Original Title: In Vitro Culture Young Leafs and Shoot Tips of Wrightia religiosa Benth
Source: doi.org/10.14456/thaidoa-agres.2011.15
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការបណ្តុះជាលិកាស្លឹកខ្ចី និងចុងត្រួយនៃរុក្ខជាតិ Wrightia religiosa Benth ក្នុងកែវពិសោធន៍

ចំណងជើងដើម៖ In Vitro Culture Young Leafs and Shoot Tips of Wrightia religiosa Benth

អ្នកនិពន្ធ៖ Phopgao Buddharak (Faculty of Science, Department of Biology, University of Payao), Warut U-Kong (Faculty of Science, Department of Biology, University of Payao)

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2011, Thai Agricultural Research Journal Vol. 29 No. 3

វិស័យសិក្សា៖ Plant Tissue Culture

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ រុក្ខជាតិ Wrightia religiosa គឺជារុក្ខជាតិកម្រ និងកំពុងរងការគំរាមកំហែងនៅក្នុងប្រទេសថៃ ដែលទាមទារឱ្យមានការសិក្សាពីការបណ្តុះជាលិកាដើម្បីបង្កើនចំនួននិងអភិរក្សពូជរបស់វា។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ ការស្រាវជ្រាវនេះបានអនុវត្តការបណ្តុះស្លឹកខ្ចី និងចុងត្រួយនៅក្នុងមជ្ឈដ្ឋានសារធាតុចិញ្ចឹម MS (Murashige and Skoog) ដោយប្រើប្រាស់អ័រម៉ូនលូតលាស់រុក្ខជាតិក្នុងកម្រិតកំហាប់ផ្សេងៗគ្នា។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Callus Induction (MS + 4.0 mg/l TDZ + 0.1 mg/l 2,4-D)
ការបណ្តុះកាឡឹស (Callus Induction) ដោយប្រើមជ្ឈដ្ឋាន MS លាយអ័រម៉ូន TDZ និង 2,4-D
ផ្តល់អត្រាដុះកាឡឹសខ្ពស់បំផុត និងបង្កើតបានកាឡឹសពណ៌បៃតងដែលមានសភាពហាប់ណែនល្អ ដែលស័ក្តិសមសម្រាប់ការបន្តពូជ។ ទាមទារការលាយបញ្ចូលគ្នារវាងអ័រម៉ូនពីរប្រភេទ ព្រោះការប្រើប្រាស់ TDZ តែឯងមិនអាចជំរុញការលូតលាស់បានល្អឡើយ និងអាចធ្វើឱ្យជាលិកាងាប់បាន។ ទទួលបានអត្រាដុះកាឡឹសខ្ពស់បំផុតរហូតដល់ ៨០% ក្នុងរយៈពេល ៦ សប្តាហ៍។
Shoot Induction (MS + 4.0 mg/l BA)
ការបណ្តុះត្រួយ (Shoot Induction) ដោយប្រើមជ្ឈដ្ឋាន MS លាយអ័រម៉ូន BA
មានប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់ក្នុងការជំរុញឱ្យមានការលូតលាស់ត្រួយថ្មីបានយ៉ាងឆាប់រហ័ស និងមានចំនួនច្រើនក្នុងមួយជាលិកាដើម (Explant)។ អាចទាមទារការប្តូរទៅមជ្ឈដ្ឋានថ្មីបន្ថែមទៀត ដើម្បីឱ្យត្រួយលូតលាស់ជាដើមពេញលេញ និងចេញឫសសម្រាប់ការដាំដុះទៅខាងក្រៅ។ អត្រាបង្កើតត្រួយទទួលបាន ១០០% ដោយមានចំនួនត្រួយជាមធ្យម ៨,៤ ក្នុងមួយចុងត្រួយដើម។
Surface Sterilization (15% NaOCl for 10 min + 5% for 5 min)
ការសម្លាប់មេរោគលើផ្ទៃជាលិកាដោយប្រើសូដ្យូមអ៊ីប៉ូក្លរិច (NaOCl)
កាត់បន្ថយការចម្លងរោគពីផ្សិត និងបាក់តេរីបានយ៉ាងមានប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់ ដោយនៅតែរក្សាបាននូវអត្រារស់រានមានជីវិតល្អរបស់ជាលិកា។ ប្រសិនបើប្រើប្រាស់កំហាប់ខ្ពស់ពេក ឬត្រាំក្នុងរយៈពេលយូរពេក វាអាចធ្វើឱ្យជាលិកាស្លឹកប្រែជាស្លេក និងងាប់បាន។ អត្រារស់រានមានជីវិតរបស់ស្លឹកខ្ចីទទួលបាន ៨៧,៥០% និងចុងត្រួយទទួលបាន ៧៥% ដោយមានការចម្លងរោគតិចតួចបំផុត។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការស្រាវជ្រាវនេះទាមទារឱ្យមានការរៀបចំមន្ទីរពិសោធន៍បណ្តុះជាលិការុក្ខជាតិស្តង់ដារ ដែលបំពាក់ដោយឧបករណ៍បំពង់កែវ ម៉ាស៊ីនក្រៀវ និងសារធាតុគីមីដែលមានតម្លៃមធ្យមទៅខ្ពស់។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះត្រូវបានអនុវត្តដោយអ្នកស្រាវជ្រាវនៅសាកលវិទ្យាល័យផាយ៉ាវ (University of Payao) ប្រទេសថៃ ដោយផ្តោតជាពិសេសទៅលើពូជរុក្ខជាតិកម្រក្នុងស្រុកគឺ Wrightia religiosa ។ ទោះបីជាលទ្ធផលមានលក្ខណៈជាក់លាក់សម្រាប់ពូជរុក្ខជាតិមួយនេះក្តី ប៉ុន្តែសម្រាប់ប្រទេសកម្ពុជា ទិន្នន័យនៃកម្រិតកំហាប់អ័រម៉ូន និងវិធីសាស្ត្រក្រៀវនេះ អាចចាត់ទុកជាឯកសារយោងដ៏សំខាន់សម្រាប់ការអនុវត្តលើរុក្ខជាតិអំបូរជិតស្និទ្ធ ឬរុក្ខជាតិកម្រផ្សេងៗទៀត។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

បច្ចេកទេសបណ្តុះជាលិកានេះមានសក្តានុពលខ្ពស់ និងអាចអនុវត្តបានយ៉ាងមានប្រសិទ្ធភាពសម្រាប់ការអភិរក្សជីវចម្រុះ និងការអភិវឌ្ឍកសិកម្មនៅប្រទេសកម្ពុជា។

សរុបមក ការសហការគ្នារវាងស្ថាប័នស្រាវជ្រាវ និងការប្រើប្រាស់បច្ចេកទេសនេះ នឹងជួយជំរុញយ៉ាងខ្លាំងដល់ការអភិរក្សពូជរុក្ខជាតិកម្រ និងការផ្គត់ផ្គង់កូនឈើប្រកបដោយគុណភាពខ្ពស់សម្រាប់ទីផ្សារក្នុងប្រទេសកម្ពុជា។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. សិក្សាមូលដ្ឋានគ្រឹះស្តីពីការបណ្តុះជាលិកា: និស្សិតគប្បីសិក្សាពីសមាសធាតុសំខាន់ៗនៃមជ្ឈដ្ឋាន Murashige and Skoog (MS medium) រួមទាំងស្វែងយល់ពីមុខងារនៃអ័រម៉ូនលូតលាស់រុក្ខជាតិដូចជា Auxin (ឧទាហរណ៍ 2,4-D) និង Cytokinin (ឧទាហរណ៍ BA, TDZ) តាមរយៈឯកសារស្រាវជ្រាវនានា។
  2. រៀបចំឧបករណ៍ និងអនុវត្តការសម្លាប់មេរោគ: ហ្វឹកហាត់ប្រើប្រាស់ទូរបណ្តុះជាលិកា Laminar Flow Hood និងម៉ាស៊ីន Autoclave សម្រាប់ក្រៀវឧបករណ៍។ អនុវត្តការសម្លាប់មេរោគលើផ្ទៃស្លឹក និងចុងត្រួយ ដោយប្រើសូលុយស្យុង Sodium hypochlorite (១៥% រយៈពេល ១០នាទី និង ៥% រយៈពេល ៥នាទី) ដោយលាយជាមួយ Tween 20
  3. អនុវត្តការបណ្តុះកាឡឹសនិងត្រួយ: រៀបចំមជ្ឈដ្ឋានដោយបន្ថែមអ័រម៉ូន TDZ (4.0 mg/l) និង 2,4-D (0.1 mg/l) សម្រាប់បណ្តុះស្លឹកខ្ចី (ដើម្បីយកកាឡឹស) និងប្រើអ័រម៉ូន BA (4.0 mg/l) សម្រាប់បណ្តុះចុងត្រួយ រួចរក្សាទុកទូកែវក្នុងបន្ទប់ដែលមានពន្លឺ 1,000 lux និងសីតុណ្ហភាព 25±2 °C។
  4. តាមដាន និងវិភាគទិន្នន័យ: សង្កេតមើលការវិវឌ្ឍរៀងរាល់សប្តាហ៍រយៈពេល ៦ សប្តាហ៍ ដោយកត់ត្រាអត្រានៃការឆ្លងមេរោគ រូបរាងកាឡឹស និងរាប់ចំនួនត្រួយ។ បន្ទាប់មក ប្រើប្រាស់កម្មវិធីដូចជា Microsoft ExcelSPSS ដើម្បីវិភាគទិន្នន័យស្ថិតិប្រៀបធៀប (ANOVA និង DMRT) ដើម្បីរកមើលលទ្ធផលដែលល្អបំផុត។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
In vitro culture (ការបណ្តុះជាលិកាក្នុងកែវពិសោធន៍) ដំណើរការនៃការយកផ្នែកណាមួយរបស់រុក្ខជាតិ (ដូចជាស្លឹក ឬត្រួយ) ទៅបណ្តុះនៅក្នុងមជ្ឈដ្ឋានសិប្បនិម្មិតដែលមានសារធាតុចិញ្ចឹម និងអ័រម៉ូនគ្រប់គ្រាន់ ក្នុងលក្ខខណ្ឌដែលគ្មានមេរោគ ដើម្បីបង្កើតជារុក្ខជាតិថ្មីរាប់រយរាប់ពាន់ដើម។ ដូចជាការយកមែកឈើតូចមួយទៅដាំក្នុងទូកញ្ចក់ពិសេសដែលមានជីគ្រប់គ្រាន់ ដើម្បីឱ្យវាដុះជាដើមថ្មីយ៉ាងឆាប់រហ័ស និងគ្មានជំងឺ។
Callus (កាឡឹស) ការប្រមូលផ្តុំនៃកោសិការុក្ខជាតិដែលមិនទាន់ធ្វើការបែងចែកមុខងារច្បាស់លាស់ (undifferentiated cells) ដែលដុះចេញមកនៅត្រង់មុខរបួស ឬផ្នែកដែលត្រូវបានកាត់របស់រុក្ខជាតិ ពេលបណ្តុះក្នុងមជ្ឈដ្ឋានមានអ័រម៉ូន ដែលក្រោយមកវាអាចវិវត្តទៅជាឫស ឬត្រួយបាន។ ដូចជាសាច់ខ្ចីដែលដុះចេញមកពេលយើងមុតដៃ ដែលនៅពេលក្រោយវាអាចប្រែក្លាយទៅជាផ្នែកផ្សេងៗនៃរុក្ខជាតិនៅពេលយើងប្តូរជី។
Explant (ជាលិកាដើម ឬកោសិកាដើម) បំណែកតូចៗនៃរុក្ខជាតិ (ដូចជាចុងត្រួយ ស្លឹក ឬដើម) ដែលត្រូវបានកាត់យកមកប្រើប្រាស់ជាវត្ថុធាតុដើមសម្រាប់ចាប់ផ្តើមការបណ្តុះជាលិកានៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍។ ដូចជាគ្រាប់ពូជ ឬមែកតូចមួយដែលយើងកាត់យកមកផ្សាំដើម្បីដាំជាដើមថ្មី។
Plant growth regulators (អ័រម៉ូនលូតលាស់រុក្ខជាតិ) សារធាតុគីមី (ធម្មជាតិ ឬសិប្បនិម្មិត) ដែលត្រូវបានប្រើប្រាស់ក្នុងកំហាប់ទាបបំផុត ដើម្បីគ្រប់គ្រង និងជំរុញការលូតលាស់ ការបែងចែកកោសិកា ឬការកំណត់រូបរាងរបស់រុក្ខជាតិ (ដូចជាជំរុញឱ្យដុះឫស ឬដុះត្រួយ)។ ដូចជាវីតាមីន ឬថ្នាំប៉ូវដែលយើងញ៉ាំដើម្បីឱ្យរាងកាយលូតលាស់លឿន និងមានសុខภาพល្អ។
Thidiazuron / TDZ (អ័រម៉ូន ធីឌីអាហ្ស៊ុយរ៉ុង) ជាប្រភេទអ័រម៉ូនសិប្បនិម្មិតក្នុងក្រុម Cytokinin ដែលមានឥទ្ធិពលខ្លាំងក្លាក្នុងការជំរុញការបែងចែកកោសិកា និងការបង្កើតកាឡឹស (Callus) ក្នុងបច្ចេកទេសបណ្តុះជាលិកា ជាពិសេសសម្រាប់រុក្ខជាតិប្រភេទឈើខ្លឹម។ ដូចជាថ្នាំកម្លាំងពិសេសមួយប្រភេទដែលជួយឱ្យកោសិការុក្ខជាតិបំបែកខ្លួនបានយ៉ាងលឿនបង្កើតជាដុំសាច់ខ្ចី។
Benzyladenine / BA (អ័រម៉ូន បេនហ្ស៊ីលអាដេនីន) ជាអ័រម៉ូនលូតលាស់រុក្ខជាតិក្នុងក្រុម Cytokinin ដែលត្រូវបានប្រើប្រាស់យ៉ាងទូលំទូលាយនៅក្នុងការបណ្តុះជាលិកា ដើម្បីជំរុញការបែកមែក និងការលូតលាស់ត្រួយថ្មីៗជាច្រើនពីជាលិកាដើមតែមួយ។ ដូចជាជីពិសេសដែលជួយជំរុញឱ្យដើមឈើឆាប់បែកមែក និងចេញត្រួយថ្មីៗច្រើនក្នុងពេលតែមួយ។
Murashige and Skoog / MS medium (មជ្ឈដ្ឋានសារធាតុចិញ្ចឹម MS) ជារូបមន្តមជ្ឈដ្ឋានសារធាតុចិញ្ចឹមស្តង់ដារ (បង្កើតនៅឆ្នាំ១៩៦២) ដែលផ្ទុកទៅដោយសារធាតុរ៉ែ វីតាមីន អាស៊ីតអាមីណូ និងស្ករ ដែលត្រូវបានប្រើប្រាស់យ៉ាងទូលំទូលាយបំផុតសម្រាប់ការចិញ្ចឹមជាលិការុក្ខជាតិក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍។ ដូចជារូបមន្តទឹកដោះគោម្សៅដែលមានជីវជាតិគ្រប់គ្រាន់សម្រាប់ទារក (កោសិការុក្ខជាតិ) លូតលាស់បានយ៉ាងល្អ។
Surface Sterilization (ការសម្លាប់មេរោគលើផ្ទៃ) ដំណើរការនៃការប្រើប្រាស់សារធាតុគីមី (ដូចជា Sodium hypochlorite) ក្នុងរយៈពេលកំណត់ណាមួយ ដើម្បីកម្ចាត់បាក់តេរី និងផ្សិតដែលទុំជាប់នៅលើផ្ទៃខាងក្រៅនៃជាលិការុក្ខជាតិ មុននឹងយកវាទៅបណ្តុះក្នុងមជ្ឈដ្ឋានដើម្បីការពារការលូតលាស់របស់មេរោគ។ ដូចជាការលាងសម្អាតមុខរបួសដោយប្រើអាល់កុល ដើម្បីសម្លាប់មេរោគកុំឱ្យឆ្លងរោគមុនពេលរុំបង់។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖