាដុំកោសិកាមិនទាន់មានទម្រង់ច្បាស់លាស់ លូតលាស់ចេញពីជាលិការុក្ខជាតិដែលត្រូវបានកាត់ ដើម្បីត្រៀមខ្លួនវិវឌ្ឍទៅជាពន្លក ឬឫសថ្មី។ ដូចជាការបង្កើតដុំសាច់ខ្ចីនៅពេលដែលយើងមុតដៃ ដែលកោសិកាថ្មីៗប្រមូលផ្តុំគ្នាដើម្បីត្រៀមលូតលាស់ជាស្បែកថ្មី។
Explants (ជាលិកាបណ្តុះ) បំណែកតូចៗនៃរុក្ខជាតិ (ដូចជាចុងពន្លក ថ្នាំង ឬសន្លឹកស្លឹក) ដែលត្រូវបានកាត់យកមកសម្លាប់មេរោគ រួចប្រើប្រាស់សម្រាប់ដាក់បណ្តុះនៅក្នុងមជ្ឈដ្ឋានសិប្បនិម្មិតក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍។ ដូចជាមែកតូចៗដែលយើងយកទៅផ្សាំក្នុងដី ប៉ុន្តែនៅទីនេះយើងប្រើត្រឹមតែបំណែកស្លឹកប៉ុនក្រចកដៃដើម្បីយកទៅផ្សាំក្នុងកែវជែលវិញ។
Murashige and Skoog (MS) medium (មជ្ឈដ្ឋាន MS) រូបមន្តសារធាតុចិញ្ចឹមស្តង់ដារមួយប្រភេទដែលផ្ទុកទៅដោយរ៉ែខនិជ វីតាមីន និងស្ករ ដែលចាំបាច់បំផុតសម្រាប់ការលូតលាស់របស់កោសិការុក្ខជាតិនៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍។ ដូចជាទឹកដោះគោម្សៅសម្រាប់ទារក ដែលមានផ្ទុកជីវជាតិគ្រប់គ្រាន់ដើម្បីឱ្យកោសិការុក្ខជាតិអាចរស់ និងធំធាត់បានដោយមិនបាច់ដាំក្នុងដី។
Plant growth regulators (អរម៉ូនលូតលាស់រុក្ខជាតិ) សារធាតុគីមីសិប្បនិម្មិត ឬអរម៉ូន (ដូចជា BA ជួយដុះពន្លក និង α-NAA ជួយដុះឫស) ដែលត្រូវបានប្រើដើម្បីគ្រប់គ្រង និងបញ្ជាឱ្យកោសិការុក្ខជាតិបំបែកខ្លួន ដុះពន្លក ឬចេញឫសតាមតម្រូវការ។ ដូចជាបញ្ជាការដ្ឋាន ឬមេបណ្តុះបណ្តាលដែលប្រាប់កោសិកាថាតើពេលណាត្រូវបញ្ចេញកម្លាំងដើម្បីបង្កើតពន្លកថ្មី ឬពេលណាត្រូវចាក់ឫស។
Acclimatization (ការផ្សាំបរិស្ថាន) ដំណាក់កាលចុងក្រោយដែលកូនរុក្ខជាតិត្រូវបានយកចេញពីកែវពិសោធន៍ (In vitro) ទៅដាំក្នុងដី (Ex vitro) ដើម្បីឱ្យវាសម្របខ្លួនទៅនឹងសីតុណ្ហភាព ពន្លឺ និងសំណើមធម្មជាតិ មុននឹងយកទៅដាំក្នុងចម្ការ។ ដូចជាការបង្ហាត់ក្មេងដែលធ្លាប់តែរស់នៅក្នុងបន្ទប់ម៉ាស៊ីនត្រជាក់ ឱ្យចេញមកលេងកម្តៅថ្ងៃបន្តិចម្តងៗ ដើម្បីកុំឱ្យគេឈឺនៅពេលត្រូវប្រឈមនឹងអាកាសធាតុខាងក្រៅ។
Activated charcoal (ធ្យូងសកម្ម) ប្រភេទធ្យូងដែលត្រូវបានកែច្នៃឱ្យមានរន្ធតូចៗច្រើនសម្រាប់ស្រូបយកសារធាតុពុល ឬអរម៉ូនដែលនៅសេសសល់ក្នុងមជ្ឈដ្ឋានបណ្តុះ ដែលជួយជំរុញដល់ការលូតលាស់ឫសរបស់កូនរុក្ខជាតិបានយ៉ាងល្អ។ ដូចជាម៉ាស៊ីនចម្រោះទឹកស្អាត ឬអេប៉ុងដែលជួយបឺតយកកាកសំណល់និងជាតិពុលចេញពីទឹក ធ្វើឱ្យបរិស្ថានជុំវិញឫសរុក្ខជាតិមានភាពបរិសុទ្ធ។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖