Original Title: Hematological and phylogenetic studies of Leucocytozoon spp. in backyard chickens and fighting cocks around Kamphaeng Saen, Thailand
Source: doi.org/10.34044/j.anres.2020.54.6.04
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការសិក្សាពីឈាមវិទ្យា និងការវិវត្តពូជសាសន៍នៃ Leucocytozoon spp. លើមាន់ស្រុក និងមាន់ជល់នៅជុំវិញតំបន់ Kamphaeng Saen ប្រទេសថៃ

ចំណងជើងដើម៖ Hematological and phylogenetic studies of Leucocytozoon spp. in backyard chickens and fighting cocks around Kamphaeng Saen, Thailand

អ្នកនិពន្ធ៖ Panjaporn Prasopsom (Department of Pathology, Faculty of Veterinary Medicine, Kasetsart University), Chaleow Salakij (Department of Pathology, Faculty of Veterinary Medicine, Kasetsart University), Preeda Lertwatcharasarakul, Pornchai Pornpranom

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2020 (Agriculture and Natural Resources)

វិស័យសិក្សា៖ Veterinary Medicine

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ការឆ្លងប៉ារ៉ាស៊ីត Leucocytozoon លើសត្វមាន់គឺមានជាទូទៅនៅក្នុងប្រទេសថៃ ប៉ុន្តែការសិក្សាទាក់ទងនឹងការប្រែប្រួលឈាមវិទ្យា និងការវិភាគម៉ូលេគុលហ្សែននៅមានកម្រិតនៅឡើយ។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ សំណាកឈាមត្រូវបានយកមកវិភាគតាមរយៈការរាប់គ្រាប់ឈាមសរុប ការពិនិត្យដោយមីក្រូទស្សន៍ និងបច្ចេកទេស PCR សម្រាប់ការវិភាគការវិវត្តពូជសាសន៍។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Microscopic Examination (Blood Smear)
ការពិនិត្យតាមមីក្រូទស្សន៍ (ការលាបឈាមលើកញ្ចក់)
អាចពិនិត្យមើលរូបរាង និងទម្រង់របស់ប៉ារ៉ាស៊ីតដោយផ្ទាល់នៅក្នុងកោសិកាឈាម។ ជួយវាយតម្លៃកម្រិតនៃការឆ្លង (ភាគរយនៃប៉ារ៉ាស៊ីត) ងាយស្រួល និងចំណាយតិចសម្រាប់ការស្រាវជ្រាវបឋម។ ភាពស៊ាំក្នុងការចាប់យកមានកម្រិតទាបសម្រាប់ការឆ្លងតិចតួចបំផុត ហើយពិបាកក្នុងការបែងចែកពូជប៉ារ៉ាស៊ីតដែលស្រដៀងគ្នាខ្លាំង (Cryptic species)។ បានរកឃើញអត្រាឆ្លងប៉ារ៉ាស៊ីត Leucocytozoon ចំនួន ៤៦% (២៤/៥២ ក្បាល) និងអាចបែងចែកកម្រិតនៃការឆ្លងជាកម្រិតទាប (<០,០១%) និងកម្រិតខ្ពស់ (>០,០១%)។
Nested PCR & Phylogenetic Analysis
បច្ចេកទេស Nested PCR និងការវិភាគការវិវត្តពូជសាសន៍
មានភាពស៊ាំខ្ពស់ក្នុងការរកមេរោគសូម្បីតែក្នុងកម្រិតទាបបំផុត និងអាចបែងចែកប្រភពហ្សែន ឬពូជប៉ារ៉ាស៊ីតបានយ៉ាងច្បាស់លាស់តាមរយៈហ្សែន cytochrome b។ ទាមទារសារធាតុគីមី ឧបករណ៍ពិសោធន៍ថ្លៃៗ និងអ្នកជំនាញកម្រិតខ្ពស់ ហើយមិនអាចបង្ហាញពីរូបរាងផលប៉ះពាល់ផ្ទាល់លើកោសិកាឈាមបានទេ។ បានបែងចែកសំណាកវិជ្ជមានទាំង ២៤ ជា ៥ ក្រុមហ្សែន ដោយបង្ហាញថាវាមានភាពស្រដៀងគ្នា ៩៨% ទៅនឹងប៉ារ៉ាស៊ីតដែលបានរកឃើញនៅម៉ាឡេស៊ី។
Complete Blood Count (CBC) Hematology
ការរាប់គ្រាប់ឈាមសរុប (ឈាមវិទ្យា)
ជួយវាយតម្លៃពីផលប៉ះពាល់សុខភាព និងសរីរវិទ្យាជាក់ស្តែងលើសត្វស្លាប ដូចជាបញ្ហាភាពស្លេកស្លាំង ឬការឆ្លើយតបនៃប្រព័ន្ធការពាររាងកាយ។ មិនមែនជាវិធីសាស្ត្រសម្រាប់ធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យរកប្រភេទប៉ារ៉ាស៊ីតជាក់លាក់នោះទេ វាគ្រាន់តែបង្ហាញពីរោគសញ្ញា ឬប្រតិកម្មរាងកាយទូទៅប៉ុណ្ណោះ។ បានបង្ហាញថាការឆ្លងកម្រិតខ្ពស់ធ្វើឱ្យកម្រិតកំហាប់គ្រាប់ឈាមក្រហម (PCV) អេម៉ូក្លូប៊ីន និងហ្វីប្រ៊ីណូហ្សែនថយចុះយ៉ាងច្បាស់លាស់។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការសិក្សានេះទាមទារឧបករណ៍មន្ទីរពិសោធន៍កម្រិតខ្ពស់ទាំងផ្នែកឈាមវិទ្យា និងម៉ូលេគុលជីវវិទ្យា រួមទាំងការប្រើប្រាស់សេវាកម្មកំណត់លំដាប់ហ្សែនពីខាងក្រៅផងដែរ។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះត្រូវបានធ្វើឡើងដោយប្រមូលសំណាកពីមាន់ស្រុក និងមាន់ជល់តាមកសិដ្ឋានចិញ្ចឹមលក្ខណៈគ្រួសារ ក្នុងខេត្តចំនួន ៤ នៅភាគកណ្តាលនៃប្រទេសថៃ។ ទិន្នន័យនេះមានសារៈសំខាន់សម្រាប់ប្រទេសកម្ពុជា ដោយសារយើងមានអាកាសធាតុត្រូពិចស្រដៀងគ្នា និងមានទម្លាប់ចិញ្ចឹមមាន់ស្រុក ឬមាន់ជល់តាមផ្ទះច្រើន ដែលធ្វើឱ្យសត្វស្លាបប្រឈមនឹងមូស ឬសត្វល្អិតបឺតឈាមដែលជាភ្នាក់ងារចម្លងរោគដូចគ្នា។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

វិធីសាស្ត្រ និងរបកគំហើញនៃការសិក្សានេះ មានអត្ថប្រយោជន៍យ៉ាងខ្លាំងសម្រាប់ការស្រាវជ្រាវ និងការពង្រឹងវិស័យបសុសត្វនៅប្រទេសកម្ពុជា ជាពិសេសក្នុងការកំណត់អត្តសញ្ញាណជំងឺឆ្លង។

ការយល់ដឹងស៊ីជម្រៅពីប្រភេទ និងកម្រិតនៃការឆ្លងប៉ារ៉ាស៊ីតឈាម ព្រមទាំងការប្រែប្រួលឈាមវិទ្យានេះ នឹងជួយឱ្យអ្នកជំនាញកម្ពុជាអាចរៀបចំវិធានការការពារ និងកាត់បន្ថយការខាតបង់សេដ្ឋកិច្ចក្នុងវិស័យចិញ្ចឹមសត្វបានយ៉ាងមានប្រសិទ្ធភាព។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. សិក្សាពីរូបសាស្ត្រប៉ារ៉ាស៊ីតតាមរយៈមីក្រូទស្សន៍: ចាប់ផ្តើមអនុវត្តការប្រមូលសំណាកឈាមសត្វស្លាប លាបលើកញ្ចក់ (Blood smear) រួចជ្រលក់ពណ៌ដោយប្រើ Wright's stainGiemsa និងពិនិត្យរកមើលប៉ារ៉ាស៊ីត Leucocytozoon ដោយប្រើមីក្រូទស្សន៍។
  2. អនុវត្តការរាប់គ្រាប់ឈាម និងវាយតម្លៃសុខភាពសត្វ: ប្រើប្រាស់ឧបករណ៍ Refractometer និងបច្ចេកទេស Complete Blood Count (CBC) ដើម្បីវាស់ស្ទង់កម្រិត Packed Cell Volume (PCV) កម្រិតអេម៉ូក្លូប៊ីន និងប្រៀបធៀបទិន្នន័យទាំងនេះទៅនឹងកម្រិតនៃការឆ្លងប៉ារ៉ាស៊ីត។
  3. អនុវត្តបច្ចេកទេសទាញយក DNA និង PCR: ធ្វើការទាញយក DNA ពីឈាមដោយប្រើកញ្ចប់ពាណិជ្ជកម្ម (ឧទាហរណ៍៖ Favorprep kit) និងរៀបចំប្រតិកម្ម Nested PCR ដោយផ្តោតលើហ្សែន cytochrome b ដើម្បីពង្រីកសរសៃ DNA របស់ប៉ារ៉ាស៊ីត។
  4. វិភាគទិន្នន័យហ្សែន និងការវិវត្តពូជសាសន៍: បន្ទាប់ពីទទួលបានលទ្ធផលកំណត់លំដាប់ហ្សែន (Sequencing) សូមប្រើប្រាស់កម្មវិធី MEGA7 ដើម្បីតម្រៀបហ្សែន និងបង្កើតមែកធាងការវិវត្តពូជសាសន៍ (Phylogenetic tree) ដោយប្រៀបធៀបជាមួយទិន្នន័យយោងពីក្នុង GenBank
  5. វិភាគស្ថិតិ និងសរសេររបាយការណ៍: ប្រើប្រាស់កម្មវិធីស្ថិតិដូចជា NCSSSPSS ដើម្បីវិភាគរកទំនាក់ទំនងរវាងកម្រិតនៃការឆ្លងប៉ារ៉ាស៊ីត (<0.01% និង >0.01%) និងការប្រែប្រួលនៃតម្លៃឈាមវិទ្យា រួចចងក្រងលទ្ធផលជាអត្ថបទស្រាវជ្រាវវិទ្យាសាស្ត្រ។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Leucocytozoon spp. (ប៉ារ៉ាស៊ីតប្រភេទ Leucocytozoon) គឺជាប្រភេទប៉ារ៉ាស៊ីតឯកកោសិការស់នៅក្នុងឈាមសត្វស្លាប (ដូចជាមាន់ និងទា) ដែលបង្កជំងឺគ្រុនចាញ់លើសត្វស្លាប (Avian malaria) តាមរយៈការខាំចម្លងពីសត្វល្អិតបឺតឈាម។ វាបំផ្លាញកោសិកាឈាមក្រហម និងធ្វើឱ្យសត្វស្លេកស្លាំង។ ស្រដៀងនឹងមេរោគគ្រុនចាញ់ដែលឆ្លងតាមមូសខាំមនុស្សដែរ តែនេះជាមេរោគដែលឆ្លងលើសត្វស្លាប។
Phylogenetic analysis (ការវិភាគការវិវត្តពូជសាសន៍ ឬមែកធាងពូជសាសន៍) គឺជាការសិក្សាប្រៀបធៀបលំដាប់ហ្សែន (DNA) របស់សរីរាង្គមានជីវិត ដើម្បីស្វែងរកទំនាក់ទំនងភាពជាសាច់ញាតិ ឬប្រភពដើមនៃការវិវត្តរបស់វា។ ក្នុងការសិក្សានេះ គេប្រើវាដើម្បីមើលថាប៉ារ៉ាស៊ីតនៅថៃ និងម៉ាឡេស៊ីមានពូជអំបូរជិតដិតគ្នាកម្រិតណា។ ដូចជាការគូរខ្សែស្រឡាយវង្សត្រកូល (Family tree) ដើម្បីរកមើលថាតើអ្នកណាជាសាច់ញាតិជិតស្និទ្ធនឹងអ្នកណា។
Nested PCR (ប្រតិកម្ម PCR បន្តបន្ទាប់កម្រិតខ្ពស់) ជាបច្ចេកទេសពង្រីកសរសៃ DNA ដែលធ្វើឡើងពីរដងបន្តបន្ទាប់គ្នា (ប្រើប្រೈមឺរពីរឈុត) ដើម្បីបង្កើនភាពស៊ាំ (Sensitivity) និងភាពជាក់លាក់ (Specificity) ក្នុងការចាប់យក DNA គោលដៅ ទោះបីជាមេរោគមានចំនួនតិចតួចបំផុតក្នុងគំរូឈាមក៏ដោយ។ ដូចជាការប្រើប្រាស់កែវពង្រីកឆ្លុះរកវត្ថុមួយ រួចប្រើកែវពង្រីកមួយទៀតដែលមានកម្រិតច្បាស់ជាងមុនឆ្លុះបន្ថែមចំចំណុចដដែលដើម្បីឱ្យកាន់តែប្រាកដ។
Cytochrome b gene (ហ្សែនស៊ីតូក្រូម b) គឺជាហ្សែនមួយប្រភេទដែលស្ថិតនៅក្នុងមីតូកុងឌ្រី (Mitochondria) នៃកោសិកា។ អ្នកស្រាវជ្រាវចូលចិត្តប្រើហ្សែននេះជាអត្តសញ្ញាណដើម្បីកំណត់ និងបែងចែកប្រភេទពូជប៉ារ៉ាស៊ីត ព្រោះវាមានការប្រែប្រួលយឺតៗតាមពេលវេលាដែលអាចឱ្យយើងតាមដានប្រវត្តិរបស់វាបាន។ ដើរតួដូចជា "លេខកូដសម្គាល់ខ្លួន (Barcode)" សម្រាប់កំណត់ថាតើប៉ារ៉ាស៊ីតនោះជាប្រភេទអ្វីឱ្យពិតប្រាកដ។
Packed cell volume (PCV) (កម្រិតកំហាប់គ្រាប់ឈាមក្រហម) គឺជារង្វាស់នៃភាគរយនៃគ្រាប់ឈាមក្រហមសរុបនៅក្នុងបរិមាណឈាមទាំងមូល។ ប្រសិនបើតម្លៃ PCV ធ្លាក់ចុះទាប នោះមានន័យថាសត្វកំពុងជួបប្រទះបញ្ហាស្លេកស្លាំង ដោយសារមេរោគបានបំផ្លាញគ្រាប់ឈាមក្រហមរបស់វា។ ដូចជាការវាស់បរិមាណគ្រាប់តុក្កតាក្រហមក្នុងដបទឹកមួយ ប្រសិនបើមានចំនួនតិច នោះសបញ្ជាក់ថាកំពុងខ្វះឈាម។
Gametocytes (កាម៉ែតតូស៊ីត / កោសិកាបង្កកំណើតរបស់ប៉ារ៉ាស៊ីត) ជាទម្រង់មួយរបស់ប៉ារ៉ាស៊ីតដែលរស់នៅក្នុងកោសិកាឈាមសត្វស្លាប ហើយត្រៀមខ្លួនរួចជាស្រេចដើម្បីបន្តពូជ។ នៅពេលសត្វល្អិតមកបឺតឈាម វាស្រូបយកកាម៉ែតតូស៊ីតទាំងនេះទៅបង្កាត់ពូជនៅក្នុងពោះរបស់វា មុននឹងចម្លងទៅសត្វផ្សេងទៀត។ ប្រៀបដូចជា "គ្រាប់ពូជ" របស់មេរោគដែលរង់ចាំតែសត្វល្អិតមកដឹកជញ្ជូនយកទៅបន្តពូជនៅកន្លែងផ្សេង។
Cryptic species (ពូជប៉ារ៉ាស៊ីតលាក់មុខ / ប្រភេទពូជស្រដៀងគ្នា) សំដៅលើប្រភេទសរីរាង្គពីរ ឬច្រើន ដែលមានរូបរាងខាងក្រៅដូចគ្នាបេះបិទរហូតដល់មិនអាចបែងចែកបានដោយការមើលតាមមីក្រូទស្សន៍ ប៉ុន្តែតាមការពិតវាមានរចនាសម្ព័ន្ធហ្សែន (DNA) ខុសគ្នាស្រឡះ និងជាប្រភេទដាច់ដោយឡែកពីគ្នា។ ដូចជាកូនភ្លោះមុខដូចគ្នាបេះបិទ ដែលមើលពីក្រៅមិនដឹងថាជានរណាឡើយ លុះត្រាតែពិនិត្យ DNA ទើបដឹងថាពួកគេមិនមែនជាមនុស្សតែមួយ។
Reticulocytes (រ៉េទីគូឡូស៊ីត / គ្រាប់ឈាមក្រហមខ្ចី) គឺជាគ្រាប់ឈាមក្រហមដែលទើបនឹងកើតថ្មីៗ និងមិនទាន់ពេញវ័យនៅឡើយ។ នៅពេលសត្វមានជំងឺស្លេកស្លាំងដោយសារប៉ារ៉ាស៊ីតបំផ្លាញគ្រាប់ឈាមចាស់ៗ ខួរឆ្អឹងនឹងបញ្ចេញ Reticulocytes ជាច្រើនមកក្នុងសរសៃឈាមដើម្បីប៉ះប៉ូវកោសិកាដែលបាត់បង់។ ប្រៀបដូចជាទាហានស្ម័គ្រចិត្តក្មេងៗ ដែលត្រូវបញ្ជូនជាបន្ទាន់ទៅសមរភូមិ ដើម្បីជំនួសទាហានចាស់ៗដែលស្លាប់។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖