Original Title: Micropropagation and in vitro short-term storage of Globba sherwoodiana W.J. Kress & V. Gowda
Source: doi.org/10.34044/j.anres.2020.54.4.09
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការបន្តពូជដោយមីក្រូ (Micropropagation) និងការរក្សាទុកក្នុងកែវពិសោធន៍រយៈពេលខ្លី (In vitro short-term storage) នៃរុក្ខជាតិ Globba sherwoodiana W.J. Kress & V. Gowda

ចំណងជើងដើម៖ Micropropagation and in vitro short-term storage of Globba sherwoodiana W.J. Kress & V. Gowda

អ្នកនិពន្ធ៖ Kittikun Muktawapai (Department of Horticulture, Faculty of Agriculture, Kasetsart University, Thailand), Shermarl Wongchaochant (Department of Horticulture, Faculty of Agriculture, Kasetsart University, Thailand)

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2020, Agriculture and Natural Resources

វិស័យសិក្សា៖ Plant Tissue Culture

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ រុក្ខជាតិ Globba sherwoodiana គឺជារុក្ខជាតិផ្កាដ៏សំខាន់នៅប្រទេសថៃ ប៉ុន្តែការដាំដុះ និងការបន្តពូជតាមបែបប្រពៃណីមានភាពយឺតយ៉ាវ និងងាយឆ្លងជំងឺ ដែលទាមទារឱ្យមានបច្ចេកទេសបន្តពូជ និងរក្សាទុកក្នុងកែវពិសោធន៍ (In vitro) ដែលមានប្រសិទ្ធភាព។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ ការសិក្សានេះបានវាយតម្លៃទៅលើកម្រិតនៃអរម៉ូនលូតលាស់ និងកំហាប់ស្ករ (Sucrose) ផ្សេងៗគ្នា ដើម្បីស្វែងរកមជ្ឈដ្ឋានសមស្របសម្រាប់ការបន្តពូជដោយមីក្រូ ការរក្សាទុករយៈពេលខ្លី និងការវិភាគស្ថិរភាពសេនេទិច។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Micropropagation (Shoot Proliferation) using MS + 1 mg/L BA
ការបន្តពូជពន្លកដោយប្រើមជ្ឈដ្ឋាន MS លាយជាមួយអរម៉ូន BA កំហាប់ 1 mg/L
ជំរុញការលូតលាស់ពន្លកថ្មីបានយ៉ាងល្អ និងមានសុខភាពល្អ គ្មានរោគសញ្ញាខុសប្រក្រតី (Hyperhydricity)។ ប្រសិនបើប្រើកំហាប់ BA ខ្ពស់ពេក (>2 mg/L) នឹងធ្វើឱ្យពន្លកមានសភាពខុសប្រក្រតី (ស្លឹកលឿង ហើម មានជាតិទឹកច្រើន និងរួញស្លឹក)។ ជាមជ្ឈដ្ឋានដ៏ល្អបំផុតសម្រាប់ការបំបែកពន្លក ដោយទទួលបានពន្លកថ្មីរឹងមាំ។
Micropropagation (Root Induction) using MS + < 1 mg/L NAA
ការជំរុញការដុះឫសដោយប្រើមជ្ឈដ្ឋាន MS លាយជាមួយអរម៉ូន NAA កំហាប់ < 1 mg/L
ជួយឱ្យការដុះឫសមានភាពល្អប្រសើរ និងមានចំនួនឫសច្រើនប្រកបដោយសុខភាពល្អ។ ការប្រើកំហាប់ NAA ខ្ពស់ពេក (>2 mg/L) បណ្តាលឱ្យកកើតជាលិកា Callus និងមានចំនួនឫសខុសប្រក្រតី (ឫសខ្លីៗនិងតិច)។ កំហាប់ NAA ពី 0.5 ទៅ 1 mg/L ផ្តល់លទ្ធផលប្រវែងឫស និងចំនួនឫសដ៏ល្អបំផុតសម្រាប់ការលូតលាស់។
In vitro Short-Term Storage using MS + 10 g/L Sucrose
ការរក្សាទុកក្នុងកែវពិសោធន៍រយៈពេលខ្លី (១៨០ថ្ងៃ) លើមជ្ឈដ្ឋាន MS លាយស្ករ Sucrose 10 g/L
ជួយពន្យឺតការលូតលាស់ (Slow growth) ផ្តល់អត្រារស់រានខ្ពស់ក្រោយពេលបណ្តុះឡើងវិញ និងរក្សាស្ថិរភាពសេនេទិចបាន ១០០%។ រុក្ខជាតិអាចមានរោគសញ្ញាស្លឹកលឿងបន្តិចបន្តួចនៅគែមស្លឹកដោយសារកង្វះជាតិស្ករ តែវាមិនប៉ះពាល់ដល់ការរស់រានពេលបណ្តុះក្នុងមជ្ឈដ្ឋានថ្មីឡើយ។ រុក្ខជាតិអាចរក្សាទុកបានរយៈពេល ១៨០ថ្ងៃ ដោយមិនចាំបាច់ប្តូរមជ្ឈដ្ឋាន (Subculture) និងគ្មានបម្រែបម្រួលសេនេទិចអ្វីទាំងអស់នៅពេលយកទៅដាំឡើងវិញ។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការអនុវត្តបច្ចេកទេសនេះទាមទារឱ្យមានបន្ទប់ពិសោធន៍បណ្តុះជាលិការុក្ខជាតិស្តង់ដារ និងឧបករណ៍វិភាគម៉ូលេគុលសេនេទិចកម្រិតមូលដ្ឋាន។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះត្រូវបានធ្វើឡើងនៅក្នុងប្រទេសថៃ (សាកលវិទ្យាល័យកាសេតសាស្រ្ត និងសាកលវិទ្យាល័យម៉ែចូ) ដោយផ្តោតលើប្រភេទរុក្ខជាតិផ្កា Globba sherwoodiana (អំបូរខ្ញី) ក្នុងលក្ខខណ្ឌបន្ទប់ពិសោធន៍បិទជិត។ ទិន្នន័យនេះមានសារៈសំខាន់ខ្លាំងសម្រាប់ប្រទេសកម្ពុជា ដោយសារប្រទេសយើងមានអាកាសធាតុត្រូពិច និងមានប្រភេទរុក្ខជាតិអំបូរ Zingiberaceae ស្រដៀងគ្នាជាច្រើន ដែលអនុញ្ញាតឱ្យយើងអាចប្រកាន់យកបច្ចេកទេសនេះមកអនុវត្តបានដោយផ្ទាល់។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

បច្ចេកទេសបណ្តុះជាលិកា និងការរក្សាទុកនេះ គឺមានអត្ថប្រយោជន៍យ៉ាងធំធេងសម្រាប់វិស័យកសិកម្ម អាជីវកម្មផ្កា និងការអភិរក្សនៅកម្ពុជា។

ជារួម ការច្នៃប្រឌិត និងការអនុវត្តបច្ចេកទេសបណ្តុះជាលិកា និងការរក្សាទុកនេះ អាចជួយលើកកម្ពស់ផលិតកម្មផ្កាពាណិជ្ជកម្ម និងធានានូវការគ្រប់គ្រងធនធានសេនេទិករុក្ខជាតិនៅកម្ពុជាប្រកបដោយនិរន្តរភាព និងប្រសិទ្ធភាពសេដ្ឋកិច្ចខ្ពស់។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. រៀបចំបន្ទប់ពិសោធន៍ និងសម្ភារៈចាំបាច់: រៀបចំទិញ និងដំឡើងឧបករណ៍បណ្តុះជាលិកាសំខាន់ៗដូចជា Laminar Flow Hood, Autoclave, ភ្លើងបំភ្លឺ Cool daylight lamp, និងសារធាតុគីមីចិញ្ចឹម MS Medium នៅតាមសាលា ឬកសិដ្ឋាន។
  2. ការប្រមូល និងការសម្លាប់មេរោគលើគំរូរុក្ខជាតិ (Surface Sterilization): ជ្រើសរើសមើម ឬពន្លករុក្ខជាតិគោលដៅ លាងសម្អាតជាមួយទឹកស្អាត និងសម្លាប់មេរោគដោយប្រើអេតាណុល (70%) រយៈពេល ៣០វិនាទី និងទឹកអូសាវែល Clorox (20%) ជាមួយ Tween-20 រយៈពេល ៣០នាទី រួចកាត់យកពន្លកដែលស្អាតមកបណ្តុះ។
  3. ការបន្តពូជដោយមីក្រូ (Micropropagation Phase): សាកល្បងបណ្តុះពន្លកលើមជ្ឈដ្ឋាន MS medium ដែលមានបន្ថែមអរម៉ូន BA (1 mg/L) សម្រាប់ការបែកពន្លកថ្មី និងប្រើ NAA (<1 mg/L) ដើម្បីជម្រុញការដុះឫស ដោយរក្សាសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ប្រហែល 25ºC។
  4. ការអនុវត្តការរក្សាទុករយៈពេលយូរ (In Vitro Short-Term Storage): ដើម្បីសន្សំសំចៃពេលវេលា និងធនធាន ត្រូវផ្ទេរកូនរុក្ខជាតិទៅក្នុងមជ្ឈដ្ឋាន MS ដែលមានកំហាប់ស្ករ Sucrose ទាបត្រឹមតែ 10 g/L ដើម្បីពន្យឺតល្បឿនលូតលាស់ ដែលអនុញ្ញាតឱ្យរក្សាទុកបានដល់ទៅ ១៨០ថ្ងៃ (៦ខែ) ដោយមិនបាច់ប្តូរមជ្ឈដ្ឋានថ្មី (Subculture)។
  5. ការស្តារឡើងវិញ និងការត្រួតពិនិត្យសេនេទិច (Recovery and Genetic Fidelity): ក្រោយការរក្សាទុក ត្រូវផ្ទេរកូនរុក្ខជាតិមកមជ្ឈដ្ឋានធម្មតាវិញ និងប្រើប្រាស់បច្ចេកទេស PCR រួមជាមួយ ISSR markers ដើម្បីវិភាគ DNA របស់កូនរុក្ខជាតិ ធានាថាវាមិនមានបម្រែបម្រួលសេនេទិច (Somaclonal variation) មុនពេលបញ្ចេញយកទៅដាំក្នុងកសិដ្ឋានពិតប្រាកដ។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Micropropagation (ការបន្តពូជដោយមីក្រូ / ការបណ្តុះជាលិកា) ការបង្កើតកូនរុក្ខជាតិថ្មីរាប់ពាន់ដើមពីបំណែកជាលិកាតូចមួយ (ដូចជាចុងពន្លក ឬស្លឹក) នៅក្នុងមជ្ឈដ្ឋានសិប្បនិម្មិតដែលមានសារធាតុចិញ្ចឹម និងអរម៉ូនគ្រប់គ្រាន់ ព្រមទាំងត្រូវបានរក្សាទុកក្នុងលក្ខខណ្ឌគ្មានមេរោគ។ ដូចជាការយកមែកឈើមួយចំអាមទៅដាំ តែក្នុងករណីនេះគឺយកកោសិការុក្ខជាតិតូចមួយទៅបណ្តុះក្នុងដបកែវឱ្យក្លាយជាដើមរាប់ពាន់ដើម។
In vitro storage (ការរក្សាទុកក្នុងកែវពិសោធន៍) ការរក្សាទុកកូនរុក្ខជាតិក្នុងមជ្ឈដ្ឋានបណ្តុះជាលិកា (ក្នុងដបឬកែវ) ដោយបន្ថយល្បឿននៃការលូតលាស់របស់វា ដើម្បីសន្សំសំចៃទំហំ ពេលវេលា និងកាត់បន្ថយការដូរមជ្ឈដ្ឋានញឹកញាប់ (Subculture)។ ដូចជាការដាក់សត្វឱ្យដេកសន្លប់ក្នុងរដូវរងា (Hibernation) ដើម្បីសន្សំថាមពល និងពន្យារអាយុជីវិតរបស់វាក្នុងរយៈពេលយូរ។
Hyperhydricity (រោគសញ្ញាលើសជាតិទឹក ឬភាពខុសប្រក្រតីនៃជាលិកា) ស្ថានភាពខុសប្រក្រតីរបស់កូនរុក្ខជាតិក្នុងដបពិសោធន៍ ដែលធ្វើឱ្យស្លឹក ឬដើមរបស់វាហើម មានជាតិទឹកច្រើន ថ្លាដូចកញ្ចក់ និងទន់ខ្សោយ ដែលច្រើនបណ្តាលមកពីការប្រើអរម៉ូនច្រើនពេក ឬកង្វះខ្យល់ចេញចូល។ ដូចជាមនុស្សដែលហើមខ្លួនដោយសារចាល់ជាតិទឹកក្នុងខ្លួនច្រើនពេក ធ្វើឱ្យសុខភាពចុះខ្សោយ និងងាយនឹងស្លាប់។
Inter simple sequence repeats / ISSR markers (សញ្ញាសម្គាល់ម៉ូលេគុល ISSR) បច្ចេកទេសប្រើប្រាស់សញ្ញាសម្គាល់នៅលើខ្សែសេនេទិច (DNA) ដើម្បីពិនិត្យមើលថាតើកូនរុក្ខជាតិដែលបណ្តុះចេញមកមានលក្ខណៈសេនេទិចដូចបេះបិទទៅនឹងដើមមេរបស់វាដែរឬទេ បន្ទាប់ពីឆ្លងកាត់ការរក្សាទុករយៈពេលយូរ។ ដូចជាការធ្វើតេស្ត DNA របស់កូន ដើម្បីបញ្ជាក់ថាគេពិតជាកូនដែលមានតំណពូជដូចឪពុកម្តាយពិតប្រាកដមែន ដោយមិនមានការប្រែប្រួល។
Plant growth regulators / PGRs (អរម៉ូនគ្រប់គ្រងការលូតលាស់រុក្ខជាតិ) សារធាតុគីមីសិប្បនិម្មិត (ដូចជា BA សម្រាប់ពន្លក និង NAA សម្រាប់ឫស) ដែលត្រូវបានបន្ថែមទៅក្នុងមជ្ឈដ្ឋានចិញ្ចឹម ដើម្បីបញ្ជាឱ្យកោសិការុក្ខជាតិបំបែកខ្លួន ដុះពន្លកថ្មី ឬបញ្ចេញឫស ទៅតាមកំហាប់ដែលបានកំណត់។ ដូចជាថ្នាំប៉ូវដែលយើងឱ្យក្មេងញ៉ាំដើម្បីឱ្យឆាប់លូតកម្ពស់ ឬធាត់ តែនេះគឺសម្រាប់បញ្ជាឱ្យរុក្ខជាតិឆាប់ដុះពន្លក ឬឫស។
Somaclonal variation (បម្រែបម្រួលសេនេទិចកោសិកាលូតលាស់) ការប្រែប្រួលលក្ខណៈសេនេទិចដោយចៃដន្យដែលកើតឡើងលើកូនរុក្ខជាតិពេលកំពុងបណ្តុះក្នុងកែវពិសោធន៍ ដែលធ្វើឱ្យវាមានលក្ខណៈខុសពីដើមមេ ជារឿយៗបណ្តាលមកពីស្ត្រេសនៃការប្រើអរម៉ូន ឬការទុកចោលយូរពេក។ ដូចជាការថតចម្លងឯកសារ (Photocopy) ច្រើនដងពេក រួចម៉ាស៊ីនរអាក់រអួលធ្វើឱ្យអក្សរខ្លះបាត់ ឬព្រិលខុសពីច្បាប់ដើម។
Osmotic stress (ស្ត្រេសអូស្មូស ឬសម្ពាធអូស្មូស) ការបង្កើតសម្ពាធតាមរយៈការបង្កើនឬបន្ថយកំហាប់សារធាតុរលាយ (ដូចជាស្ករ Sucrose) ក្នុងមជ្ឈដ្ឋាន ដើម្បីកម្រិតការស្រូបយកទឹក និងសារធាតុចិញ្ចឹមរបស់រុក្ខជាតិ ដែលជួយពន្យឺតការលូតលាស់របស់វាសម្រាប់ការរក្សាទុក។ ដូចជាការប្រឡាក់ត្រីជាមួយអំបិល ដើម្បីទាញទឹកចេញពីសាច់ត្រី និងពន្យឺតការខូចគុណភាពរបស់វាទុកបានយូរ។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖