Original Title: Detection of Ascaris suum in the Livers of Chickens Infected Naturally by the Nested Multiplex PCR Assay
Source: doi.org/10.31817/vjas.2020.3.2.04
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការរកឃើញព្រូន Ascaris suum នៅក្នុងថ្លើមមាន់ដែលឆ្លងតាមបែបធម្មជាតិដោយប្រើវិធីសាស្ត្រ Nested Multiplex PCR

ចំណងជើងដើម៖ Detection of Ascaris suum in the Livers of Chickens Infected Naturally by the Nested Multiplex PCR Assay

អ្នកនិពន្ធ៖ Nguyen Thi Hoang Yen (Faculty of Veterinary Medicine, Vietnam National University of Agriculture), Nguyen Thi Hop, Tran Hai Thanh, Nguyen Van Phuong, Nguyen Thi Hong Chien, Bui Khanh Linh, Do Trung Dung

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2020, Vietnam Journal of Agricultural Sciences

វិស័យសិក្សា៖ Veterinary Parasitology

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ការសិក្សានេះដោះស្រាយបញ្ហានៃការខ្វះព័ត៌មានអំពីការឆ្លងព្រូន Ascaris suum នៅក្នុងមាន់ និងវាយតម្លៃហានិភ័យនៃការឆ្លងជំងឺពីសត្វទៅមនុស្ស (Zoonosis) តាមរយៈការបរិភោគថ្លើមមាន់ដែលឆ្លងមេរោគដោយធម្មជាតិនៅក្នុងប្រទេសវៀតណាម។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ អ្នកស្រាវជ្រាវបានប្រមូលសំណាកថ្លើមមាន់ពីទីផ្សារ និងប្រើប្រាស់បច្ចេកទេសវិភាគ DNA ដើម្បីកំណត់អត្តសញ្ញាណប្រភេទព្រូន។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Nested Multiplex PCR Assay
ការធ្វើតេស្តដោយបច្ចេកទេស Nested Multiplex PCR
មានភាពជាក់លាក់ និងរសើបខ្ពស់ដែលអាចបែងចែកប្រភេទព្រូន A. suum, T. canis និង T. cati បានយ៉ាងច្បាស់លាស់ ទោះបីជាគ្មានរោគសញ្ញាលើថ្លើមក៏ដោយ។ ទាមទារឧបករណ៍មន្ទីរពិសោធន៍ទំនើប ចំណាយថវិកាច្រើន និងត្រូវការអ្នកមានជំនាញបច្ចេកទេសខ្ពស់ក្នុងការអនុវត្ត។ រកឃើញ DNA របស់ព្រូន A. suum ចំនួន ២ ករណី ក្នុងចំណោមសំណាកថ្លើមមាន់ ៩៤ ដែលមើលមិនឃើញរោគសញ្ញាដោយភ្នែកទទេ។
Macroscopic Inspection (White Spot Lesions)
ការពិនិត្យមើលរោគសញ្ញាស្នាមអុចសលើថ្លើមដោយភ្នែកទទេ
ងាយស្រួលធ្វើ មិនចំណាយថវិកា និងអាចអនុវត្តបានភ្លាមៗនៅទីវាល ឬទីផ្សារ។ មិនមានភាពជាក់លាក់ ដោយស្នាមអុចសអាចបណ្តាលមកពីជំងឺផ្សេង (ដូចជាជំងឺ Marek's) ហើយមិនអាចរកឃើញការឆ្លងក្នុងដំណាក់កាលដំបូងឡើយ។ រកឃើញថ្លើមមានស្នាមអុចសចំនួន ១៥ ករណី ប៉ុន្តែគ្មានសំណាកណាមួយមានផ្ទុក DNA ព្រូនដែលកំពុងសិក្សានោះទេ។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការអនុវត្តបច្ចេកទេសរាវរកនេះ ទាមទារការបំពាក់ឧបករណ៍មន្ទីរពិសោធន៍ជីវវិទ្យាម៉ូលេគុលកម្រិតស្តង់ដារ និងសារធាតុគីមីមួយចំនួនសម្រាប់ការចម្រាញ់ DNA ។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះប្រមូលសំណាកថ្លើមមាន់តែ ៩៤ គំរូពីរាជធានីហាណូយ និងខេត្តជិតខាងមួយចំនួនក្នុងប្រទេសវៀតណាម ដែលជាទំហំសំណាកតូច និងផ្តោតតែលើមាន់លែង (Free-range chickens)។ កត្តានេះមានសារៈសំខាន់សម្រាប់ប្រទេសកម្ពុជា ព្រោះកម្ពុជាមានការចិញ្ចឹមមាន់លែងតាមផ្ទះច្រើន និងមានការប្រើប្រាស់លាមកសត្វជាជី ដែលអាចបង្កហានិភ័យស្រដៀងគ្នាប៉ុន្តែអាចមានអត្រាឆ្លងខុសគ្នាអាស្រ័យលើអនាម័យបរិស្ថានក្នុងតំបន់។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

វិធីសាស្ត្រ និងលទ្ធផលនៃការសិក្សានេះមានភាពពាក់ព័ន្ធ និងអាចយកមកអនុវត្តបានយ៉ាងល្អសម្រាប់ប្រទេសកម្ពុជា ពិសេសក្នុងការគ្រប់គ្រងជំងឺឆ្លងពីសត្វមកមនុស្ស។

សរុបមក ការអនុវត្តបច្ចេកទេសនេះនឹងជួយពង្រឹងសមត្ថភាពរាវរកជំងឺ Zoonosis របស់កម្ពុជា និងលើកកម្ពស់ការយល់ដឹងពីអនាម័យចំណីអាហារ និងការចិញ្ចឹមសត្វ។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. សិក្សាពីមូលដ្ឋានគ្រឹះនៃបច្ចេកទេស PCR: ស្វែងយល់ពីទ្រឹស្តី និងគោលការណ៍នៃ PCR, Nested PCR និង Multiplex PCR រួមទាំងការរចនា និងការប្រើប្រាស់ Universal and Species-specific Primers
  2. ហ្វឹកហាត់ការចម្រាញ់ DNA: អនុវត្តការទាញយក DNA ពីជាលិកាសត្វ ដោយសាកល្បងទាំងវិធីសាស្ត្រ Alkaline lysis និងការប្រើប្រាស់ Commercial DNA Extraction Kits ព្រមទាំងការវាស់កំហាប់ដោយប្រើ NanoDrop spectrophotometer
  3. ការចុះប្រមូលសំណាកជាក់ស្តែង: សហការជាមួយសត្តឃាតដ្ឋាន ឬទីផ្សារក្នុងស្រុក ដើម្បីប្រមូលសំណាកថ្លើមមាន់ និងសង្កេតកត់ត្រារកមើលស្នាមអុចស (Macropathology) មុននឹងយកសំណាកទៅរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាព -20°C ។
  4. ការវិភាគ និងបកស្រាយលទ្ធផល: អនុវត្តការរត់ Agarose Gel Electrophoresis ដើម្បីបំបែក PCR products និងរៀនពីរបៀបអានទំហំ Band (ឧទាហរណ៍ 233bp សម្រាប់ A. suum) ក្រោមពន្លឺ UV light
  5. រៀបចំយុទ្ធនាការអប់រំសហគមន៍: ប្រើប្រាស់លទ្ធផលស្រាវជ្រាវដើម្បីបង្កើតជាខិត្តប័ណ្ណព័ត៌មានអប់រំកសិករអំពីការគ្រប់គ្រងសំណល់លាមកសត្វឱ្យបានត្រឹមត្រូវ និងពន្យល់ពីហានិភ័យសុខភាពនៃការបរិភោគថ្លើមសត្វមិនឆ្អិនល្អ។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Nested multiplex PCR (ប្រតិកម្មខ្សែសង្វាក់ប៉ូលីមេរ៉ាសចម្រុះតម្រួត) ជាបច្ចេកទេសជីវវិទ្យាម៉ូលេគុលដែលប្រើប្រាស់ប្រតិកម្ម PCR ចំនួនពីរដងតម្រួតគ្នា (Nested) និងមានសមត្ថភាពពង្រីក DNA គោលដៅច្រើនប្រភេទក្នុងពេលតែមួយ (Multiplex) ដើម្បីបង្កើនភាពរសើបនិងភាពជាក់លាក់ក្នុងការស្វែងរកអត្តសញ្ញាណមេរោគ។ ដូចជាការប្រើប្រាស់កែវពង្រីកឆ្លុះរកមើលម្ជុលក្នុងបាតសមុទ្រ ហើយបន្ទាប់មកប្រើកែវមីក្រូទស្សន៍ឆ្លុះមើលម្ជុលនោះម្តងទៀតដើម្បីឱ្យប្រាកដថាជាប្រភេទម្ជុលអ្វីពិតប្រាកដ។
Paratenic host (ធ្មួលចម្លងបណ្តោះអាសន្ន) ជាសត្វដែលដើរតួជាកន្លែងផ្ទុកនិងដឹកជញ្ជូនភ្នាក់ងារចម្លងរោគ (ដូចជាដង្កូវព្រូន) ដោយមិនមានការវិវត្ត ឬលូតលាស់ទៅជាទម្រង់ពេញវ័យឡើយ ហើយវាអាចចម្លងបន្តទៅធ្មួលចុងក្រោយ (Definitive host) ឬមនុស្សនៅពេលត្រូវបានស៊ី។ ដូចជាឡានក្រុងដែលដឹកអ្នកដំណើរ (មេរោគ) ពីចំណតមួយទៅចំណតមួយទៀត ដោយមិនមានការផ្លាស់ប្តូររូបរាងឬទំហំរបស់អ្នកដំណើរនោះឡើយ។
Ascarid larva migrans syndrome (រោគសញ្ញាដង្កូវព្រូនផ្លាស់ទីក្នុងសរីរាង្គ) ជារោគសញ្ញាដែលកើតឡើងនៅពេលដង្កូវព្រូនសត្វ (ដូចជាព្រូន Ascaris suum របស់ជ្រូក) ឆ្លងចូលទៅក្នុងខ្លួនមនុស្ស ហើយធ្វើចលនាវង្វេងចូលទៅកាន់សរីរាង្គផ្សេងៗ (ដូចជាថ្លើម សួត ឬខួរក្បាល) បង្កឱ្យមានការរលាក និងខូចខាតជាលិកាធ្ងន់ធ្ងរ។ ដូចជាភ្ញៀវទេសចរដែលវង្វេងផ្លូវក្នុងទីក្រុង ហើយដើរចូលទៅតំបន់ហាមឃាត់រហូតបង្កភាពវឹកវរដល់សន្តិសុខក្នុងតំបន់នោះ។
White spot lesions (ស្នាមដំបៅអុចស) ជាស្លាកស្នាមរលាក ឬការខូចខាតជាលិកាដែលបន្សល់ទុកនៅលើផ្ទៃនៃសរីរាង្គ (ដូចជាថ្លើមជ្រូក ឬថ្លើមមាន់) ដែលបណ្តាលមកពីការជ្រៀតចូលនិងការផ្លាស់ទីរបស់កូនព្រូន (Larvae) នៅក្នុងសរីរាង្គនោះ។ ដូចជាស្នាមដានជើងកខ្វក់ដែលបន្សល់ទុកនៅលើកម្រាលឥដ្ឋ បន្ទាប់ពីមាននរណាម្នាក់ដើរជាន់កាត់ទីនោះ។
Embryonated eggs (ស៊ុតព្រូនមានកូនញាស់) ជាស៊ុតព្រូនដែលបានវិវត្តនៅក្នុងបរិស្ថានខាងក្រៅរហូតមានកំណកកូនដង្កូវនៅខាងក្នុង ដែលជាដំណាក់កាលអាចចម្លងរោគបាន (Infective stage) នៅពេលដែលសត្វ ឬមនុស្សលេបវាចូលទៅក្នុងពោះវៀន។ ដូចជាគ្រាប់ពូជរុក្ខជាតិដែលបានបណ្ដុះឫសរួចជាស្រេច ហើយត្រៀមខ្លួនដុះលូតលាស់ភ្លាមៗនៅពេលធ្លាក់ចូលទៅដល់ក្នុងដីល្អ។
Alkaline-lysis method (វិធីសាស្ត្របំបែកកោសិកាដោយជាតិក្បុង) ជាបច្ចេកទេសក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ដែលប្រើប្រាស់សារធាតុគីមីមានលក្ខណៈជាបាស (Alkaline) ដូចជា NaOH គួបផ្សំជាមួយកម្ដៅ ដើម្បីបំបែកជញ្ជាំងកោសិកា និងរំលាយប្រូតេអ៊ីន ក្នុងគោលបំណងទាញយក DNA ចេញពីជាលិកា។ ដូចជាការប្រើប្រាស់សាប៊ូនិងទឹកក្ដៅដើម្បីរំលាយខ្លាញ់និងក្អែលចេញពីចាន ដើម្បីយកតែផ្ទៃចានស្អាតសុទ្ធ។
Eosinophilia (ការកើនឡើងកោសិកាឈាមសប្រភេទអ៊ីអូស៊ីណូហ្វីល) ជាស្ថានភាពវេជ្ជសាស្ត្រដែលបរិមាណកោសិកាឈាមសប្រភេទ Eosinophil កើនឡើងខ្ពស់ខុសធម្មតានៅក្នុងចរន្តឈាម ដែលជាទូទៅវាកើតឡើងដើម្បីឆ្លើយតបទៅនឹងការបង្ករោគដោយប៉ារ៉ាស៊ីត (ដូចជាព្រូន) ឬដោយសារប្រតិកម្មអាឡែហ្ស៊ី។ ដូចជាការកេណ្ឌកងទ័ពពិសេសយ៉ាងច្រើនសន្ធឹកសន្ធាប់ភ្លាមៗ ដើម្បីត្រៀមវាយប្រហារទៅលើសត្រូវ (ព្រូន) ដែលទើបតែឈ្លានពានចូលប្រទេស។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖