Original Title: Development of the scheme to prepare specimens for sheep pox virus indication in objects of environment
Source: doi.org/10.46882/AAAS/1056
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការអភិវឌ្ឍគ្រោងការណ៍សម្រាប់រៀបចំសំណាកដើម្បីចង្អុលបង្ហាញវីរុសជំងឺអុតស្វាយចៀមនៅក្នុងវត្ថុបរិស្ថាន

ចំណងជើងដើម៖ Development of the scheme to prepare specimens for sheep pox virus indication in objects of environment

អ្នកនិពន្ធ៖ Matveyeva V.M. (Research Institute for Biological Safety Problems, Republic of Kazakhstan), Mamadaliyev S.M, Koshemetov Z. K., Russanova A.M., Troitskiy Y. N.

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2018 Advances in Agriculture and Agricultural Sciences

វិស័យសិក្សា៖ Veterinary Virology

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ការស្រាវជ្រាវនេះដោះស្រាយបញ្ហានៃការកែលម្អវិធីសាស្ត្ររៀបចំសំណាកបរិស្ថាន (ទឹក ខ្យល់ ស្មៅ និងគ្រាប់ធញ្ញជាតិ) ដើម្បីរកឱ្យឃើញយ៉ាងឆាប់រហ័សនិងច្បាស់លាស់នូវវីរុសជំងឺអុតស្វាយចៀម (Sheep pox virus) សំដៅការពារការផ្ទុះឡើងនៃជំងឺ។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ ការសិក្សានេះបានធ្វើតេស្តសាកល្បងប្រភេទតម្រង (Filters) និងសូលុយស្យុងបំបែក (Eluting media) ផ្សេងៗគ្នាដើម្បីប្រមូលផ្តុំវីរុសពីសំណាកបរិស្ថានដែលត្រូវបានចម្លងមេរោគសិប្បនិម្មិត។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Capron filters with 5% BEB elution
ការប្រើតម្រង Capron ជាមួយសូលុយស្យុងទឹកចម្រាញ់សាច់គោ ៥% (5% BEB)
ផ្តល់លទ្ធផលដង់ស៊ីតេអុបទិកខ្ពស់បំផុតក្នុងការអានតេស្ត ELISA និងមានប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់ក្នុងការប្រមូលផ្តុំវីរុសពីសំណាករាវ។ ទាមទារការរៀបចំសូលុយស្យុងបំបែកឱ្យបានត្រឹមត្រូវនិងឧបករណ៍បូម (Vacuum pump) ដើម្បីចម្រោះ។ អាចរកឃើញសំណាកវិជ្ជមាន ៥/៥ (100%) សម្រាប់ទឹកដែលមានកម្រិតមេរោគ 100 TCE50/cm³។
5% Bovine Serum elution
ការប្រើសេរ៉ូមគោ ៥% ជាសូលុយស្យុងបំបែកវីរុស
អាចបំបែកនិងរក្សាវីរុសពីតម្រងបានក្នុងកម្រិតល្អគួរសមប្រហាក់ប្រហែលនឹង BEB ដែរ។ បង្កឱ្យមានពណ៌ផ្ទៃខាងក្រោយមិនជាក់លាក់ (Nonspecific background coloring) នៅក្នុងក្រុមវត្ថុបញ្ជាអវិជ្ជមាននៃតេស្ត ELISA ដែលធ្វើឱ្យពិបាកអានលទ្ធផល។ ផ្តល់កម្រិតនៃការធ្វើឱ្យវីរុសអសកម្មនិងនៅសល់លើតម្រង 0.63 - 0.64 lg TCE50/cm³។
FPP-15-1.5 / NEL-3 filters with 5% BEB
ការប្រើតម្រង FPP-15-1.5 ឬ NEL-3 ជាមួយសូលុយស្យុង 5% BEB សម្រាប់ខ្យល់
មានប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់បំផុតក្នុងការប្រមូលសំណាកខ្យល់ (Aerosol) សម្រាប់យកទៅវិភាគបន្ត។ ត្រូវការឧបករណ៍បូមខ្យល់និងប្រព័ន្ធប្រមូលសំណាកខ្យល់ដែលមានលក្ខណៈបច្ចេកទេសស្មុគស្មាញ។ អាចរកឃើញវីរុសអុតស្វាយចៀមក្នុងសំណាកខ្យល់ចាប់ពីកម្រិត 10 TCE50/L ឡើងទៅ។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការអនុវត្តវិធីសាស្ត្រនេះតម្រូវឱ្យមានមន្ទីរពិសោធន៍បំពាក់ដោយបរិក្ខារជីវសុវត្ថិភាព សម្ភារៈចម្រោះពិសេស និងសារធាតុគីមីសម្រាប់តេស្ត ELISA ។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះត្រូវបានធ្វើឡើងនៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍នៃប្រទេសកាហ្សាក់ស្ថាន ដោយប្រើប្រាស់វីរុសអុតស្វាយចៀមប្រភេទ 'NISKhI' ដែលចម្លងចូលក្នុងសំណាកបរិស្ថានដោយសិប្បនិម្មិត។ សម្រាប់ប្រទេសកម្ពុជា កត្តាអាកាសធាតុ (កម្តៅ និងសំណើមខ្ពស់) ព្រមទាំងប្រភេទវីរុស Capripoxviruses ក្នុងស្រុក អាចជះឥទ្ធិពលដល់អត្រារស់រាននៃវីរុសនៅក្នុងបរិស្ថាន ដែលទាមទារឱ្យមានការធ្វើតេស្តផ្ទៀងផ្ទាត់ឡើងវិញតាមបរិបទជាក់ស្តែង។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

វិធីសាស្ត្ររៀបចំសំណាកនេះមានសារៈប្រយោជន៍យ៉ាងខ្លាំងសម្រាប់ការតាមដាននិងទប់ស្កាត់ជំងឺឆ្លងសត្វនៅក្នុងប្រទេសកម្ពុជា ជាពិសេសលើសត្វពពែនិងចៀម។

ការបំពាក់បច្ចេកទេសនេះដល់មន្ទីរពិសោធន៍បសុពេទ្យជាតិ នឹងជួយបង្កើនសមត្ថភាពឆ្លើយតបយ៉ាងរហ័សទៅនឹងការគំរាមកំហែងនៃជំងឺអុតស្វាយលើសត្វពាហនៈនៅកម្ពុជា។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. រៀបចំនិងបំពាក់សម្ភារៈមន្ទីរពិសោធន៍: ទិញនិងដំឡើងឧបករណ៍ចម្រោះ រួមមាន Vacuum pump និងតម្រង Capron micropore membranes ព្រមទាំងតម្រងខ្យល់ FPP-15-1.5 សម្រាប់ប្រមូលសំណាក។
  2. រៀបចំសូលុយស្យុងបំបែកវីរុស (Elution Media): អនុវត្តការលាយសូលុយស្យុង 5% Beef extract broth (BEB) នៅក្នុង 0.05 M PBS ជាមួយនឹង 0.5% Tween 80 ដើម្បីធានាបាននូវការបំបែកវីរុសពីតម្រងដោយមិនមានការរំខានពណ៌ក្នុងពេលធ្វើតេស្ត។
  3. ចុះប្រមូលសំណាកបរិស្ថានសាកល្បង: ប្រមូលសំណាកទឹក ស្មៅ និងគ្រាប់ធញ្ញជាតិ (១០០-៥០០ ក្រាម) ពីកសិដ្ឋានចិញ្ចឹមពពែក្នុងស្រុក រួចយកមកច្រោះនិងប្រមូលផ្តុំវីរុសតាមនីតិវិធីដែលបានណែនាំ។
  4. អនុវត្តការវិភាគដោយប្រើបច្ចេកទេស ELISA: ប្រើប្រាស់បន្ទះ Polystyrene U-bottomed plates រួចធ្វើតេស្ត Direct ELISA លើសំណាកដែលបានបំបែក ដើម្បីកំណត់អត្តសញ្ញាណអង់ទីហ្សែនរបស់វីរុស។
  5. ផ្ទៀងផ្ទាត់និងកែតម្រូវតាមបរិបទកម្ពុជា: វាយតម្លៃភាពរសើប (Sensitivity) នៃតេស្ត ELISA ជាមួយនឹងសំណាកក្នុងស្រុក ដោយប្រៀបធៀបជាមួយវិធីសាស្ត្រ PCR វិភាគមើលថាតើកម្តៅនិងសំណើមប៉ះពាល់ដល់អត្រារកឃើញវីរុសឬអត់។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Specific indication (ការកំណត់អត្តសញ្ញាណជាក់លាក់) ដំណើរការនៃការរកឱ្យឃើញ និងបញ្ជាក់អត្តសញ្ញាណភ្នាក់ងារបង្កជំងឺណាមួយ (ដូចជាវីរុស) ឱ្យបានច្បាស់លាស់ពីក្នុងសំណាកបរិស្ថានចម្រុះក្នុងរយៈពេលដ៏ខ្លីមួយ។ ដូចជាការរកមុខឧក្រិដ្ឋជនម្នាក់ចេញពីចំណោមមនុស្សរាប់ពាន់នាក់ក្នុងរយៈពេលខ្លីដោយប្រើស្នាមម្រាមដៃជាក់លាក់របស់គេ។
Elution (ការបំបែកយកមេរោគចេញពីតម្រង) នីតិវិធីនៃការប្រើប្រាស់សូលុយស្យុងរាវ (Eluting media) ដើម្បីលាងជម្រះ ឬទាញយកភាគល្អិតវីរុសដែលទាក់ជាប់នៅលើតម្រង ឱ្យត្រឡប់មកក្នុងសូលុយស្យុងវិញដើម្បីងាយស្រួលយកទៅធ្វើតេស្តបន្ត។ ដូចជាការយកទឹកសាប៊ូទៅបោកគក់ជម្រះភាពកខ្វក់ដែលជាប់នៅលើក្រណាត់ ដើម្បីយកទឹកកខ្វក់នោះទៅពិនិត្យមើលមេរោគ។
Enzyme-linked immunosorbent assay / ELISA (តេស្តអេលីសា) វិធីសាស្ត្រវិភាគជីវគីមីដែលប្រើប្រាស់អង់ទីគ័រ (Antibodies) គួបផ្សំនឹងអង់ស៊ីម ដែលវានឹងប្តូរពណ៌សូលុយស្យុងនៅពេលដែលវាចាប់បានអង់ទីហ្សែនរបស់វីរុសគោលដៅ (ឧទាហរណ៍៖ វីរុសអុតស្វាយចៀម)។ ដូចជាការប្រើប្រាស់មេដែកពិសេសមួយដែលអាចឆក់ទាញយកតែដែកគោលចេញពីគំនរខ្សាច់ រួចបញ្ចេញពន្លឺពណ៌ដើម្បីប្រាប់យើងថាវាពិតជាមានដែកគោលមែន។
Aerosol sampling (ការប្រមូលសំណាកខ្យល់) ការប្រមូលយកភាគល្អិតរាវ ឬរឹងតូចៗបំផុតដែលអណ្តែតក្នុងខ្យល់ (ដែលអាចមានផ្ទុកវីរុស) ដោយប្រើប្រាស់ម៉ាស៊ីនបូម និងតម្រងពិសេស។ ដូចជាការយកម៉ាស៊ីនបូមធូលីទៅបូមយកសំណើមនិងធូលីល្អិតៗក្នុងខ្យល់តាមកសិដ្ឋាន ដើម្បីយកមកពិនិត្យមើលថាតើមានមេរោគហោះហើរតាមខ្យល់ដែរឬទេ។
Optical density (ដង់ស៊ីតេអុបទិក) រង្វាស់នៃបរិមាណពន្លឺដែលត្រូវបានស្រូបយកដោយសូលុយស្យុងសំណាកនៅពេលអានលទ្ធផលតេស្ត ELISA។ កម្រិតស្រូបពន្លឺកាន់តែខ្ពស់ (ពណ៌កាន់តែចាស់) បញ្ជាក់ថាមានបរិមាណវីរុសកាន់តែច្រើន។ ដូចជាការវាស់កម្រិតភាពល្អក់នៃទឹក ប្រសិនបើទឹកកាន់តែល្អក់ (មានមេរោគច្រើន) នោះពន្លឺអាចឆ្លងកាត់វាបានកាន់តែតិច។
Differential concentration device (ឧបករណ៍ប្រមូលផ្តុំសំណាក) បរិក្ខារមន្ទីរពិសោធន៍ដែលប្រើសម្រាប់បង្រួញបរិមាណសំណាករាវដ៏ច្រើន (ឧទាហរណ៍ពី ៥ លីត្រ មកនៅបរិមាណតិចតួច) ដោយរក្សាទុកតែមេរោគនៅលើតម្រង ដើម្បីធ្វើឱ្យកំហាប់មេរោគកាន់តែខាប់ និងងាយស្រួលរកឃើញ។ ដូចជាការរម្ងាស់ទឹកស៊ុបមួយឆ្នាំងធំឱ្យនៅសល់តែមួយចានគោមតូច ដើម្បីឱ្យរសជាតិ (ឬមេរោគ) កាន់តែខាប់និងងាយស្រួលភ្លក់ដឹង។
Tissue filters (តម្រងសរសៃអំបោះ) ប្រភេទតម្រងពិសេស (ដូចជា FPP-15-1.5) ដែលធ្វើពីសរសៃអំបោះល្អិតៗ បង្កើតឡើងសម្រាប់ចាប់យកភាគល្អិតវីរុសពីក្នុងខ្យល់ ឬអង្គធាតុរាវនៅពេលវាឆ្លងកាត់។ ដូចជាសំណាញ់ចាប់ត្រីដែលមានក្រឡាល្អិតបំផុត ដែលអាចឱ្យទឹកហូរឆ្លងកាត់បាន តែចាប់ជាប់រាល់វត្ថុល្អិតៗទំហំប៉ុនមេរោគ។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖