Original Title: Production of Fish Serum Products as Substitute for Fetal Bovine Serum in Hybridoma Cell Cultures from Surimi Industrial Waste
Source: li01.tci-thaijo.org
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការផលិតផលិតផលសេរ៉ូមត្រីដើម្បីជំនួសសេរ៉ូមកូនគោ (Fetal Bovine Serum) ក្នុងការបណ្តុះកោសិកា Hybridoma ពីសំណល់ឧស្សាហកម្មស៊ូរីមី

ចំណងជើងដើម៖ Production of Fish Serum Products as Substitute for Fetal Bovine Serum in Hybridoma Cell Cultures from Surimi Industrial Waste

អ្នកនិពន្ធ៖ Fransiska Zakaria-Runkat (Department of Food Technol Hmn Nutr, Bogor Agric University, Indonesia), Wanchai Worawattanamateekul (Department of Fishery Products, Kasetsart University, Thailand), Ong-ard Lawhavinit (Department of Veterinary Microbiology and Immunology, Kasetsart University, Thailand)

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2006, Kasetsart J. (Nat. Sci.)

វិស័យសិក្សា៖ Biotechnology

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ការបណ្តុះកោសិកា Hybridoma ភាគច្រើនត្រូវប្រើប្រាស់សេរ៉ូមកូនគោ (Fetal Bovine Serum - FBS) ដែលមានតម្លៃថ្លៃ ដូច្នេះការសិក្សានេះស្វែងរកសារធាតុជំនួសដោយប្រើប្រាស់សំណល់ទឹកលាងត្រីពីឧស្សាហកម្មផលិតស៊ូរីមី (Surimi) ដើម្បីកាត់បន្ថយចំណាយ និងទាញយកប្រយោជន៍ពីសំណល់។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ អ្នកស្រាវជ្រាវបានចម្រាញ់សេរ៉ូមត្រី (FS) ពីទឹកសំណល់លាងត្រី ហើយយកទៅធ្វើតេស្តជំនួស FBS ក្នុងកម្រិតកំហាប់ផ្សេងៗគ្នា ដើម្បីវាយតម្លៃការលូតលាស់របស់កោសិកា និងការផលិតអង្គបដិប្រាណ។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
10% Fetal Bovine Serum (Control)
ការបណ្តុះដោយប្រើសេរ៉ូមកូនគោ ១០% (ក្រុមត្រួតពិនិត្យ)
ផ្តល់មជ្ឈដ្ឋានលូតលាស់ដល់កោសិកាបានល្អបំផុត និងមានស្ថិរភាពខ្ពស់សម្រាប់ការផលិតអង្គបដិប្រាណរយៈពេលវែង។ មានតម្លៃថ្លៃខ្លាំង និងបង្កឱ្យមានក្តីបារម្ភផ្នែកសីលធម៌ពាក់ព័ន្ធនឹងការទាញយកសេរ៉ូមពីសត្វ។ កោសិកាមានការលូតលាស់ល្អ និងការបញ្ចេញអង្គបដិប្រាណមានការកើនឡើងជាលំដាប់បន្ទាប់ពីការបណ្តុះលើកទី៣។
2% Fish Serum Substitution
ការជំនួសដោយសេរ៉ូមត្រី ២%
រក្សាបាននូវកម្រិតបញ្ចេញអង្គបដិប្រាណខ្ពស់ប្រហាក់ប្រហែលនឹងក្រុមត្រួតពិនិត្យ ព្រមទាំងជួយកាត់បន្ថយថ្លៃដើម និងកែច្នៃសំណល់រាវ។ កោសិកាមិនមានការលូតលាស់កើនឡើងខ្លាំងនោះទេ បើទោះបីជាវាអាចរស់រាន និងផលិតអង្គបដិប្រាណបានក៏ដោយ។ រក្សាការបញ្ចេញអង្គបដិប្រាណ (IgG) បានយ៉ាងល្អ និងអាចរក្សាកោសិកាឱ្យរស់រានបានរហូតដល់ ៩៦ ម៉ោង ក្រោយការបណ្តុះលើកទី៣។
5% Fish Serum Substitution
ការជំនួសដោយសេរ៉ូមត្រី ៥%
អាចកាត់បន្ថយការប្រើប្រាស់ FBS បានកាន់តែច្រើន ដែលមានន័យថាកាត់បន្ថយចំណាយបានកាន់តែខ្ពស់ (ប្រសិនបើកោសិកាអាចសម្របខ្លួនបាន)។ ធ្វើឱ្យចំនួនកោសិការស់ធ្លាក់ចុះខ្លាំង និងមានការបញ្ចេញអង្គបដិប្រាណទាបជាងគេបំផុត។ ចំនួនកោសិការស់ធ្លាក់ចុះយ៉ាងលឿនស្របតាមចំនួនដងនៃការបណ្តុះ ហើយការផលិតអង្គបដិប្រាណមានកម្រិតទាបបំផុត។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការស្រាវជ្រាវនេះទាមទារឧបករណ៍មន្ទីរពិសោធន៍ជីវបច្ចេកវិទ្យាកម្រិតខ្ពស់ និងវត្ថុធាតុដើមពីឧស្សាហកម្មកែច្នៃត្រី។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះត្រូវបានធ្វើឡើងដោយប្រើប្រាស់ទឹកសំណល់ត្រី Saurida micropectoralis (Lizardfish) និង Upeneus tragula ពីរោងចក្រស៊ូរីមីនៅប្រទេសថៃ និងកោសិកាពីឥណ្ឌូនេស៊ី។ នេះមានន័យថាសមាសធាតុគីមីនៃសំណល់អាចប្រែប្រួលអាស្រ័យលើប្រភេទត្រី និងបច្ចេកទេសរោងចក្រនីមួយៗ។ វាជារឿងសំខាន់សម្រាប់កម្ពុជាក្នុងការធ្វើតេស្តសាកល្បងលើប្រភេទត្រីក្នុងស្រុក និងទឹកសំណល់ពីរោងចក្រកែច្នៃត្រីរបស់ខ្លួន។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

វិធីសាស្ត្រនេះមានសក្តានុពលខ្ពស់សម្រាប់ស្ថាប័នស្រាវជ្រាវនៅកម្ពុជាក្នុងការកាត់បន្ថយការនាំចូលសារធាតុចិញ្ចឹមកោសិកា និងជំរុញការគ្រប់គ្រងសំណល់ពីរោងចក្រ។

ការអនុវត្តបច្ចេកវិទ្យានេះមិនត្រឹមតែជួយជំរុញការស្រាវជ្រាវជីវវេជ្ជសាស្ត្រឱ្យចំណាយតិចប៉ុណ្ណោះទេ ថែមទាំងជួយដោះស្រាយបញ្ហាបរិស្ថានតាមរយៈគោលការណ៍សេដ្ឋកិច្ចចរន្ត (Circular Economy) ផងដែរ។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. ការប្រមូល និងវិភាគទឹកសំណល់ពីរោងចក្រកែច្នៃត្រី: ចុះប្រមូលសំណាកទឹកលាងត្រីពីរោងចក្រក្នុងស្រុក ហើយប្រើប្រាស់ Lowry method ដើម្បីវាស់កម្រិតប្រូតេអ៊ីនសរុប ព្រមទាំងពិនិត្យមើលបរិមាណសមាសធាតុមិនល្អដូចជា TVN និង TMA។
  2. ដំណើរការបន្សុទ្ធ និងផលិតសេរ៉ូមត្រី: ច្រោះទឹកសំណល់ដោយប្រើ Cheese cloth និងក្រដាសចម្រោះ Whatman filter paper No. 1 & 7 រួចយកទៅរំហួតដោយប្រើ Vacuum Evaporator នៅសីតុណ្ហភាព ៤៧ អង្សាសេ ឱ្យសល់កម្រិតប្រូតេអ៊ីន ៣-៤% រួចរក្សាទុកនៅ -២០ អង្សាសេ។
  3. ការសាកល្បងបណ្តុះកោសិកាជាមួយសេរ៉ូមត្រី: រៀបចំមជ្ឈដ្ឋានបណ្តុះកោសិកាដោយប្រើប្រាស់ RPMI-1640 medium ដោយជំនួស FBS ចំនួន ២% ជាសេរ៉ូមត្រី រួចដាក់បណ្តុះកោសិកា Hybridoma ក្នុង CO2 Incubator (៥% CO2, ៣៧ អង្សាសេ)។
  4. ការវាស់ស្ទង់លទ្ធផលរស់រាន និងការបញ្ចេញអង្គបដិប្រាណ: ប្រើប្រាស់ MTT reagent ដើម្បីវាស់អត្រារស់រានរបស់កោសិកានៅ ៥៧០nm និងធ្វើតេស្ត Sandwich ELISA ដើម្បីវាស់កម្រិតនៃការបញ្ចេញ IgG monoclonal antibody នៅអុបទិក ៤៥០nm។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Fetal Bovine Serum (FBS) (សេរ៉ូមឈាមកូនគោ) ជាសារធាតុរាវដែលចម្រាញ់ចេញពីឈាមរបស់កូនគោដែលមិនទាន់កើត (ក្នុងផ្ទៃ) ដែលសម្បូរទៅដោយប្រូតេអ៊ីន និងកត្តាលូតលាស់ (growth factors) ប្រើប្រាស់ជាទូទៅជាអាហារបំប៉នដើម្បីចិញ្ចឹមកោសិកានៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍។ ដូចជាជីបំប៉នពិសេសដែលជួយឱ្យរុក្ខជាតិលូតលាស់បានលឿននិងរឹងមាំនៅក្នុងថ្នាលបណ្តុះ។
Hybridoma cell (កោសិកាអ៊ីប្រ៊ីដូម៉ា) ជាកោសិកាកាត់បញ្ចូលគ្នារវាងកោសិកាផលិតអង្គបដិប្រាណ (B cell) និងកោសិកាមហារីក (myeloma) ដែលធ្វើឱ្យវាមានសមត្ថភាពផលិតអង្គបដិប្រាណបានច្រើន និងអាចរស់បានយូរអង្វែងក្នុងការបណ្តុះ។ ដូចជាការបង្កាត់ពូជរវាងគោសាច់ (ផលិតសាច់បានច្រើន) និងគោព្រៃ (ធន់នឹងជំងឺរស់បានយូរ) ដើម្បីបានពូជគោថ្មីដែលល្អឥតខ្ចោះ។
Monoclonal antibody (Mab) (អង្គបដិប្រាណម៉ូណូក្លូន) ជាប្រូតេអ៊ីនប្រព័ន្ធភាពស៊ាំដែលមានប្រភពចេញពីកោសិកាមេតែមួយគត់ ដែលមានសមត្ថភាពចាប់យកមេរោគ ឬសារធាតុគោលដៅជាក់លាក់ណាមួយបានយ៉ាងសុក្រឹតបំផុត ប្រើប្រាស់ទូលំទូលាយក្នុងការព្យាបាល និងការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យ។ ដូចជាកូនសោរពិសេសមួយ ដែលអាចចាក់សោរបើកបានតែទ្វារមួយគត់ដោយមិនមានការភាន់ច្រឡំ។
Surimi waste (សំណល់ស៊ូរីមី / សំណល់ទឹកលាងត្រី) ជាទឹកសំណល់ដែលបានមកពីដំណើរការលាងសម្អាតសាច់ត្រីកិនក្នុងរោងចក្រផលិតស៊ូរីមី ដែលមានផ្ទុកសារធាតុសេសសល់មានតម្លៃដូចជា ខ្លាញ់ ឈាម និងប្រូតេអ៊ីនរលាយក្នុងទឹក។ ដូចជាទឹកលាងអង្ករដែលសល់ពីការដាំបាយ ដែលនៅមានជាតិម្សៅនិងវីតាមីនលាយឡំនៅក្នុងនោះ។
ELISA method (វិធីសាស្ត្រ ELISA) ជាបច្ចេកទេសក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) ប្រើសម្រាប់វាស់ស្ទង់រកបរិមាណអង្គបដិប្រាណ ឬប្រូតេអ៊ីនគោលដៅ ដោយពឹងផ្អែកលើការផ្លាស់ប្តូរពណ៌នៃប្រតិកម្មអង់ស៊ីម។ ដូចជាការប្រើក្រដាសតេស្តកម្រិតជាតិអាស៊ីត (pH) ដែលដូរពណ៌ទៅតាមកម្រិតអាស៊ីតនៅក្នុងទឹក។
SDS-PAGE (ការបំបែកប្រូតេអ៊ីនតាមប្រព័ន្ធអគ្គិសនី) ជាបច្ចេកទេសបំបែកម៉ូលេគុលប្រូតេអ៊ីនទៅតាមទំហំ (ទម្ងន់ម៉ូលេគុល) របស់វាដោយប្រើចរន្តអគ្គិសនីរត់កាត់ជែល ដែលជួយឱ្យអ្នកស្រាវជ្រាវដឹងពីប្រភេទប្រូតេអ៊ីនដែលមានក្នុងសំណាក។ ដូចជាការប្រើកន្ត្រងរែងគ្រាប់ខ្សាច់ និងគ្រាប់ក្រួស ឱ្យញែកចេញពីគ្នាទៅតាមទំហំតូចនិងធំ។
Trimethylamine (TMA) (ទ្រីមេទីលអាមីន) ជាសមាសធាតុគីមីងាយហើរ ដែលកើតចេញពីការបំបែកសារធាតុនៅក្នុងសាច់ត្រីនៅពេលវាចាប់ផ្តើមខូចគុណភាព ដែលជាភ្នាក់ងារចម្បងបង្កឱ្យមានក្លិនឆ្អាបខ្លាំងនៅក្នុងគ្រឿងសមុទ្រ។ ដូចជាឧស្ម័នដែលភាយចេញពីគំនរសំរាម ធ្វើឱ្យយើងដឹងថាសំរាមនោះកំពុងរលួយ។
MTT colorant (សារធាតុពណ៌ MTT) ជាសារធាតុគីមីម្យ៉ាងដែលត្រូវបានប្រើដើម្បីវាស់អត្រារស់រានមានជីវិតរបស់កោសិកា ដោយកោសិការស់នឹងបំប្លែងសារធាតុនេះឱ្យទៅជាពណ៌ស្វាយ ដែលគេអាចវាស់កម្រិតពណ៌នោះដោយម៉ាស៊ីនដើម្បីដឹងពីចំនួនកោសិការស់។ ដូចជាការផ្លុំខ្យល់ដង្ហើមចូលក្នុងទឹកកំបោរថ្លា បើទឹកប្រែជាល្អក់មានន័យថាយើងនៅមានដង្ហើមរស់។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖