Original Title: การชักนำให้เกิด embryogenic callus ในทุเรียนโดยวิธีเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ (Induction of Embryogenic Callus in Durian via Tissue Culture)
Source: doi.org/10.14456/thaidoa-agres.2001.4
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការជំរុញឱ្យមានកាលុសអំប្រ៊ីយ៉ុង (Embryogenic Callus) នៅក្នុងធូរេនតាមរយៈការបណ្តុះជាលិកា

ចំណងជើងដើម៖ การชักนำให้เกิด embryogenic callus ในทุเรียนโดยวิธีเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ (Induction of Embryogenic Callus in Durian via Tissue Culture)

អ្នកនិពន្ធ៖ Jaruwan Chartisathian (Plant Pathology and Microbiology Division, Department of Agriculture), Suphap Sunthranon (Chanthaburi Horticultural Research Center, Department of Agriculture), Hirun Hirunpradit

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2001, Thai Agricultural Research Journal

វិស័យសិក្សា៖ Plant Biotechnology

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ការស្រាវជ្រាវនេះដោះស្រាយបញ្ហានៃការបង្កើតកាលុសអំប្រ៊ីយ៉ុង (Embryogenic callus) សម្រាប់ការពង្រីកពូជធូរេន Durio zibethinus Murr. ប្រភេទម៉ាន់ថង តាមរយៈការបណ្តុះជាលិកា ដើម្បីជំនួសវិធីសាស្ត្របង្កាត់ពូជបែបប្រពៃណីដែលចំណាយពេលយូរ។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ ការសិក្សានេះបានធ្វើការពិសោធន៍លើអាយុរបស់គ្រាប់អូវុល (Ovule) និងប្រភេទនៃមជ្ឈដ្ឋានបណ្តុះ (Culture media) ផ្សេងៗគ្នា ដើម្បីស្វែងរកលក្ខខណ្ឌល្អបំផុតសម្រាប់ការជំរុញកាលុស។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Nu 5 Medium (Murashige & Trucker basal medium + malt extract + IAA + kinetin)
មជ្ឈដ្ឋាន Nu 5 (មជ្ឈដ្ឋានមូលដ្ឋាន Murashige & Trucker រួមជាមួយសារធាតុចម្រាញ់ Malt, IAA និង Kinetin)
មានប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់ក្នុងការជំរុញឱ្យមានការកកើតកាលុស (Callus) ដំបូងបានល្អ និងលឿន។ អាចជួយឱ្យកោសិការស់រានមានជីវិតបានច្រើន។ កាលុសដែលទទួលបានមានលក្ខណៈវិវត្តទៅជាអំប្រ៊ីយ៉ុង (Embryogenic callus) តិចជាងបើប្រៀបធៀបនឹងមជ្ឈដ្ឋាន MSN នៅដំណាក់កាលក្រោយ។ ស័ក្តិសមក្នុងការចាប់ផ្តើមបណ្តុះអូវុលអាយុ ១ ទៅ ៣ សប្តាហ៍ ដោយមានអត្រាបង្កើតកាលុសដំបូងបានល្អ។
MSN Medium (Murashige & Skoog basal medium + NAA)
មជ្ឈដ្ឋាន MSN (មជ្ឈដ្ឋានមូលដ្ឋាន Murashige & Skoog រួមជាមួយ NAA)
កាលុសដែលកើតមានរូបរាងជាគ្រាប់មូលៗ (Globular shape) ដែលជាលក្ខណៈច្បាស់លាស់នៃកាលុសអំប្រ៊ីយ៉ុង (Embryogenic callus)។ អត្រានៃការបង្កើតកាលុសដំបូងអាចមានកម្រិតទាបជាង Nu 5 បន្តិច។ ផ្តល់លទ្ធផលល្អបំផុតសម្រាប់ការបណ្តុះបន្ត (Subculture) រយៈពេលយូរ ដើម្បីបង្កើនបរិមាណកាលុសអំប្រ៊ីយ៉ុង។
Other Media (MTR, McN, DKW)
មជ្ឈដ្ឋានផ្សេងៗទៀត (MTR, McN, DKW)
អាចផ្តល់សារធាតុចិញ្ចឹមមូលដ្ឋានខ្លះៗដល់ការលូតលាស់របស់រុក្ខជាតិទូទៅ។ មិនមានសមត្ថភាពក្នុងការជំរុញឱ្យកើតកាលុសអំប្រ៊ីយ៉ុងសម្រាប់ធូរេននោះទេ ហើយធ្វើឱ្យអូវុលងាប់ក្នុងអត្រាខ្ពស់។ អូវុលប្រែជាពណ៌ត្នោត និងងាប់ស្ទើរតែទាំងអស់បន្ទាប់ពីការបណ្តុះបាន ៦ សប្តាហ៍។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការអនុវត្តបច្ចេកទេសនេះទាមទារការរៀបចំបន្ទប់ពិសោធន៍បណ្តុះជាលិកា (Tissue Culture Lab) ដែលមានបរិក្ខារស្តង់ដារ និងមានការគ្រប់គ្រងបរិស្ថានស្អាតគ្មានមេរោគបានយ៉ាងល្អ។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះត្រូវបានធ្វើឡើងនៅក្នុងប្រទេសថៃ ដោយផ្តោតសំខាន់ទៅលើធូរេនពូជម៉ាន់ថង និងធូរេនព្រៃ។ ទិន្នន័យនេះមានសារៈសំខាន់ខ្លាំងណាស់សម្រាប់ប្រទេសកម្ពុជា ដោយសារតែកម្ពុជាមានអាកាសធាតុស្រដៀងគ្នា ហើយក៏មានការនិយមដាំដុះធូរេនពូជម៉ាន់ថងដូចគ្នា ដែលធ្វើឱ្យលទ្ធផលនៃការស្រាវជ្រាវនេះអាចយកមកអនុវត្តផ្ទាល់បានយ៉ាងមានប្រសិទ្ធភាព។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

វិធីសាស្ត្រនៃការបណ្តុះជាលិកាធូរេននេះ គឺមានសក្តានុពលយ៉ាងខ្លាំងសម្រាប់វិស័យកសិកម្មនៅកម្ពុជា ពិសេសក្នុងការដោះស្រាយបញ្ហាជំងឺរុក្ខជាតិ និងការពន្លឿនការបង្កាត់ពូជ។

សរុបមក ការអនុវត្តបច្ចេកទេសបណ្តុះជាលិកានេះនឹងជួយពន្លឿនការផលិតពូជធូរេនប្រកបដោយគុណភាពខ្ពស់ និងគ្មានជំងឺ ដែលអាចជំរុញសក្តានុពលនៃការនាំចេញធូរេនរបស់កម្ពុជាទៅកាន់ទីផ្សារអន្តរជាតិ។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. រៀបចំបន្ទប់ពិសោធន៍ និងសម្ភារៈ (Setup Laboratory and Materials): រៀបចំបន្ទប់បណ្តុះជាលិកាដោយមានបំពាក់ Laminar Flow Hood រួចបញ្ជាទិញសារធាតុគីមីសម្រាប់លាយមជ្ឈដ្ឋាន Murashige & Skoog (MS), អាហ្គា, និងអ័រម៉ូនលូតលាស់ដូចជា NAA (1 mg/L) សម្រាប់លាយមជ្ឈដ្ឋាន MSN។
  2. ការប្រមូល និងសម្លាប់មេរោគលើកញ្ចុំផ្កា (Collection and Sterilization): ប្រមូលផ្កាធូរេន (ពូជម៉ាន់ថង ឬពូជក្នុងស្រុក) ដែលទើបរីកបានចន្លោះពី ៨ ទៅ ២០ ថ្ងៃ។ យកផ្កាទាំងនោះមកលាងសម្អាត និងសម្លាប់មេរោគដោយត្រាំក្នុងសូលុយស្យុង Clorox 20% រយៈពេល ២០ នាទី រួចលាងជម្រះដោយទឹកចម្រោះគ្មានមេរោគចំនួន ២ ដង។
  3. ការវះកាត់ និងបណ្តុះអូវុលលើមជ្ឈដ្ឋាន (Dissection and Culture): ធ្វើការវះកាត់យកគ្រាប់អូវុល (Ovule) ចេញពីផ្កាដោយប្រុងប្រយ័ត្នបំផុតក្រោមមីក្រូទស្សន៍ Stereo microscope ដើម្បីកុំឱ្យជាលិកាជាំ។ បន្ទាប់មក ដាក់បណ្តុះវាក្នុងដបដែលមានមជ្ឈដ្ឋាន MSN រួចរក្សាទុកក្នុងបន្ទប់ដែលមានពន្លឺភ្លើងហ្វ្លុយអូរេសង់ ១៦ ម៉ោង/ថ្ងៃ ក្នុងសីតុណ្ហភាព ២៥-២៧ អង្សាសេ។
  4. ការគ្រប់គ្រងការផ្លាស់ប្តូរមជ្ឈដ្ឋាន (Subculture Management): នេះជាជំហានដ៏សំខាន់បំផុត៖ ត្រូវផ្លាស់ប្តូរមជ្ឈដ្ឋានថ្មី (Subculture) រៀងរាល់ ៣ សប្តាហ៍ម្តងជាដាច់ខាត។ ការធ្វើបែបនេះគឺដើម្បីការពារកោសិការុក្ខជាតិពីការពុលដោយសារការបញ្ចេញសារធាតុ Phenolic compound ដែលជាសារធាតុពណ៌ត្នោតបញ្ចេញដោយជាលិកាធូរេន និងអាចសម្លាប់កាលុសបាន។
  5. ការតាមដាន និងការជំរុញឱ្យចេញជាកូនដើម (Monitoring and Regeneration): តាមដានការកកើតនៃ Embryogenic callus (កាលុសដែលមានរាងមូលៗដូចគ្រាប់ពងត្រី) ក្នុងរយៈពេលពី ៦ ទៅ ១២ សប្តាហ៍។ នៅពេលទទួលបានបរិមាណកាលុសគ្រប់គ្រាន់ សូមប្តូរទៅមជ្ឈដ្ឋានថ្មីដែលគ្មានអ័រម៉ូន (ឬអ័រម៉ូនកម្រិតទាប) ដើម្បីជំរុញឱ្យវាលូតលាស់ទៅជាកូនដើមធូរេន (Somatic Embryo)។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
embryogenic callus (កាលុសអំប្រ៊ីយ៉ុង) ជាលិកាកោសិការុក្ខជាតិដែលមិនទាន់មានទម្រង់ជារូបរាងដើម ស្លឹក ឬឫសច្បាស់លាស់ ប៉ុន្តែវាមានសក្តានុពល និងសមត្ថភាពខ្ពស់ក្នុងការវិវឌ្ឍទៅជាអំប្រ៊ីយ៉ុង (Somatic embryo) ដែលអាចដុះលូតលាស់ទៅជាកូនរុក្ខជាតិថ្មីមួយដើមពេញលេញបាន។ ដូចជាដុំដីឥដ្ឋដែលគេត្រៀមលាយទឹកកិនរួចជាស្រេច ដើម្បីយកទៅសូនជារូបរាងផ្សេងៗ (កូនរុក្ខជាតិ) តាមតម្រូវការ។
somatic embryogenesis (ការកកើតអំប្រ៊ីយ៉ុងពីកោសិការាងកាយ) ដំណើរការបច្ចេកទេសដែលកោសិការាងកាយធម្មតារបស់រុក្ខជាតិ (ដូចជាកោសិកាស្លឹក ដើម ឬអូវុល មិនមែនកោសិកាបន្តពូជ) ត្រូវបានជំរុញដោយអ័រម៉ូនឱ្យបង្កើតជាអំប្រ៊ីយ៉ុង ដែលអំប្រ៊ីយ៉ុងនោះអាចលូតលាស់ទៅជារុក្ខជាតិថ្មីដែលមានលក្ខណៈហ្សែនដូចដើមមេបេះបិទ។ ដូចជាការយកកោសិកាស្បែកមួយដុំទៅបណ្តុះឱ្យក្លាយជាទារកថ្មីម្នាក់ ដែលមានមុខមាត់ដូចម្ចាស់ស្បែកដើមបេះបិទ (ការក្លូន)។
ovule (អូវុល ឬ គ្រាប់ពូជមិនទាន់បង្កកំណើត) ផ្នែកតូចមួយដែលមានទីតាំងនៅខាងក្នុងកន្សោមផ្ការបស់រុក្ខជាតិ ដែលផ្ទុកកោសិកាស៊ុត ហើយនៅពេលដែលវាត្រូវបានបង្កកំណើតដោយលំអងឈ្មោល វានឹងវិវឌ្ឍទៅជាគ្រាប់ពូជ។ នៅក្នុងការស្រាវជ្រាវនេះ គេវះយកអូវុលខ្ចីៗទៅបណ្តុះដើម្បីបង្កើតកាលុស។ ដូចជាស៊ុតមាន់ដែលមិនទាន់ញាស់ ដែលរង់ចាំការបង្កកំណើត ឬលក្ខខណ្ឌសមស្របដើម្បីក្លាយជាកូនមាន់។
subculture (ការបណ្តុះបន្ត ឬ ការផ្លាស់ប្តូរមជ្ឈដ្ឋាន) ដំណើរការនៃការផ្ទេរកោសិការុក្ខជាតិ ឬកាលុសពីដបបណ្តុះចាស់ ទៅដាក់ក្នុងដបថ្មីដែលមានមជ្ឈដ្ឋានសារធាតុចិញ្ចឹមថ្មីៗ ដើម្បីឱ្យកោសិកាមានអាហារគ្រប់គ្រាន់ និងដើម្បីបញ្ចៀសការពុលដោយសារធាតុសំណល់ដែលវាបានបញ្ចេញចោលក្នុងដបចាស់។ ដូចជាការប្តូរទឹក និងផ្លាស់ប្តូរចំណីថ្មីនៅក្នុងអាងចិញ្ចឹមត្រី ដើម្បីឱ្យត្រីមានសុខភាពល្អ និងឆាប់ធំធាត់។
phenolic compound (សមាសធាតុ Phenolic) សារធាតុគីមីបន្ទាប់បន្សំដែលរុក្ខជាតិ (ជាពិសេសរុក្ខជាតិឈើហូបផ្លែដូចជាធូរេន) បញ្ចេញមកដើម្បីការពារខ្លួននៅពេលមានរបួស (ឧទាហរណ៍ ពេលគេវះកាត់យកអូវុល)។ នៅក្នុងការបណ្តុះជាលិកា សារធាតុនេះធ្វើឱ្យមជ្ឈដ្ឋានប្រែជាពណ៌ត្នោត និងបញ្ចេញជាតិពុលដែលអាចសម្លាប់កោសិកាដែលកំពុងបណ្តុះនោះបាន។ ដូចជាជ័រដែលហូរចេញពីសំបកដើមឈើពេលយើងកាប់វា ដែលអាចធ្វើឱ្យស្បែកយើងរមាស់ ឬពុលបើយើងប៉ះវាផ្ទាល់។
anthesis (ការរីកផ្កា) ដំណាក់កាលដែលផ្ការុក្ខជាតិបើកស្រទាប់របស់វាឡើងពេញលេញ និងបញ្ចេញកេសរត្រៀមខ្លួនរួចរាល់សម្រាប់ការផ្ទេរលំអង (ការបង្កកំណើត)។ អ្នកស្រាវជ្រាវរាប់អាយុរបស់អូវុលថាស័ក្តិសមឬអត់ ដោយគិតចាប់ពីថ្ងៃដែលផ្ការីកនេះឯង។ ដូចជាទ្វារហាងដែលបើកស្វាគមន៍ភ្ញៀវជាផ្លូវការ ដែលជាចំណុចចាប់ផ្តើមនៃការលក់ដូរ និងទទួលអតិថិជន។
basal medium (មជ្ឈដ្ឋានមូលដ្ឋាន) ល្បាយនៃសារធាតុចិញ្ចឹមចាំបាច់ (ដូចជាវីតាមីន សារធាតុខនិជ និងស្ករស៊ុយក្រូស) ដែលត្រូវបានរៀបចំឡើងជាទម្រង់ចាហួយ ឬរាវ សម្រាប់ទ្រទ្រង់ការលូតលាស់របស់កោសិកា និងជាលិការុក្ខជាតិនៅក្នុងបន្ទប់ពិសោធន៍។ ដូចជាដីសិប្បនិម្មិតដែលមានជីជាតិ និងមានទឹកគ្រប់គ្រាន់ សម្រាប់ឱ្យគ្រាប់ពូជដុះលូតលាស់នៅក្នុងផ្ទះកញ្ចក់យ៉ាងងាយស្រួល។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖