Original Title: Adverse effects of chlorpyrifos and cypermethrin mixture on physiological alterations and cholinesterase expression on Nile tilapia (Oreochromis niloticus)
Source: li01.tci-thaijo.org
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ផលប៉ះពាល់អវិជ្ជមាននៃល្បាយថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិត chlorpyrifos និង cypermethrin ទៅលើការផ្លាស់ប្តូរសរីរវិទ្យា និងការបញ្ចេញអង់ស៊ីម cholinesterase លើត្រីទីឡាព្យា (Oreochromis niloticus)

ចំណងជើងដើម៖ Adverse effects of chlorpyrifos and cypermethrin mixture on physiological alterations and cholinesterase expression on Nile tilapia (Oreochromis niloticus)

អ្នកនិពន្ធ៖ C. Thanomsit (Department of Fisheries, Rajamangala University of Technology Isan), C. Nualkaw, W. Prasatkaew, A. Wattanakornsiri, J. Nanuam, P. Nanthanawat, P. Kiatprasert

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2020, Thai Journal of Agricultural Science

វិស័យសិក្សា៖ Ecotoxicology

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ការសិក្សានេះដោះស្រាយបញ្ហានៃការបំពុលប្រព័ន្ធអេកូឡូស៊ីទឹក ដោយធ្វើការវាយតម្លៃទៅលើកម្រិតជាតិពុលនៃល្បាយថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិត chlorpyrifos និង cypermethrin ដែលជះឥទ្ធិពលដល់សរីរវិទ្យា អាកប្បកិរិយា និងអត្រាស្លាប់របស់ត្រីទីឡាព្យា (Oreochromis niloticus)។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ អ្នកស្រាវជ្រាវបានធ្វើតេស្តជីវសាស្ត្រថេរដើម្បីកំណត់កំហាប់ជាតិពុល (LC50) ព្រមទាំងប្រើប្រាស់បច្ចេកទេសអង្គបដិប្រាណដើម្បីវាស់ស្ទង់ការបញ្ចេញអង់ស៊ីមសូចនាករ។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Lethal Concentration (LC) Bioassay
ការធ្វើតេស្តជីវសាស្ត្រដើម្បីរកកំហាប់ជាតិពុលដែលអាចសម្លាប់សារពាង្គកាយ
ផ្តល់ទិន្នន័យជាក់លាក់អំពីកម្រិតនៃការស្លាប់របស់សត្វ (LC50) និងជួយកំណត់កម្រិតកំហាប់សុវត្ថិភាពសម្រាប់ការប៉ះពាល់។ ចំណាយពេលយូរ (រហូតដល់ ៩៦ម៉ោង) តម្រូវឱ្យប្រើប្រាស់ត្រីរស់ចំនួនច្រើន និងមិនអាចប្រាប់ពីយន្តការខាងក្នុងនៃការពុល។ កំណត់បានកំហាប់ LC50 រយៈពេល 96 ម៉ោងសម្រាប់ល្បាយថ្នាំ chlorpyrifos-cypermethrin គឺស្មើនឹង 17.967 ppb។
Enzyme Assay (Ellman method)
ការវាស់ស្ទង់សកម្មភាពអង់ស៊ីមដោយវិធីសាស្ត្រ Ellman
អាចវាស់ស្ទង់បរិមាណសកម្មភាពរបស់អង់ស៊ីម AChE និង BuChE បានយ៉ាងត្រឹមត្រូវដោយប្រើឧបករណ៍ស្រូបពន្លឺ (Spectrophotometer)។ តម្រូវឱ្យមានការរៀបចំសំណាកយ៉ាងប្រុងប្រយ័ត្ន ប្រើប្រាស់សារធាតុគីមីពិសេសៗច្រើន និងអាចរងការរំខានដោយសីតុណ្ហភាព។ រកឃើញការថយចុះយ៉ាងខ្លាំងនៃសកម្មភាពអង់ស៊ីម AChE នៅក្នុងខួរក្បាល និងសាច់ដុំ បន្ទាប់ពីការប៉ះពាល់នឹងថ្នាំ។
Western Blot Technique
បច្ចេកទេសវិភាគប្រូតេអ៊ីនខាងលិច
អាចបញ្ជាក់ពីទំហំម៉ូលេគុលរបស់ប្រូតេអ៊ីនគោលដៅបានយ៉ាងច្បាស់លាស់ និងមានភាពជាក់លាក់ខ្ពស់ចំពោះអង្គបដិប្រាណ។ ត្រូវការឧបករណ៍ស្មុគស្មាញ ដំណើរការមានច្រើនដំណាក់កាល ចំណាយពេលយូរ និងមានតម្លៃថ្លៃ។ បានបញ្ជាក់ពីវត្តមាននិងទំហំម៉ូលេគុលរបស់ AChE (71 kDa) ក្នុងខួរក្បាល និង BuChE (85 kDa) ក្នុងប្លាស្មា។
Dot Blot Technique
បច្ចេកទេសវិភាគប្រូតេអ៊ីនតាមចំណុច
ងាយស្រួលអនុវត្ត ចំណាយពេលតិច ចំណាយថវិកាតិចជាងមុន និងអាចវាយតម្លៃកម្រិតនៃការបញ្ចេញប្រូតេអ៊ីនបានលឿន។ មិនអាចបង្ហាញពីទំហំម៉ូលេគុលរបស់ប្រូតេអ៊ីនបានដូចបច្ចេកទេស Western Blot នោះទេ ហើយងាយនឹងមានលទ្ធផលវិជ្ជមានមិនពិត (False positive) បើលាងមិនស្អាត។ កំណត់បាននូវកម្រិតទាបបំផុតនៃការរកឃើញ (Detection limits) នៅក្នុងជាលិកាផ្សេងៗ (ឧ. 0.31 µg/µL នៅក្នុងប្លាស្មា)។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការអនុវត្តការស្រាវជ្រាវនេះទាមទារនូវឧបករណ៍ពិសោធន៍ជីវវិទ្យាម៉ូលេគុលទំនើប សារធាតុគីមីពិសេសៗ (Reagents/Antibodies) និងទីតាំងធំទូលាយសម្រាប់ការរក្សាទុកនិងធ្វើតេស្តលើសត្វមានជីវិត។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះត្រូវបានអនុវត្តនៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍នៃសាកលវិទ្យាល័យ Rajamangala University of Technology Isan ប្រទេសថៃ ដោយប្រើប្រាស់ត្រីទីឡាព្យាដែលទទួលបានពីទីផ្សារក្នុងស្រុកជិតខាង។ ទោះបីជាសំណាកមិនមែនមកពីកម្ពុជាផ្ទាល់ក៏ដោយ ប៉ុន្តែទិន្នន័យនេះមានភាពពាក់ព័ន្ធយ៉ាងខ្លាំង ដោយសារប្រទេសកម្ពុជាមានអាកាសធាតុ លក្ខខណ្ឌកសិកម្ម និងការប្រើប្រាស់ថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតព្រមទាំងការចិញ្ចឹមត្រីទីឡាព្យាស្រដៀងគ្នានឹងប្រទេសថៃដែរ។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

វិធីសាស្ត្រ និងលទ្ធផលពីការសិក្សានេះ មានសក្តានុពលខ្ពស់ក្នុងការយកមកអនុវត្តជាក់ស្តែងនៅប្រទេសកម្ពុជា ដើម្បីដោះស្រាយបញ្ហាបំពុលទឹក។

ជារួម ការប្រើប្រាស់អង់ស៊ីម ChE ជាសូចនាករជីវសាស្ត្រតាមរយៈបច្ចេកទេស Dot Blot គឺជាមធ្យោបាយដ៏មានប្រសិទ្ធភាព និងចំណាយតិចសម្រាប់ការតាមដានការបំពុលពីវិស័យកសិកម្មមកលើធនធានជលផលនៅកម្ពុជា។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. ជំហានទី១៖ សិក្សាមូលដ្ឋានគ្រឹះនៃជាតិពុលវិទ្យា និងសូចនាករជីវសាស្ត្រ: ផ្តើមការសិក្សាដោយស្វែងយល់ពីទ្រឹស្តីនៃការរារាំងអង់ស៊ីម (Enzyme Inhibition) និងតួនាទីរបស់អង់ស៊ីម Acetylcholinesterase នៅក្នុងប្រព័ន្ធសរសៃប្រសាទរបស់ត្រី ដោយស្វែងរកឯកសារតាមរយៈវេទិកា Google Scholar ឬអត្ថបទ Ecotoxicology
  2. ជំហានទី២៖ ហ្វឹកហាត់ការវិភាគទិន្នន័យអត្រាស្លាប់ (Lethal Concentration): ប្រមូលទិន្នន័យគំរូស្តីពីអត្រាស្លាប់របស់សារពាង្គកាយនៅកំហាប់ផ្សេងៗគ្នា ហើយរៀនប្រើប្រាស់កម្មវិធី SPSSR Studio ជាមួយកញ្ចប់កម្មវិធី drc (Dose-Response Curve) ឬវិធីសាស្ត្រ Probit Analysis ដើម្បីគណនាតម្លៃ LC50។
  3. ជំហានទី៣៖ អនុវត្តការទាញយកប្រូតេអ៊ីន និងវាស់ស្ទង់អង់ស៊ីម: ចូលរួមនៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ដើម្បីអនុវត្តផ្ទាល់នូវការវះកាត់យកជាលិកាខួរក្បាល ឬសាច់ដុំត្រី បន្ទាប់មកកិនបំបែកដោយប្រើ Homogenizer និងអនុវត្តការវាស់ស្ទង់សកម្មភាពអង់ស៊ីមតាមវិធីសាស្ត្រ Ellman method ដោយប្រើ Microplate Reader
  4. ជំហានទី៤៖ រៀនសូត្របច្ចេកទេស Immunoassays: ចាប់ផ្តើមអនុវត្តបច្ចេកទេស Dot Blot Technique ជាមុនសិនដោយសារវាងាយស្រួលនិងចំណាយតិច មុននឹងបន្តទៅសិក្សាពីការកំណត់ទំហំប្រូតេអ៊ីនដ៏ស្មុគស្មាញតាមរយៈបច្ចេកទេស SDS-PAGE និង Western Blot
  5. ជំហានទី៥៖ ចុះស្រាវជ្រាវ និងវាយតម្លៃជាក់ស្តែង (Field Work): រៀបចំគម្រោងប្រមូលសំណាកត្រីពីតំបន់កសិកម្មជាក់ស្តែងនៅកម្ពុជា (ដូចជាតំបន់ដាំដុះក្បែរបឹងទន្លេសាប) រួចយកសំណាកទាំងនោះមកវិភាគកម្រិតអង់ស៊ីម AChE នៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ ដើម្បីចងក្រងជារបាយការណ៍តាមដានគុណភាពបរិស្ថាន។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Acetylcholinesterase (AChE) (អង់ស៊ីមអាសេទីលកូលីនអេស្តេរ៉ាស) អង់ស៊ីមសំខាន់នៅក្នុងប្រព័ន្ធសរសៃប្រសាទដែលមានតួនាទីបំបែកសារធាតុបញ្ជូនសរសៃប្រសាទ (acetylcholine) ដើម្បីបញ្ឈប់ការបញ្ជូនសញ្ញា។ នៅពេលអង់ស៊ីមនេះត្រូវរារាំងដោយថ្នាំពុល វាធ្វើឱ្យសត្វប្រកាច់ ឬស្លាប់ដោយសារសរសៃប្រសាទធ្វើការហួសកម្រិត។ ដូចជាហ្វ្រាំងឡានដែលជួយបញ្ឈប់ចលនា បើគ្មានវាទេ ឡាននឹងរត់ទៅមុខរហូតដល់បុកគ្នានិងមានគ្រោះថ្នាក់។
Butyrylcholinesterase (BuChE) (អង់ស៊ីមប៊ុយទីរីលកូលីនអេស្តេរ៉ាស) អង់ស៊ីមមួយប្រភេទទៀតដែលភាគច្រើនមាននៅក្នុងប្លាស្មាឈាម (ទឹកឈាម) ដែលមានតួនាទីជួយបន្សាបនិងបំបែកសារធាតុពុលផ្សេងៗពីខាងក្រៅ មុនពេលពួកវាអាចរាលដាលទៅដល់ប្រព័ន្ធសរសៃប្រសាទកណ្តាល។ ដូចជាកងទ័ពការពារជួរមុខដែលជួយទប់ស្កាត់និងកម្ចាត់សត្រូវ (ជាតិពុល) មុនពេលវាវាយលុកចូលដល់ទីបញ្ជាការកណ្តាល (ខួរក្បាល)។
Biomarker (សូចនាករជីវសាស្ត្រ) ការផ្លាស់ប្តូរផ្នែកជីវសាស្ត្រ សរីរវិទ្យា ឬម៉ូលេគុល (ដូចជាការថយចុះកម្រិតអង់ស៊ីមណាមួយ) នៅក្នុងសត្វឬរុក្ខជាតិ ដែលបញ្ជាក់ពីការរងផលប៉ះពាល់ពីសារធាតុពុលនៅក្នុងបរិស្ថាន មុនពេលសត្វនោះស្លាប់។ ដូចជាប្រព័ន្ធរោទិ៍ (Alarm) ប្រាប់ពីគ្រោះថ្នាក់ ដែលលោតបន្លឺសំឡេងឡើងដើម្បីព្រមានថានៅក្នុងផ្ទះកំពុងមានផ្សែងឬភ្លើងឆេះ។
Lethal Concentration (LC50) (កំហាប់ជាតិពុលដែលអាចសម្លាប់សារពាង្គកាយពាក់កណ្តាល) កម្រិតកំហាប់នៃសារធាតុពុលនៅក្នុងបរិស្ថាន (ដូចជាក្នុងទឹក) ដែលមានសមត្ថភាពអាចសម្លាប់សត្វពិសោធន៍ (ឧ. ត្រី) អស់ចំនួន ៥០% (ពាក់កណ្តាល) ក្នុងរយៈពេលកំណត់ណាមួយ ដូចជា ៩៦ម៉ោង។ ដូចជាការវាស់ស្ទង់រកមើលថាតើត្រូវប្រើថ្នាំពុលចំនួនប៉ុន្មានដំណក់ ទើបអាចសម្លាប់សត្វល្អិតពាក់កណ្តាលហ្វូងបាន។
Western blot technique (បច្ចេកទេសវិភាគប្រូតេអ៊ីនខាងលិច) វិធីសាស្ត្រមន្ទីរពិសោធន៍ដ៏ស្មុគស្មាញមួយសម្រាប់រកមើលវត្តមានប្រូតេអ៊ីនគោលដៅជាក់លាក់ណាមួយ (ដូចជា AChE) និងអាចកំណត់ទំហំម៉ូលេគុលរបស់វាបានយ៉ាងច្បាស់លាស់ ដោយប្រើប្រាស់អង្គបដិប្រាណ (Antibodies) មកចាប់វា។ ដូចជាការប្រើម៉ាស៊ីនស្កេនរកមើលមុខសញ្ញាឧក្រិដ្ឋជនម្នាក់ (ប្រូតេអ៊ីនគោលដៅ) នៅក្នុងចំណោមហ្វូងមនុស្សរាប់ម៉ឺននាក់ ដោយផ្អែកលើទំហំ រូបរាង និងអត្តសញ្ញាណរបស់គេ។
Dot blot technique (បច្ចេកទេសវិភាគប្រូតេអ៊ីនតាមចំណុច) វិធីសាស្ត្រងាយស្រួលនិងចំណាយពេលតិចជាងមុន ដើម្បីពិនិត្យមើលវត្តមាននិងកម្រិតបរិមាណប្រូតេអ៊ីនគោលដៅ ដោយគ្រាន់តែន្តក់សំណាកទៅលើបន្ទះក្រដាសពិសេស ហើយប្រើប្រាស់ប្រតិកម្មពណ៌ដើម្បីសម្គាល់ ដោយមិនចាំបាច់បំបែករកទំហំម៉ូលេគុលនោះទេ។ ដូចជាការប្រើប្រាស់ឧបករណ៍តេស្តកូវីដរហ័ស (Rapid test) ដែលគ្រាន់តែន្តក់ទឹកសំណាក រួចរង់ចាំមើលការលោតខ្សែពណ៌ដើម្បីប្រាប់ថាយើងមានផ្ទុកមេរោគឬអត់។
Organophosphate (សមាសធាតុអរហ្គាណូផូស្វាត) ក្រុមថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតដែលមានផ្ទុកសារធាតុផូស្វ័រ (ដូចជា chlorpyrifos) ដែលសម្លាប់សត្វល្អិតដោយការបិទខ្ទប់ដំណើរការនៃអង់ស៊ីម AChE។ វាក៏បង្កផលប៉ះពាល់ធ្ងន់ធ្ងរដល់ប្រព័ន្ធសរសៃប្រសាទរបស់ត្រី និងមនុស្សផងដែរ។ ដូចជាអាវុធគីមីម៉្យាងដែលសម្លាប់សត្រូវ ដោយធ្វើឱ្យប្រព័ន្ធខួរក្បាលរបស់សត្រូវគាំងដំណើរការភ្លាមៗ។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖