Original Title: Preparation and therapeutic biological activities of hydrolysate mixture produced from frog (Rana tigrina) skin using protease
Source: doi.org/10.34044/j.anres.2025.59.3.09
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការរៀបចំ និងសកម្មភាពជីវសាស្ត្រព្យាបាលនៃល្បាយអ៊ីដ្រូលីហ្សាត (Hydrolysate) ដែលផលិតចេញពីស្បែកកង្កែប (Rana tigrina) ដោយប្រើប្រាស់អង់ស៊ីមប្រូតេអាស (Protease)

ចំណងជើងដើម៖ Preparation and therapeutic biological activities of hydrolysate mixture produced from frog (Rana tigrina) skin using protease

អ្នកនិពន្ធ៖ Huyen Thi Tran (Institute Biotechnology and Food Technology, Industrial University of Ho Chi Minh City), Anh Thi Hoang Phan (Institute Biotechnology and Food Technology, Industrial University of Ho Chi Minh City), Tuan Huu Ngoc Nguyen (Department of Biochemistry - Medical Molecular Biology, Pham Ngoc Thach University of Medicine), Son Hoa Pham (Institute of Applied Materials Science, Vietnam Academy of Science and Technology), Nam Minh Nguyen (Center for Genetics and Reproductive Health, Vietnam National University HCMC)

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2025 Agriculture and Natural Resources

វិស័យសិក្សា៖ Biotechnology

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ការសិក្សានេះដោះស្រាយបញ្ហានៃការស្វែងរកប្រភពធម្មជាតិថ្មីៗ ដើម្បីចម្រាញ់យកប៉ិបទីតសកម្មជីវសាស្ត្រ (Bioactive peptides) សម្រាប់ប្រើប្រាស់ជាឱសថព្យាបាលជំងឺរំលាយអាហារ និងជំងឺលើសឈាម ដោយប្រើប្រាស់សំណល់ស្បែកកង្កែបធម្មជាតិដែលគេបោះបង់ចោល។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ អ្នកស្រាវជ្រាវបានប្រើប្រាស់ប្រតិកម្មអ៊ីដ្រូលីសដោយអង់ស៊ីម (Enzymatic hydrolysis) លើស្បែកកង្កែប រួចធ្វើការវាយតម្លៃសកម្មភាពជីវសាស្ត្រផ្សេងៗ និងប្រើប្រាស់វិធីសាស្ត្រធ្វើគំរូកុំព្យូទ័រ ដើម្បីសិក្សាពីអន្តរកម្មម៉ូលេគុលកម្រិតខ្ពស់។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Frog Skin Hydrolysate Mixture (HFS) vs. Spray-Dried Hydrolysate Powder (SHP)
ការប្រៀបធៀបរវាងល្បាយអ៊ីដ្រូលីហ្សាតពីស្បែកកង្កែប (HFS) និងទម្រង់ម្សៅសម្ងួត (SHP)
ទម្រង់ល្បាយ (HFS) រក្សាសកម្មភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្មបានយ៉ាងល្អ និងមានប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់ក្នុងការទប់ស្កាត់អង់ស៊ីម ACE ប្រសើរជាងទម្រង់ម្សៅ។ ការបំប្លែងទៅជាទម្រង់ម្សៅ (SHP) តាមរយៈម៉ាស៊ីនបាញ់សម្ងួតដោយមានលាយសារធាតុ Maltodextrin ធ្វើឱ្យសមត្ថភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្មធ្លាក់ចុះគួរឱ្យកត់សម្គាល់។ សកម្មភាពទប់ស្កាត់ DPPH របស់ HFS (IC50 = 69.15 mg/mL) គឺល្អជាង SHP (IC50 = 128.7 mg/mL)។
Molecular Docking: Peptide F1 vs. Captopril
ការធ្វើគំរូអន្តរកម្មម៉ូលេគុលកុំព្យូទ័រ៖ ប៉ិបទីតថ្មី F1 (TERGYSF) ប្រៀបធៀបនឹងឱសថ Captopril
ប៉ិបទីត F1 បង្កើតបានចំណងអ៊ីដ្រូសែនច្រើន និងមានអន្តរកម្ម Pi-alkyl ដែលជួយឱ្យការចងភ្ជាប់ជាមួយអង់ស៊ីម ACE មានភាពរឹងមាំខ្លាំងជាងឱសថគីមី។ លទ្ធផលនៃអន្តរកម្មនេះទើបតែបានបញ្ជាក់តាមរយៈប្រព័ន្ធកុំព្យូទ័រ (in silico) ប៉ុណ្ណោះ ដែលនៅទាមទារការធ្វើតេស្តសាកល្បងលើសត្វ ឬមនុស្សផ្ទាល់ (in vivo)។ ថាមពលចងភ្ជាប់របស់ប៉ិបទីត F1 គឺ -10.9 kcal/mol ដែលខ្លាំងជាងឱសថស្តង់ដារ Captopril ដែលមានត្រឹមតែ -5.4 kcal/mol។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការស្រាវជ្រាវនេះទាមទារឧបករណ៍មន្ទីរពិសោធន៍គីមី-ជីវសាស្ត្រកម្រិតខ្ពស់ និងកម្មវិធីកុំព្យូទ័រជំនាញ ដើម្បីវិភាគរចនាសម្ព័ន្ធប៉ិបទីត និងអន្តរកម្មម៉ូលេគុល។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះប្រើប្រាស់សំណល់ស្បែកកង្កែបប្រភេទ Rana tigrina ដែលប្រមូលពីកសិដ្ឋានចិញ្ចឹមក្នុងខេត្តដុងណៃ ប្រទេសវៀតណាម។ សមាសធាតុ និងគុណភាពនៃប៉ិបទីតអាចប្រែប្រួលទៅតាមលក្ខខណ្ឌអាកាសធាតុ ចំណី និងបរិស្ថាននៃការចិញ្ចឹមជាក់ស្តែង។ សម្រាប់ប្រទេសកម្ពុជា ទិន្នន័យនេះមានសារៈសំខាន់ និងងាយស្រួលប្រៀបធៀប ព្រោះកម្ពុជាមានការចិញ្ចឹមកង្កែបជាលក្ខណៈកសិដ្ឋាន និងមានលក្ខខណ្ឌអាកាសធាតុស្រដៀងគ្នាខ្លាំង។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

វិធីសាស្ត្រក្នុងការទាញយកប៉ិបទីតសកម្មជីវសាស្ត្រពីសំណល់សត្វនេះ ពិតជាមានសក្តានុពលខ្ពស់សម្រាប់ការស្រាវជ្រាវ និងឧស្សាហកម្មនៅប្រទេសកម្ពុជា។

ជារួម ការកែច្នៃសំណល់ស្បែកកង្កែបឱ្យទៅជាប៉ិបទីតសកម្មជីវសាស្ត្រ មិនត្រឹមតែជួយកាត់បន្ថយបញ្ហាបរិស្ថានប៉ុណ្ណោះទេ ថែមទាំងបើកផ្លូវសម្រាប់ការអភិវឌ្ឍឱសថ និងផលិតផលថែរក្សាសុខភាពបែបធម្មជាតិនៅកម្ពុជាផងដែរ។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. អនុវត្តបច្ចេកទេសបំបែកអង់ស៊ីម (Enzymatic Hydrolysis): ចាប់ផ្តើមស្វែងយល់ពីរបៀបប្រើប្រាស់អង់ស៊ីមដើម្បីបំបែកប្រូតេអ៊ីនទៅជាប៉ិបទីត ដោយអនុវត្តលើខ្នាតតូចជាមួយសំណល់កសិកម្មក្នុងស្រុក ដោយស្វែងរកអត្រា Enzyme-to-Substrate (E:S) ratio និង pH ដែលស័ក្តិសមបំផុត។
  2. ការវាយតម្លៃសកម្មភាពជីវសាស្ត្រ (Bioactivity Assays): អនុវត្តការធ្វើតេស្តនៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ដើម្បីវាស់ស្ទង់សមត្ថភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្ម ដោយប្រើវិធីសាស្ត្រ DPPH និង ABTS scavenging assays និងរៀនគណនាតម្លៃ IC50
  3. ប្រើប្រាស់កម្មវិធីកុំព្យូទ័រគីមីវិទ្យា (Computational Chemistry): ដំឡើង និងរៀនប្រើប្រាស់កម្មវិធីឥតគិតថ្លៃដូចជា AutoDock Vina និង PyMOL ដើម្បីធ្វើការក្លែងធ្វើអន្តរកម្មម៉ូលេគុល (Molecular docking) រវាងប៉ិបទីត និងប្រូតេអ៊ីនគោលដៅ (ឧ. អង់ស៊ីម ACE)។
  4. សិក្សាពីការវិភាគកម្រិតខ្ពស់ដោយឧបករណ៍ (Instrumental Analysis): រៀនសូត្រពីមូលដ្ឋានគ្រឹះនៃការពន្យល់ទិន្នន័យ (Data interpretation) ដែលទទួលបានពីម៉ាស៊ីន HPLC-MS/MS ពីព្រោះវាជាគន្លឹះសំខាន់បំផុតក្នុងការទាញរកលំដាប់អាស៊ីតអាមីណូរបស់ប៉ិបទីតថ្មីៗ។
  5. ការសាកល្បងរក្សាគុណភាពផលិតផល (Product Formulation): សាកល្បងបំប្លែងល្បាយអ៊ីដ្រូលីហ្សាតទៅជាទម្រង់ម្សៅដោយប្រើម៉ាស៊ីន Spray Dryer ដោយបន្ថែមសារធាតុរក្សាស្ថិរភាព (ដូចជា Maltodextrin) រួចធ្វើតេស្តប្រៀបធៀបសកម្មភាពជីវសាស្ត្រឡើងវិញ។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Hydrolysate (អ៊ីដ្រូលីហ្សាត) ល្បាយនៃសមាសធាតុដែលទទួលបានពីការបំបែកម៉ូលេគុលធំៗ (ដូចជាប្រូតេអ៊ីន) ទៅជាម៉ូលេគុលតូចៗ (ប៉ិបទីត ឬអាស៊ីតអាមីណូ) ដោយប្រើប្រាស់អង់ស៊ីម ឬសារធាតុគីមីរួមជាមួយទឹក។ នៅក្នុងការសិក្សានេះ គឺការបំបែកប្រូតេអ៊ីនស្បែកកង្កែបដើម្បីទាញយកសារធាតុមានប្រយោជន៍។ ដូចជាការកាត់ខ្សែសង្វាក់វែងមួយ ទៅជាកង់ខ្លីៗជាច្រើន ដើម្បីងាយស្រួលយកទៅប្រើប្រាស់។
Enzymatic hydrolysis (ប្រតិកម្មអ៊ីដ្រូលីសដោយអង់ស៊ីម) ដំណើរការនៃការប្រើប្រាស់អង់ស៊ីម (ដូចជាប្រូតេអាស) ដើម្បីពន្លឿនការផ្តាច់ចំណងគីមីនៅក្នុងម៉ូលេគុលប្រូតេអ៊ីនដោយមានវត្តមានទឹក ធ្វើឱ្យប្រូតេអ៊ីនធំៗក្លាយជាប៉ិបទីតតូចៗដែលរាងកាយងាយស្រូបយក និងមានសកម្មភាពជីវសាស្ត្រ។ ដូចជាការប្រើកន្ត្រៃ (អង់ស៊ីម) ដើម្បីកាត់សាច់ក្រណាត់ធំមួយ (ប្រូតេអ៊ីន) ឱ្យទៅជាបំណែកតូចៗ (ប៉ិបទីត) ក្នុងទឹករំអិល។
Angiotensin I-converting enzyme (ACE) inhibitory activity (សកម្មភាពទប់ស្កាត់អង់ស៊ីម ACE) សមត្ថភាពនៃសារធាតុណាមួយក្នុងការរារាំងដំណើរការរបស់អង់ស៊ីម ACE ដែលជាអង់ស៊ីមធ្វើឱ្យសរសៃឈាមរួមតូចនិងបង្កើនសម្ពាធឈាម។ ការទប់ស្កាត់អង់ស៊ីមនេះជួយបញ្ចុះសម្ពាធឈាម និងព្យាបាលជំងឺលើសឈាម។ ដូចជាការដាក់ដុំថ្មទប់ទ្វារទឹកកុំឱ្យហូរខ្លាំងពេក ដើម្បីការពារកុំឱ្យបំពង់ទឹក (សរសៃឈាម) ផ្ទុះដោយសារសម្ពាធទឹកខ្លាំង។
Molecular docking (ការធ្វើគំរូអន្តរកម្មម៉ូលេគុលតាមកុំព្យូទ័រ) បច្ចេកទេសក្លែងធ្វើតាមប្រព័ន្ធកុំព្យូទ័រ (In silico) ដើម្បីទស្សន៍ទាយពីរបៀបដែលម៉ូលេគុលពីរ (ឧទាហរណ៍៖ ប៉ិបទីត និងអង់ស៊ីម ACE) អាចផ្សំនិងចងភ្ជាប់គ្នា និងគណនាពីកម្រិតនៃភាពរឹងមាំនៃចំណងនោះមុននឹងធ្វើការពិសោធន៍ពិតប្រាកដ។ ដូចជាការសាកល្បងផ្គុំបំណែកល្បែងរូបផ្គុំ (Puzzle) នៅក្នុងកុំព្យូទ័រ ដើម្បីមើលថាតើបំណែកណាដែលស៊ីគ្នាឥតខ្ចោះមុននឹងយកទៅផ្គុំមែនទែន។
Bioactive peptides (ប៉ិបទីតសកម្មជីវសាស្ត្រ) បំណែកប្រូតេអ៊ីនខ្លីៗដែលផ្សំឡើងពីអាស៊ីតអាមីណូ ដែលមិនត្រឹមតែផ្តល់សារធាតុចិញ្ចឹមប៉ុណ្ណោះទេ តែមានមុខងារពិសេសជួយដល់សុខភាពរាងកាយ ដូចជាប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្ម បន្ថយសម្ពាធឈាម ឬសម្លាប់មេរោគ។ ដូចជាកងកម្លាំងពិសេសតូចៗ ដែលត្រូវបានបញ្ជូនចូលទៅក្នុងរាងកាយ ដើម្បីបំពេញបេសកកម្មជាក់លាក់ក្នុងការការពារនិងជួសជុលកោសិកា។
Radical scavenging activity (សកម្មភាពប្រឆាំងរ៉ាឌីកាល់សេរី) សមត្ថភាពរបស់សារធាតុណាមួយ (Antioxidants) ក្នុងការចាប់យក និងបន្សាបរ៉ាឌីកាល់សេរី (ម៉ូលេគុលអស្ថិរភាពដែលបំផ្លាញកោសិកា) ដើម្បីការពារកុំឱ្យមានការខូចខាតដល់កោសិការាងកាយ និងទប់ស្កាត់ភាពចាស់មុនវ័យ។ ដូចជាអ្នកពន្លត់អគ្គិភ័យ ដែលប្រញាប់ទៅពន្លត់ភ្លើង (រ៉ាឌីកាល់សេរី) មុនពេលវាឆេះរាលដាលបំផ្លាញផ្ទះ (កោសិកា)។
Cytotoxicity (ភាពពុលដល់កោសិកា) កម្រិតនៃការធ្វើឱ្យខូចខាត ឬសម្លាប់កោសិកាធម្មតាដោយសារសារធាតុគីមី ឬសមាសធាតុណាមួយ។ នៅក្នុងការសិក្សានេះ គេធ្វើតេស្តដើម្បីធានាថាប៉ិបទីតពីស្បែកកង្កែបមិនមានជាតិពុលដល់កោសិកាមនុស្ស (HS 68 cells) ឡើយ។ ដូចជាការធ្វើតេស្តសាកល្បងថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតនៅលើរុក្ខជាតិ ដើម្បីពិនិត្យមើលថាវាមិនធ្វើឱ្យរុក្ខជាតិងាប់ តែសម្លាប់ត្រឹមតែដង្កូវប៉ុណ្ណោះ។
HPLC-MS/MS (ម៉ាស៊ីនវិភាគក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីរាវ និងម៉ាសស្ប៉ិច) បច្ចេកវិទ្យាឧបករណ៍វិភាគកម្រិតខ្ពស់ដែលរួមបញ្ចូលគ្នានូវការបំបែកសមាសធាតុគីមី (HPLC) និងការវាស់ម៉ាសម៉ូលេគុលដើម្បីកំណត់អត្តសញ្ញាណ និងអានលំដាប់នៃអាស៊ីតអាមីណូរបស់ប៉ិបទីតថ្មីៗឱ្យបានច្បាស់លាស់។ ដូចជាម៉ាស៊ីនស្កេនទំនិញទំនើបនៅក្នុងរោងចក្រ ដែលអាចបំបែកប្រភេទផ្លែឈើ ហើយថ្លឹងទម្ងន់ព្រមទាំងប្រាប់ឈ្មោះផ្លែឈើនីមួយៗបានយ៉ាងត្រឹមត្រូវ។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖