Original Title: Isolation and identification of metabolites from ethyl acetate leaf extract of Solenostemma argel
Source: doi.org/10.34044/j.anres.2021.55.5.06
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការបំបែក និងការកំណត់អត្តសញ្ញាណមេតាបូលីតពីសារធាតុចម្រាញ់ស្លឹក Solenostemma argel ដោយប្រើអេទីលអាសេតាត (Ethyl Acetate)

ចំណងជើងដើម៖ Isolation and identification of metabolites from ethyl acetate leaf extract of Solenostemma argel

អ្នកនិពន្ធ៖ Hanaa Hassabelrasoul (Graduate School of Agricultural Science, Kobe University), Maiko Moriguchi (Graduate School of Agricultural Science, Kobe University), Bubwoong Kang (Graduate School of Agricultural Science, Kobe University), Awatif Ahmed Siribel (Medicinal and Aromatic Plant and Traditional Medicine Research Institute, Sudan), Masaki Kuse (Graduate School of Agricultural Science, Kobe University)

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2021, Agriculture and Natural Resources

វិស័យសិក្សា៖ Phytochemistry

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ការសិក្សានេះមានគោលបំណងបំបែក កំណត់អត្តសញ្ញាណ និងវាស់បរិមាណមេតាបូលីតបន្ទាប់បន្សំ (secondary metabolites) ដែលមានសកម្មភាពជីវសាស្រ្តសំខាន់ៗ ពីសារធាតុចម្រាញ់អេទីលអាសេតាតនៃស្លឹករុក្ខជាតិឱសថ Solenostemma argel

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ អ្នកស្រាវជ្រាវបានធ្វើការចម្រាញ់ស្លឹកក្រៀម ធ្វើការបំបែកដោយសារធាតុរាវ និងបន្សុទ្ធមេតាបូលីតដោយប្រើប្រាស់បច្ចេកទេសក្រូម៉ាតូក្រាហ្វី (Chromatography) និងវិសាលគម (Spectroscopy) ផ្សេងៗ។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Ethyl Acetate Extraction
ការចម្រាញ់ដោយប្រើអេទីលអាសេតាត
ផ្តល់ទិន្នផលមេតាបូលីតគោលដៅខ្ពស់ (ជាពិសេសសមាសធាតុទី៣) និងបង្ហាញសកម្មភាពប្រឆាំងការកន្ត្រាក់សាច់ដុំ (Anti-spasmodic) បានល្អបំផុត។ វាជួយផ្តោតលើការទាញយកសមាសធាតុដែលមានសកម្មភាពជីវសាស្រ្តជាក់លាក់។ ទិន្នផលនៃសារធាតុចម្រាញ់សរុប (Total yield) មានកម្រិតទាបបើប្រៀបធៀបទៅនឹងការប្រើប្រាស់សារធាតុរំលាយផ្សេងទៀត។ ទាមទារការបន្សុទ្ធបន្តបន្ទាប់បន្ថែមទៀត។ ទទួលបានសមាសធាតុ kaempferol-3-O-[α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-β-D-glucopyranosyl] រហូតដល់ ១៦% នៃទម្ងន់សារធាតុចម្រាញ់។
Hexane and Chloroform Extraction
ការចម្រាញ់ដោយប្រើហិចសាន និងក្លរ៉ូហ្វម (ប្រព័ន្ធប្រៀបធៀប/ដំណាក់កាលបឋម)
មានប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់ក្នុងការកម្ចាត់អាស៊ីតខ្លាញ់ (Fatty acids) និងជាតិពណ៌ (Pigments) ចេញពីរុក្ខជាតិ ដើម្បីកុំឱ្យរំខានដល់ការវិភាគឧបករណ៍នៅដំណាក់កាលក្រោយ។ មិនមែនជាសារធាតុរំលាយដ៏ល្អបំផុតសម្រាប់ទាញយកសមាសធាតុ kaempferol ដែលមានសកម្មភាពជីវសាស្រ្តខ្ពស់នោះទេ ដោយវាផ្តល់សកម្មភាពប្រឆាំងការកន្ត្រាក់សាច់ដុំខ្សោយជាង។ ត្រូវបានប្រើប្រាស់ដោយជោគជ័យសម្រាប់តែការបន្សុទ្ធបឋម (Liquid-liquid fractionation) ដើម្បីត្រួសត្រាយផ្លូវសម្រាប់ការទាញយកដោយ Ethyl Acetate។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការសិក្សានេះទាមទារនូវឧបករណ៍មន្ទីរពិសោធន៍គីមីកម្រិតខ្ពស់ និងសារធាតុគីមីប្រើប្រាស់ជាក់លាក់សម្រាប់ការបំបែក និងវិភាគរចនាសម្ព័ន្ធម៉ូលេគុល ដែលមានតម្លៃថ្លៃ។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះត្រូវបានធ្វើឡើងដោយផ្តោតទៅលើរុក្ខជាតិ Solenostemma argel ដែលប្រមូលបានពីតំបន់ក្តៅហួតហែងភាគខាងជើងនៃប្រទេសស៊ូដង់ (Sudan)។ ទោះបីជារុក្ខជាតិប្រភេទនេះមិនមានដុះទូទៅនៅកម្ពុជាក៏ដោយ ប៉ុន្តែវិធីសាស្ត្រនៃការបំបែកមេតាបូលីតតាមដំណាក់កាលនេះ គឺជារូបមន្តដ៏សំខាន់ដែលកម្ពុជាអាចរៀនសូត្រ និងយកមកអនុវត្តលើរុក្ខជាតិឱសថក្នុងស្រុកដែលមិនទាន់មានការស្រាវជ្រាវគ្រប់គ្រាន់។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

វិធីសាស្ត្រទាញយកសារធាតុសកម្មជីវសាស្រ្តនេះមានសក្តានុពលខ្ពស់ក្នុងការយកមកអនុវត្តសម្រាប់ការស្រាវជ្រាវរុក្ខជាតិឱសថ និងឱសថបុរាណនៅប្រទេសកម្ពុជា។

ជារួម ការអនុវត្តបច្ចេកទេសចម្រាញ់ និងបន្សុទ្ធនេះនឹងជួយលើកកម្ពស់ស្តង់ដារនៃការស្រាវជ្រាវឱសថបុរាណខ្មែរឱ្យមានលក្ខណៈវិទ្យាសាស្រ្តច្បាស់លាស់ និងអាចជំរុញការអភិវឌ្ឍទៅជាផលិតផលពាណិជ្ជកម្មប្រកបដោយទំនុកចិត្ត។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. រៀបចំការចម្រាញ់បឋម (Maceration & Extraction): ប្រមូលរុក្ខជាតិឱសថក្នុងស្រុក សម្ងួតឱ្យស្ងួត រួចកិនជាម្សៅ ហើយធ្វើការត្រាំជាមួយអេតាណុលដោយប្រើបច្ចេកទេស Maceration ឬប្រើឧបករណ៍ Soxhlet Extractor ដើម្បីទាញយកសារធាតុរាវបឋម។
  2. អនុវត្តការបំបែកសារធាតុ (Liquid-Liquid Partitioning): ប្រើប្រាស់ឧបករណ៍ Separatory Funnel ដើម្បីបំបែកស្រទាប់សារធាតុរាវ ដោយប្រើ Hexane ដើម្បីកម្ចាត់ខ្លាញ់ និងប្រើ Ethyl Acetate ដើម្បីទាញយកមេតាបូលីតគោលដៅ។
  3. បន្សុទ្ធសមាសធាតុសកម្ម (Purification & Isolation): បំបែកសារធាតុចម្រាញ់ទៅជាសមាសធាតុទោល ដោយឆ្លងកាត់ការបន្សុទ្ធតាមរយៈ Silica Gel Column Chromatography និង Preparative TLC
  4. វិភាគ និងកំណត់រចនាសម្ព័ន្ធម៉ូលេគុល (Structural Elucidation): សហការជាមួយមន្ទីរពិសោធន៍ថ្នាក់តំបន់ ឬអន្តរជាតិ ដើម្បីបញ្ជូនគំរូដែលបានបន្សុទ្ធទៅធ្វើការវិភាគតាមរយៈម៉ាស៊ីន NMR Spectroscopy និង IR Spectroscopy
  5. វាយតម្លៃសកម្មភាពជីវសាស្រ្ត (Biological Assay Evaluation): យកសមាសធាតុដែលបានរកឃើញទៅធ្វើតេស្តសកម្មភាពជីវសាស្រ្ត ដូចជាការប្រឆាំងការរលាក ឬប្រឆាំងមេរោគ ដោយប្រើប្រាស់ In-vitro Assay Kits ដើម្បីបញ្ជាក់ពីសក្តានុពលផ្នែកវេជ្ជសាស្រ្ត។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Secondary metabolites (មេតាបូលីតបន្ទាប់បន្សំ) សមាសធាតុគីមីដែលរុក្ខជាតិបង្កើតឡើង មិនមែនសម្រាប់ការលូតលាស់ឬការរស់រានមានជីវិតជាមូលដ្ឋានផ្ទាល់ទេ ប៉ុន្តែសម្រាប់ការពារខ្លួនពីសត្រូវ ជំងឺ ឬទាក់ទាញសត្វល្អិត។ សារធាតុទាំងនេះភាគច្រើនមានសកម្មភាពជាឱសថព្យាបាលសម្រាប់មនុស្ស។ ដូចជាអាវក្រោះ ឬទឹកអប់ដែលមនុស្សប្រើប្រាស់ដើម្បីការពារខ្លួននិងទាក់ទាញអ្នកដទៃ ដែលវាមិនមែនជាអាហារសម្រាប់ចិញ្ចឹមរាងកាយនោះទេ។
Liquid-liquid partitioning (ការបំបែកដោយប្រើសារធាតុរាវ) ដំណើរការបំបែកសមាសធាតុគីមីចេញពីគ្នា ដោយប្រើសារធាតុរំលាយពីរដែលមិនរលាយចូលគ្នា (ឧទាហរណ៍៖ ទឹក និង ហិចសាន)។ សារធាតុគីមីនីមួយៗនៅក្នុងល្បាយ នឹងរត់ទៅរកស្រទាប់សារធាតុរំលាយណាដែលវាមានលក្ខណៈគីមីត្រូវគ្នាជាងគេ។ ដូចជាការបំបែកល្បាយគ្រាប់ខ្សាច់ និងគ្រាប់ស្ពោតដោយដាក់ក្នុងទឹក គ្រាប់ខ្សាច់នឹងលិចទៅបាត ចំណែកគ្រាប់ស្ពោតនឹងអណ្តែតឡើងលើ បង្កើតជាស្រទាប់ផ្សេងគ្នា។
Silica gel column chromatography (ក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីជួរឈរស៊ីលីកាជែល) បច្ចេកទេសបន្សុទ្ធល្បាយសារធាតុគីមីស្មុគស្មាញឱ្យទៅជាសារធាតុទោល ដោយចាក់ល្បាយនោះឆ្លងកាត់បំពង់កែវដែលមានផ្ទុកម្សៅស៊ីលីកាជែល។ សារធាតុនីមួយៗធ្លាក់ចុះមកក្រោមក្នុងល្បឿនខុសៗគ្នា អាស្រ័យលើកម្រិតនៃការតោងជាប់របស់វាទៅនឹងម្សៅស៊ីលីកា។ ដូចជាការប្រណាំងរត់ឆ្លងកាត់ទីធ្លាដែលមានឧបសគ្គ អ្នកដែលមិនសូវទាក់ទាមនឹងឧបសគ្គនឹងរត់ទៅដល់គោលដៅមុន ចំណែកអ្នកដែលទាក់ទាមច្រើននឹងទៅដល់ក្រោយគេ។
Preparative thin layer chromatography / TLC (ក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីស្រទាប់ស្តើង) វិធីសាស្ត្របន្សុទ្ធសារធាតុដោយយកល្បាយទៅន្តក់លើបន្ទះកញ្ចក់ដែលមានស្រោបម្សៅស្តើង រួចជ្រលក់ក្នុងសូលុយស្យុង។ សូលុយស្យុងនឹងជ្រួតឡើងលើដោយនាំយកសមាសធាតុផ្សេងៗទៅជាមួយក្នុងចម្ងាយខុសៗគ្នា ដែលអនុញ្ញាតឱ្យគេកោសយកសមាសធាតុគោលដៅចេញមកបាន។ ដូចជាការន្តក់ទឹកខ្មៅលើក្រដាសជូតមាត់ រួចជ្រលក់ចុងក្រដាសក្នុងទឹក នោះអ្នកនឹងឃើញពណ៌ផ្សេងៗដែលផ្សំជាទឹកខ្មៅនោះរត់ឡើងលើ និងបែកជាស្រទាប់ពណ៌ខុសៗគ្នា។
Nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy (វិសាលគមរ៉េសូណង់ម៉ាញេទិកនុយក្លេអ៊ែរ) បច្ចេកទេសវិភាគកម្រិតខ្ពស់ដែលប្រើប្រាស់ដែនម៉ាញេទិកខ្លាំង ដើម្បីស្វែងយល់ពីរចនាសម្ព័ន្ធម៉ូលេគុល និងរបៀបដែលអាតូម (ដូចជាកាបូន និងអ៊ីដ្រូសែន) តភ្ជាប់គ្នា ដើម្បកំណត់ថាតើសារធាតុនោះមានរូបមន្តគីមីបែបណា។ ដូចជាម៉ាស៊ីនថត MRI នៅមន្ទីរពេទ្យដែលគ្រូពេទ្យប្រើដើម្បីមើលរចនាសម្ព័ន្ធខាងក្នុងរាងកាយមនុស្ស ប៉ុន្តែនេះគឺសម្រាប់មើលរចនាសម្ព័ន្ធខាងក្នុងនៃម៉ូលេគុលតូចៗ។
Infrared (IR) spectroscopy (វិសាលគមអ៊ីនហ្វ្រារ៉េដ) បច្ចេកទេសប្រើប្រាស់ពន្លឺអ៊ីនហ្វ្រារ៉េដដើម្បីចាំងទៅលើសារធាតុគីមី ដែលធ្វើឱ្យចំណងម៉ូលេគុលញ័រក្នុងប្រេកង់ជាក់លាក់។ កម្រិតនៃការញ័រនេះជួយប្រាប់អ្នកវិទ្យាសាស្ត្រថាតើមានក្រុមមុខងារគីមីអ្វីខ្លះ (ដូចជាក្រុមអ៊ីដ្រុកស៊ីល -OH) នៅក្នុងសមាសធាតុនោះ។ ដូចជាការគោះកណ្តឹងដែលមានទំហំខុសៗគ្នា សំឡេង (រលកញ័រ) ដែលបន្លឺឡើងនឹងប្រាប់យើងពីប្រភេទ និងទំហំនៃកណ្តឹងនោះដោយមិនបាច់មើលវាផ្ទាល់។
Maceration (ការត្រាំចម្រាញ់) វិធីសាស្ត្រទាញយកសារធាតុពីសាច់រុក្ខជាតិ ដោយយកវាមកកិនរួចត្រាំក្នុងសារធាតុរំលាយ (ដូចជាអេតាណុល ឬទឹក) ក្នុងរយៈពេលយូរនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ ដើម្បីឱ្យសារធាតុសកម្មរលាយចេញមកក្រៅបន្តិចម្តងៗ។ ដូចជាការឆុងតែដោយយកកញ្ចប់តែទៅត្រាំក្នុងទឹកក្តៅទុកចោលមួយសន្ទុះ ដើម្បីឱ្យជាតិពណ៌ និងក្លិនឈ្ងុយនៃតែរលាយចេញមកក្នងទឹក។
Retention factor / Rf (កត្តារក្សាទុក / តម្លៃ Rf) រង្វាស់មួយនៅក្នុងបច្ចេកទេស TLC ដែលគណនាពីផលធៀបរវាងចម្ងាយដែលសារធាតុគីមីនីមួយៗរត់បាន ធៀបនឹងចម្ងាយសរុបដែលសារធាតុរំលាយរត់បាន។ តម្លៃនេះជួយសម្គាល់អត្តសញ្ញាណបឋមនៃសមាសធាតុ។ ដូចជាការវាស់ប្រវែងដែលសិស្សម្នាក់ៗរត់បានក្នុងរយៈពេល១នាទី ធៀបនឹងចម្ងាយសរុបនៃទីលាន គឺអាចប្រាប់យើងពីកម្រិតល្បឿនខុសៗគ្នារបស់សិស្សម្នាក់ៗបាន។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖