Original Title: Isolation and ultra-high performance liquid chromatography analysis of zerumbone and zerumbone epoxide in Zingiber zerumbet rhizomes
Source: doi.org/10.34044/j.anres.2023.57.1.10
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការញែក និងការវិភាគដោយប្រើក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីរាវកម្រិតខ្ពស់បំផុត (UHPLC) នៃសារធាតុ zerumbone និង zerumbone epoxide នៅក្នុងមើម Zingiber zerumbet

ចំណងជើងដើម៖ Isolation and ultra-high performance liquid chromatography analysis of zerumbone and zerumbone epoxide in Zingiber zerumbet rhizomes

អ្នកនិពន្ធ៖ Sumet Kongkiatpaiboon (Thammasat University), Chutharat Saereewat (Sukhothai Thammathirat Open University), Ngampuk Tayana (Thammasat University), Nongnaphat Duangdee (Thammasat University), Wichayasith Inthakusol (Thammasat University)

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2023, Agriculture and Natural Resources

វិស័យសិក្សា៖ Pharmacognosy

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ការស្រាវជ្រាវនេះដោះស្រាយតម្រូវការក្នុងការបង្កើតវិធីសាស្ត្រវិភាគបរិមាណដ៏ឆាប់រហ័ស និងមានប្រសិទ្ធភាព ដើម្បីកំណត់ស្តង់ដារសារធាតុសកម្មជីវសាស្រ្ត (zerumbone និង zerumbone epoxide) នៅក្នុងមើម Zingiber zerumbet សម្រាប់ការអភិវឌ្ឍជាឱសថ។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ ការសិក្សានេះបានប្រើប្រាស់បច្ចេកទេសក្រូម៉ាតូក្រាហ្វី ដើម្បីញែកសារធាតុ និងកំណត់បរិមាណដោយប្រើប្រាស់ប្រព័ន្ធ UHPLC និងធ្វើការប្រៀបធៀបប្រសិទ្ធភាពនៃសារធាតុរំលាយផ្សេងៗ។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Ultra-high performance liquid chromatography (UHPLC)
ការវិភាគដោយប្រើក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីរាវកម្រិតខ្ពស់បំផុត (UHPLC)
ប្រើប្រាស់ពេលវេលាវិភាគខ្លី ស៊ីសារធាតុរំលាយតិច និងមានភាពរសើប (Sensitivity) រួមទាំងភាពជាក់លាក់ខ្ពស់។ តម្រូវឱ្យមានឧបករណ៍មន្ទីរពិសោធន៍ទំនើបដែលមានតម្លៃថ្លៃ និងអ្នកជំនាញកម្រិតខ្ពស់ក្នុងការដំណើរការម៉ាស៊ីន។ ផ្តល់នូវភាពត្រឹមត្រូវខ្ពស់ដោយមានមេគុណ R² = 0.9999 និងអត្រាទាញយក (Recovery) ជាមធ្យម ៩៩,៥៣% និង ១០១,២៧%។
High-performance liquid chromatography (HPLC)
ការវិភាគដោយប្រើក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីរាវកម្រិតខ្ពស់ (HPLC)
ជាបច្ចេកទេសស្តង់ដារដែលមានការប្រើប្រាស់យ៉ាងទូលំទូលាយ និងមានម៉ាស៊ីនបំពាក់នៅតាមមន្ទីរពិសោធន៍ទូទៅច្រើន។ ទាមទារពេលវេលាវិភាគយូរជាង និងប្រើប្រាស់បរិមាណសារធាតុរំលាយ (Mobile phase) ច្រើនជាងបើធៀបនឹង UHPLC។ មិនត្រូវបានធ្វើតេស្តផ្ទាល់ក្នុងការសិក្សានេះទេ ប៉ុន្តែត្រូវបានចាត់ទុកថាជាវិធីសាស្ត្រដែលស៊ីពេលយូរជាង (Baseline method)។
Ultrasound-assisted Ethanol Extraction
ការទាញយកសារធាតុដោយប្រើអេតាណុល និងរលកសំឡេង (Sonication)
អេតាណុលមានតម្លៃថោក មានសុវត្ថិភាពខ្ពស់ មិនសូវពុល និងស័ក្តិសមបំផុតសម្រាប់ការផលិតក្នុងកម្រិតឧស្សាហកម្ម។ ទិន្នផលនៃសារធាតុ zerumbone ទទួលបានទាបជាងការប្រើសារធាតុ tetrahydrofuran បន្តិចបន្តួច។ ផ្តល់ទិន្នផលទាញយកសារធាតុ zerumbone ចំនួន ០,៣១៥៧% និង zerumbone epoxide ចំនួន ០,១៣៩១%។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការអនុវត្តវិធីសាស្ត្រនេះតម្រូវឱ្យមានការវិនិយោគខ្ពស់លើឧបករណ៍មន្ទីរពិសោធន៍ទំនើប និងសារធាតុគីមីដែលមានភាពបរិសុទ្ធកម្រិតស្តង់ដារ។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះត្រូវបានធ្វើឡើងដោយប្រើប្រាស់គំរូមើម Zingiber zerumbet ដែលប្រមូលបានពីតំបន់ចំនួន៤ផ្សេងគ្នានៅក្នុងប្រទេសថៃ។ ដោយសារអាកាសធាតុ និងលក្ខខណ្ឌដីនៅកម្ពុជាអាចមានភាពខុសប្លែកពីប្រទេសថៃ ការសិក្សាស្រាវជ្រាវលើពូជរុក្ខជាតិដុះនៅកម្ពុជាផ្ទាល់ គឺជារឿងចាំបាច់ដើម្បីបញ្ជាក់ពីកម្រិតបរិមាណសារធាតុសកម្មទាំងនេះឱ្យបានច្បាស់លាស់។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

វិធីសាស្ត្រវិភាគ និងដំណើរការទាញយកសារធាតុនេះ មានអត្ថប្រយោជន៍យ៉ាងខ្លាំងសម្រាប់ការស្រាវជ្រាវ និងការអភិវឌ្ឍផលិតផលឱសថធម្មជាតិនៅកម្ពុជា។

សរុបមក ការសហការរវាងសាកលវិទ្យាល័យ និងស្ថាប័នពាក់ព័ន្ធក្នុងការអនុវត្តវិធីសាស្ត្រនេះ នឹងជួយលើកកម្ពស់ស្តង់ដារនៃផលិតផលឱសថរុក្ខជាតិរបស់កម្ពុជាឱ្យស្របតាមស្តង់ដារអន្តរជាតិ។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. សិក្សាមូលដ្ឋានគ្រឹះនៃម៉ាស៊ីន UHPLC: និស្សិតគួរសិក្សាស្វែងយល់ពីគោលការណ៍ដំណើរការរបស់ម៉ាស៊ីន Thermo Fisher Vanquish UHPLC និងការជ្រើសរើសជួរឈរ BDS Hypersil C18 សម្រាប់បំបែកសមាសធាតុគីមីដែលមានកម្រិតប៉ូលែរ (Polarity) ខុសៗគ្នា។
  2. ការរៀបចំគំរូ និងការទាញយកសារធាតុ: អនុវត្តការទាញយកសារធាតុពីមើម Zingiber zerumbet ដោយប្រើប្រាស់ Ethanol និងម៉ាស៊ីន Ultrasonic bath ដើម្បីស្វែងរកកម្រិតទិន្នផលខ្ពស់បំផុត ដោយប្រើប្រាស់សីតុណ្ហភាព និងពេលវេលាសមស្រប។
  3. ការកំណត់សុពលភាពនៃវិធីសាស្ត្រវិភាគ: អនុវត្តការវាយតម្លៃសុពលភាពវិធីសាស្ត្រតាមស្តង់ដារ ICH Guidelines ដោយត្រូវគណនារកភាពត្រឹមត្រូវ (Accuracy) ភាពជាក់លាក់ (Precision) និងដែនកំណត់ (LOD/LOQ) តាមរយៈការប្រើប្រាស់ Standard calibration curve
  4. ការសហការ និងអនុវត្តជាក់ស្តែង: ស្វែងរកឱកាសធ្វើកម្មសិក្សាជាមួយមន្ទីរពិសោធន៍ជាតិ ឬមជ្ឈមណ្ឌលស្រាវជ្រាវនានា ដែលមានបំពាក់ប្រព័ន្ធ Chromatography ទំនើប ដើម្បីទទួលបានបទពិសោធន៍ផ្ទាល់ក្នុងការវិភាគបរិមាណសារធាតុសកម្មពីរុក្ខជាតិ។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Ultra-high performance liquid chromatography (UHPLC) (ក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីរាវកម្រិតខ្ពស់បំផុត) ជាបច្ចេកទេសវិភាគគីមីដែលប្រើសម្ពាធខ្លាំងដើម្បីបំបែក កំណត់អត្តសញ្ញាណ និងវាស់បរិមាណសមាសធាតុនីមួយៗនៅក្នុងល្បាយសូលុយស្យុងបានយ៉ាងរហ័សនិងមានភាពជាក់លាក់ខ្ពស់បំផុត។ ដូចជាការតម្រៀបកាក់ចម្រុះជាច្រើនប្រភេទដោយម៉ាស៊ីនរាប់កាក់ ដោយវាអាចញែកកាក់តាមទំហំ និងប្រភេទបានយ៉ាងលឿននិងត្រឹមត្រូវបំផុត។
Zerumbone (សារធាតុសកម្មសេរ៉ុមបូន) ជាសមាសធាតុសកម្មជីវសាស្រ្តចម្បងមួយប្រភេទ (ស្ថិតក្នុងក្រុម Sesquiterpene) ដែលចម្រាញ់ចេញពីមើមខ្ញីព្រៃ Zingiber zerumbet និងមានសក្តានុពលខ្ពស់ក្នុងការប្រឆាំងការរលាក និងទប់ស្កាត់កោសិកាមហារីក។ ដូចជា 'អាវុធសម្ងាត់' ដែលលាក់នៅក្នុងមើមរុក្ខជាតិ ដើម្បីជួយប្រយុទ្ធប្រឆាំងនឹងជំងឺផ្សេងៗ។
Limit of detection (LOD) (កម្រិតកំណត់នៃការរាវរក) ជាកំហាប់ទាបបំផុតនៃសារធាតុណាមួយនៅក្នុងគំរូដែលម៉ាស៊ីនវិភាគអាចចាប់សញ្ញាដឹងថាមានវត្តមានសារធាតុនោះ ប៉ុន្តែមិនទាន់អាចវាស់បរិមាណពិតប្រាកដរបស់វាបានច្បាស់លាស់នៅឡើយទេ។ ដូចជាពេលយើងហិតក្លិនដឹងថាមានអ្នកកំពុងចម្អិនម្ហូប ប៉ុន្តែមិនទាន់អាចដឹងច្បាស់ថាគេកំពុងចម្អិនក្នុងបរិមាណប៉ុន្មាន។
Sonication (ការទាញយកសារធាតុដោយប្រើរលកសំឡេង) ជាដំណើរការប្រើប្រាស់ថាមពលនៃរលកសំឡេង (Ultrasound) ដើម្បីញែកឬបំបែកកោសិការុក្ខជាតិ ដែលជួយឱ្យសារធាតុរំលាយអាចជ្រាបចូលទាញយកសារធាតុសកម្មបានកាន់តែច្រើន និងលឿន។ ដូចជាការអង្រួនកែវទឹកដែលមានស្ករយ៉ាងញាប់ ដើម្បីឱ្យស្កររលាយចូលក្នុងទឹកបានលឿនជាងការទុកចោលធម្មតា។
Column chromatography (ក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីជួរឈរ) ជាវិធីសាស្ត្រមន្ទីរពិសោធន៍សម្រាប់ញែកសមាសធាតុគីមីនីមួយៗចេញពីល្បាយ ដោយទម្លាក់ល្បាយនោះឆ្លងកាត់បំពង់ដែលផ្ទុកសារធាតុស្រូបយក (Stationary phase) ធ្វើឱ្យសារធាតុនីមួយៗហូរធ្លាក់ក្នុងល្បឿនខុសៗគ្នា។ ដូចជាការចាក់ទឹកកខ្វក់ឆ្លងកាត់បំពង់ចម្រោះដែលមានស្រទាប់ខ្សាច់ ក្រួស និងធ្យូង ដើម្បីញែកកាកសំណល់ផ្សេងៗគ្នាចេញពីទឹក។
Method validation (ការធ្វើសុពលភាពវិធីសាស្ត្រ) ជាដំណើរការនៃការធ្វើតេស្តត្រួតពិនិត្យនិងបញ្ជាក់អះអាងថា វិធីសាស្ត្រវិភាគដែលបានបង្កើតឡើងថ្មី ពិតជាមានភាពត្រឹមត្រូវ ច្បាស់លាស់ និងអាចទុកចិត្តបានសម្រាប់ការយកទៅប្រើប្រាស់ជាក់ស្តែង។ ដូចជាការយកជញ្ជីងថ្លឹងថ្មីទៅថ្លឹងដុំដែកស្តង់ដារដែលគេដឹងគីឡូច្បាស់លាស់ ដើម្បីសាកល្បងមើលថាជញ្ជីងនោះពិតជាថ្លឹងបានត្រឹមត្រូវឬអត់ មុននឹងយកវាទៅថ្លឹងលក់ទំនិញ។
Nuclear Magnetic Resonance (NMR) (រ៉េសូណង់ម៉ាញេទិកនុយក្លេអ៊ែរ) ជាបច្ចេកទេសវិភាគរចនាសម្ព័ន្ធម៉ូលេគុលយ៉ាងលម្អិត ដោយប្រើប្រាស់ដែនម៉ាញេទិកដើម្បីកំណត់ទីតាំងនៃអាតូម (ដូចជាកាបូន និងអ៊ីដ្រូសែន) នៅក្នុងសមាសធាតុគីមី ដើម្បីដឹងពីរចនាសម្ព័ន្ធពិតប្រាកដរបស់វា។ ដូចជាការថតកាំរស្មីអ៊ិច (X-ray) ឬ MRI ទៅលើម៉ូលេគុលតូចៗ ដើម្បីមើលឃើញពីរបៀបដែលអាតូមតភ្ជាប់គ្នានៅខាងក្នុង។
Recovery (អត្រាទាញយក ឬអត្រាទទួលបានត្រឡប់មកវិញ) ជារង្វាស់គិតជាភាគរយដើម្បីវាយតម្លៃភាពត្រឹមត្រូវនៃវិធីសាស្ត្រវិភាគ ដោយវាស់ចំនួនសារធាតុស្តង់ដារដែលម៉ាស៊ីនរកឃើញ ធៀបនឹងចំនួនសារធាតុដែលគេបានដឹងនិងលាយបញ្ចូលទៅក្នុងគំរូសាកល្បងដោយចេតនា។ ដូចជាការលាក់កាក់ចំនួន ១០០ គ្រាប់ក្នុងគំនរខ្សាច់ រួចព្យាយាមជីករកមកវិញ បើរាវរកឃើញ ៩៩ គ្រាប់ នោះអត្រាទាញយកគឺ ៩៩%។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖