Original Title: Identification of dipeptidyl peptidase IV inhibitory peptides derived from gac seed protein hydrolysate using hydrophilic interaction liquid chromatography and reversed-phase high-performance liquid chromatography
Source: doi.org/10.34044/j.anres.2022.56.4.19
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការកំណត់អត្តសញ្ញាណប៉ិបទីតរារាំងអង់ស៊ីម Dipeptidyl peptidase IV ដែលទទួលបានពីអ៊ីដ្រូលីសាតប្រូតេអ៊ីនគ្រាប់ហ្គាក់ (Gac seed) ដោយប្រើប្រាស់ក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីអង្គធាតុរាវអន្តរកម្មអ៊ីដ្រូហ្វីលីក និងក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីអង្គធាតុរាវកម្រិតខ្ពស់ដំណាក់កាលបញ្ច្រាស

ចំណងជើងដើម៖ Identification of dipeptidyl peptidase IV inhibitory peptides derived from gac seed protein hydrolysate using hydrophilic interaction liquid chromatography and reversed-phase high-performance liquid chromatography

អ្នកនិពន្ធ៖ Samuchaya Ngamsuk (Kasetsart University), Jue-Liang Hsu (National Pingtung University of Science and Technology)

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2022 (Agriculture and Natural Resources)

វិស័យសិក្សា៖ Food Chemistry

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ អត្ថបទនេះសិក្សាពីសក្តានុពលនៃប្រូតេអ៊ីនគ្រាប់ហ្គាក់ (Gac seeds) ក្នុងការបង្កើតជាអាហារមុខងារសម្រាប់ជួយព្យាបាលជំងឺទឹកនោមផ្អែមប្រភេទទី២ តាមរយៈការរារាំងសកម្មភាពរបស់អង់ស៊ីម Dipeptidyl peptidase IV (DPPIV)។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ ការសិក្សានេះបានវាយតម្លៃសកម្មភាពរារាំងអង់ស៊ីម DPPIV ដោយប្រើប្រាស់វិធីសាស្ត្រចម្រាញ់និងបំបែកប៉ិបទីតជីវសកម្មជាច្រើនដំណាក់កាលរួមបញ្ចូលគ្នា។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
HILIC (Hydrophilic interaction liquid chromatography)
ក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីអង្គធាតុរាវអន្តរកម្មអ៊ីដ្រូហ្វីលីក
មានសមត្ថភាពខ្ពស់ក្នុងការបំបែកសមាសធាតុប៉ូលែរដោយប្រើប្រព័ន្ធបំបែកអ៊ីដ្រូហ្វីលីកបានល្អជាងវិធីសាស្ត្រធម្មតា។ អាចមានការលាយឡំនូវប៉ិបទីតអ៊ីដ្រូហ្វូប៊ីក (hydrophobic) និងអ៊ីដ្រូហ្វីលីក (hydrophilic) ខ្លះៗនៅក្នុងប្រភាគតែមួយដោយសារតែការប្រើប្រាស់សារធាតុរំលាយសរីរាង្គ។ ប្រភាគ HILIC-70% Acetonitrile មានសកម្មភាពរារាំងអង់ស៊ីម DPPIV ខ្ពស់ជាងគេបំផុត ដោយមានតម្លៃ IC50 ស្មើនឹង 1,071 µg/mL។
RP-HPLC (Reversed-phase high-performance liquid chromatography)
ក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីអង្គធាតុរាវកម្រិតខ្ពស់ដំណាក់កាលបញ្ច្រាស
ជួយបំបែកប្រភាគដែលទទួលបានពី HILIC ឱ្យកាន់តែសុទ្ធល្អ និងមានប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់ក្នុងការស្រង់យកប៉ិបទីតសកម្មចុងក្រោយ។ ត្រូវការបរិក្ខារទំនើប ពេលវេលា និងការប្រើប្រាស់សារធាតុរំលាយគីមីច្រើន។ បានបំបែកប្រភាគ HILIC បន្ថែមជា ១៤ ប្រភាគតូចៗ ដែលក្នុងនោះប្រភាគ F6, F8 និង F13 មានសកម្មភាពរារាំងអង់ស៊ីម DPPIV ខ្ពស់បំផុត។
LC-MS/MS & Molecular Docking
ការវិភាគម៉ាសស្ប៉ិចត្រូវម៉ែត្រ និងការក្លែងធ្វើអន្តរកម្មម៉ូលេគុល
អាចកំណត់អត្តសញ្ញាណរចនាសម្ព័ន្ធលំដាប់អាស៊ីតអាមីណូរបស់ប៉ិបទីត និងទស្សន៍ទាយពីអន្តរកម្មរបស់វាជាមួយអង់ស៊ីមគោលដៅបានយ៉ាងច្បាស់លាស់។ ទាមទារមូលដ្ឋានទិន្នន័យជីវព័ត៌មានវិទ្យា (Bioinformatics) កម្មវិធីកុំព្យូទ័រ និងអ្នកជំនាញកម្រិតខ្ពស់ក្នុងការវិភាគលទ្ធផល។ កំណត់បានប៉ិបទីត DGSL ដែលមានថាមពលអន្តរកម្ម CDOCKER ទាបបំផុត (-67.3806 KJ/mol) បង្ហាញពីសក្តានុពលខ្ពស់បំផុតក្នុងការចាប់យកនិងរារាំង DPPIV។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការសិក្សានេះទាមទារនូវឧបករណ៍វិភាគក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍កម្រិតខ្ពស់ សារធាតុគីមី និងចំណេះដឹងផ្នែកជីវព័ត៌មានវិទ្យាយ៉ាងស៊ីជម្រៅ។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះត្រូវបានធ្វើឡើងដោយប្រើប្រាស់គ្រាប់ហ្គាក់ (Momordica cochinchinensis) ដែលប្រមូលបានពីកាកសំណល់រោងចក្រទឹកផ្លែឈើនៅទីក្រុង Pingtung កោះតៃវ៉ាន់។ កម្រិតជីវសកម្មនៃប្រូតេអ៊ីននៅក្នុងគ្រាប់អាចមានការប្រែប្រួលអាស្រ័យលើពូជហ្គាក់ លក្ខខណ្ឌអាកាសធាតុ និងដីដាំដុះ ដែលចំណុចនេះតម្រូវឱ្យមានការសិក្សាផ្ទៀងផ្ទាត់បន្ថែមលើគ្រាប់ហ្គាក់ដែលដាំដុះនៅក្នុងប្រទេសកម្ពុជា ដើម្បីធានាបាននូវប្រសិទ្ធភាពដូចគ្នាមុននឹងយកមកផលិត។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

វិធីសាស្ត្រ និងលទ្ធផលនៃការសិក្សានេះមានសារៈសំខាន់ និងអាចយកមកអនុវត្តបាននៅក្នុងវិស័យកសិ-ឧស្សាហកម្ម និងការស្រាវជ្រាវនៅកម្ពុជា។

ជារួម ការសិក្សានេះបើកផ្លូវសម្រាប់ការទាញយកអត្ថប្រយោជន៍ពីកសិផលក្នុងស្រុក ដើម្បីបង្កើតជាអាហារសុខភាព ដែលអាចជួយកាត់បន្ថយការពឹងផ្អែកលើការនាំចូលឱសថ និងផលិតផលអាហារបំប៉នពីបរទេស។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. សិក្សាពីមូលដ្ឋានគ្រឹះនៃការចម្រាញ់ប្រូតេអ៊ីន: និស្សិតត្រូវស្វែងយល់ពីបច្ចេកទេសទាញយកប្រូតេអ៊ីនពីរុក្ខជាតិ និងការធ្វើអ៊ីដ្រូលីសដោយប្រើអង់ស៊ីម (Enzymatic Hydrolysis) ដូចជា Pepsin និង Trypsin ដើម្បីកាត់ផ្តាច់ប្រូតេអ៊ីនជាប៉ិបទីតតូចៗ។
  2. រៀនប្រើប្រាស់បច្ចេកទេសក្រូម៉ាតូក្រាហ្វី: ស្វែងយល់ពីទ្រឹស្តី និងអនុវត្តជាក់ស្តែងនូវការប្រើប្រាស់ឧបករណ៍បំបែកសារធាតុ ដូចជា SPE, HILIC និង RP-HPLC ដើម្បីចម្រាញ់យកប៉ិបទីតឱ្យបានសុទ្ធល្អ និងផ្តصلជាប្រភាគតូចៗ។
  3. អនុវត្តការវិភាគជីវព័ត៌មានវិទ្យា: រៀនអាន និងវិភាគទិន្នន័យពីម៉ាស៊ីនម៉ាសស្ប៉ិចត្រូវម៉ែត្រ (LC-MS/MS) ក៏ដូចជាការប្រើប្រាស់មូលដ្ឋានទិន្នន័យអនឡាញដូចជា BIOPEP-UWM ដើម្បីទស្សន៍ទាយពីសកម្មភាពជីវសាស្ត្ររបស់ប៉ិបទីតដែលរកឃើញ។
  4. អនុវត្តការក្លែងធ្វើអន្តរកម្មម៉ូលេគុល: ដំឡើង និងរៀនប្រើប្រាស់កម្មវិធីកុំព្យូទ័រ ដូចជា Discovery StudioAutoDock Vina ដើម្បីសិក្សា និងក្លែងធ្វើអន្តរកម្មរវាងប៉ិបទីត និងអង់ស៊ីមគោលដៅ (DPPIV) ក្នុងកម្រិតម៉ូលេគុល (Molecular Docking)។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Dipeptidyl peptidase IV (អង់ស៊ីម Dipeptidyl peptidase IV) ជាអង់ស៊ីមនៅក្នុងរាងកាយដែលមានតួនាទីបំបែកអរម៉ូន Incretin (ដូចជា GLP-1 និង GIP) ដែលជាអ្នកជំរុញការផលិតអាំងស៊ុយលីន។ ការរារាំងអង់ស៊ីមនេះជួយឱ្យរាងកាយរក្សាអាំងស៊ុយលីនបានល្អ ដែលមានប្រយោជន៍ក្នុងការព្យាបាលជំងឺទឹកនោមផ្អែមប្រភេទទី២។ ដូចជាអ្នកបោសសម្អាតដែលតែងតែយកសំបុត្របញ្ជាឱ្យផលិតអាំងស៊ុយលីនទៅចោល។ បើយើងឃាត់អ្នកបោសសម្អាតនេះ សំបុត្រនឹងនៅសល់ ដែលធ្វើឱ្យរាងកាយអាចផលិតអាំងស៊ុយលីនបានគ្រប់គ្រាន់។
Hydrophilic interaction liquid chromatography (ក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីអង្គធាតុរាវអន្តរកម្មអ៊ីដ្រូហ្វីលីក) ជាបច្ចេកទេសបំបែកសមាសធាតុគីមីចេញពីល្បាយ ដោយពឹងផ្អែកលើកម្រិតនៃភាពទាក់ទាញទឹក (Hydrophilic) របស់វា។ វាត្រូវបានប្រើប្រាស់ដើម្បីចម្រាញ់យកប៉ិបទីតដែលចូលចិត្តទឹកចេញពីអ៊ីដ្រូលីសាតប្រូតេអ៊ីន។ ដូចជាការប្រើប្រាស់មេដែកដើម្បីស្រូបទាញយកតែដែកចេញពីគំនរខ្សាច់ ដោយពឹងផ្អែកលើកម្រិតនៃការទាក់ទាញរបស់វា។
Reversed-phase high-performance liquid chromatography (ក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីអង្គធាតុរាវកម្រិតខ្ពស់ដំណាក់កាលបញ្ច្រាស) ជាវិធីសាស្ត្របំបែកម៉ូលេគុលកម្រិតខ្ពស់ដោយផ្អែកលើលក្ខណៈមិនចូលចិត្តទឹក (Hydrophobic) របស់វា។ ម៉ូលេគុលដែលមិនចូលចិត្តទឹកខ្លាំងនឹងត្រូវជាប់ក្នុងម៉ាស៊ីនយូរជាងម៉ូលេគុលដែលចូលចិត្តទឹក។ ដូចជាការរត់ប្រណាំងលើផ្លូវដែលមានភក់ អ្នកណាដែលចូលចិត្តភក់នឹងរត់យឺតជាងនិងទៅដល់គោលដៅក្រោយអ្នកដែលមិនចូលចិត្តភក់។
Liquid chromatography-tandem mass spectrometry (ក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីអង្គធាតុរាវភ្ជាប់ជាមួយម៉ាសស្ប៉ិចត្រូវម៉ែត្រ) ជាបច្ចេកវិទ្យាវិភាគគីមីកម្រិតខ្ពស់ដែលរួមបញ្ចូលគ្នានូវការបំបែកសារធាតុរាវ (LC) និងការវាស់ម៉ាសរ៉ាឌីកាល់ (MS/MS) ដើម្បីកំណត់អត្តសញ្ញាណ និងរចនាសម្ព័ន្ធលំដាប់អាស៊ីតអាមីណូរបស់ប៉ិបទីតនីមួយៗបានយ៉ាងច្បាស់លាស់។ ដូចជាម៉ាស៊ីនស្កេនទំនិញនៅផ្សារទំនើប ដែលដំបូងវាបំបែកទំនិញជាជួរ រួចថ្លឹងទម្ងន់និងស្កេនកូដដើម្បីដឹងច្បាស់ថាវាជាទំនិញអ្វី។
Molecular docking (ការក្លែងធ្វើអន្តរកម្មម៉ូលេគុល) ជាការប្រើប្រាស់កម្មវិធីកុំព្យូទ័រដើម្បីក្លែងធ្វើ និងទស្សន៍ទាយពីរបៀបដែលម៉ូលេគុលតូចៗ (ដូចជាប៉ិបទីត) អាចចូលទៅចាប់ និងធ្វើអន្តរកម្មជាមួយប្រូតេអ៊ីនគោលដៅ (ដូចជាអង់ស៊ីម DPPIV) ក្នុងកម្រិតម៉ូលេគុល ថាតើវាមានថាមពលចាប់ជាប់កម្រិតណា។ ដូចជាការប្រើកម្មវិធីកុំព្យូទ័រដើម្បីល្បងផ្គុំកូនសោនិងមេសោរមើលថាតើវាស៊ីគ្នាឬអត់ មុននឹងសម្រេចចិត្តយកដែកមកច្នៃជាសោពិតប្រាកដ។
Enzymatic hydrolysis (ការធ្វើអ៊ីដ្រូលីសដោយប្រើអង់ស៊ីម) ជាដំណើរការប្រើប្រាស់អង់ស៊ីមរំលាយអាហារ (ដូចជា Pepsin, Trypsin) ដើម្បីកាត់ផ្តាច់ខ្សែសង្វាក់ប្រូតេអ៊ីនធំៗនៅក្នុងគ្រាប់ហ្គាក់ ឱ្យក្លាយទៅជាកម្ទេចប៉ិបទីតតូចៗ (Peptides) ដែលមានសកម្មភាពជីវសាស្ត្រ។ ដូចជាការប្រើកន្ត្រៃកាត់ខ្សែពួរដ៏វែងមួយ ឱ្យទៅជាកង់តូចៗជាច្រើន ដើម្បីងាយស្រួលយកទៅចងឬប្រើប្រាស់ក្នុងគោលបំណងផ្សេងៗបាន។
Bioactive peptides (ប៉ិបទីតជីវសកម្ម) ជាខ្សែសង្វាក់អាស៊ីតអាមីណូខ្លីៗដែលទទួលបានពីការបំបែកប្រូតេអ៊ីន ដែលពួកវាមានសមត្ថភាពផ្តល់ផលវិជ្ជមានដល់សុខភាព (ដូចជារារាំងអង់ស៊ីម បញ្ចុះសម្ពាធឈាម ឬប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្ម) នៅពេលដែលវាត្រូវបានស្រូបចូលទៅក្នុងរាងកាយ។ ដូចជាគ្រាប់ថ្នាំដែលលាក់ខ្លួនក្នុងចំណីអាហារ ដែលវានឹងបញ្ចេញឥទ្ធិពលព្យាបាលនៅពេលដែលក្រពះរំលាយអាហារនោះរួចរាល់។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖