Original Title: Effects of Plant Growth Regulators and Explant Types on Callus Formation in African Yam Bean (Sphenostylis stenocarpa (Hochst. Ex A. Rich) Harms)
Source: li01.tci-thaijo.org
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ឥទ្ធិពលនៃនិយតករកំណើនរុក្ខជាតិ និងប្រភេទកោសិកាបណ្តុះលើការបង្កើតកាលុសក្នុងសណ្តែកដីអាហ្វ្រិក (Sphenostylis stenocarpa (Hochst. Ex A. Rich) Harms)

ចំណងជើងដើម៖ Effects of Plant Growth Regulators and Explant Types on Callus Formation in African Yam Bean (Sphenostylis stenocarpa (Hochst. Ex A. Rich) Harms)

អ្នកនិពន្ធ៖ Sikirat Remi Akande (Institute of Agricultural Research and Training, Obafemi Awolowo University), Morufat Oloruntoyin Balogun (Institute of Agricultural Research and Training, Obafemi Awolowo University), Benjamin Adefemi Ogunbodede (Institute of Agricultural Research and Training, Obafemi Awolowo University)

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2009 Kasetsart J. (Nat. Sci.)

វិស័យសិក្សា៖ Agricultural Biotechnology

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ការសិក្សានេះដោះស្រាយបញ្ហាកង្វះខាតនៃពិធីការដែលអាចទុកចិត្តបានសម្រាប់ការបន្តពូជកោសិកា (Regeneration protocol) របស់សណ្តែកដីអាហ្វ្រិក ដែលជាតម្រូវការចាំបាច់សម្រាប់ការកែលម្អហ្សែនដំណាំតាមរយៈបច្ចេកវិទ្យាជីវសាស្រ្ត។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ អ្នកស្រាវជ្រាវបានយកកោសិកាបណ្តុះពីស្លឹក ដើម និងឫស ទៅបណ្តុះក្នុងមជ្ឈដ្ឋានចំនួន ១៦ ផ្សេងៗគ្នា ដោយប្រើប្រាស់និយតករកំណើនរុក្ខជាតិ (PGR) ក្នុងកម្រិតខុសៗគ្នា។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Stem Explant + Kinetin & NAA (1.5 mg/l each)
ការបណ្តុះកោសិកាដើម ជាមួយអ័រម៉ូន Kinetin និង NAA
បង្កើតកាលុសបានលឿនបំផុត និងទទួលបានកាលុសប្រភេទផុយ (friable) ដែលស័ក្តិសមបំផុតសម្រាប់ការបន្តពូជកូនរុក្ខជាតិ។ ត្រូវការការវាស់វែងច្បាស់លាស់នូវអ័រម៉ូនពីរប្រភេទបញ្ចូលគ្នា។ ទទួលបានអត្រាបង្កើតកាលុស ១០០% និងមានទំហំធំជាងគេសម្រាប់ពូជសណ្តែកទាំងពីរប្រភេទ។
Leaf Explant + Various Media
ការបណ្តុះកោសិកាស្លឹក ក្នុងមជ្ឈដ្ឋានផ្សេងៗ
អាចបង្កើតកាលុសប្រភេទផុយ និងមានប្រវែងវែងជាងគេក្នុងមជ្ឈដ្ឋានមួយចំនួន។ អត្រានៃការបង្កើតកាលុសជាមធ្យមទាបជាងការប្រើប្រាស់កោសិកាដើម និងយឺតជាងបន្តិចក្នុងការចាប់ផ្តើម។ អត្រាបង្កើតកាលុសជាមធ្យម ៦៨,៧៥% សម្រាប់ពូជ SSSWN56 និង ៣៧,៥% សម្រាប់ពូជ SSSWN75។
Root Explant + Various Media
ការបណ្តុះកោសិកាឫស
ងាយស្រួលក្នុងការកាត់យកពីកូនរុក្ខជាតិដែលទើបដុះ។ កាលុសដែលទទួលបានមានសភាពបង្រួម (compact) ពណ៌ត្នោត និងមិនផុយ ដែលពិបាកឬមិនអាចបង្កើតជាកូនរុក្ខជាតិថ្មីបាន។ មានអត្រាបង្កើតកាលុសទាបបំផុត (ប្រវែងមធ្យមត្រឹមតែ ០,១៤ សង់ទីម៉ែត្រ និងទទឹង ០,០៦ សង់ទីម៉ែត្រ)។
Hormone-free Medium (Control)
មជ្ឈដ្ឋានមិនមានអ័រម៉ូន (បញ្ជា)
ចំណាយតិច ដោយមិនតម្រូវឱ្យទិញនិយតករកំណើនរុក្ខជាតិបន្ថែម។ មិនមានសមត្ថភាពជំរុញឱ្យកោសិការុក្ខជាតិបំបែកខ្លួនបង្កើតជាកាលុសបានឡើយ។ អត្រាបង្កើតកាលុស ០% សម្រាប់គ្រប់ប្រភេទកោសិកា និងគ្រប់ពូជ។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការអនុវត្តវិធីសាស្រ្តនេះទាមទារបន្ទប់ពិសោធន៍បណ្តុះជាលិកា (Tissue Culture Lab) ដែលមានបរិស្ថានគ្មានមេរោគ សម្ភារៈមន្ទីរពិសោធន៍ និងសារធាតុគីមី-អ័រម៉ូនជាក់លាក់។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះត្រូវបានធ្វើឡើងនៅក្នុងប្រទេសនីហ្សេរីយ៉ា ដោយប្រើប្រាស់ពូជសណ្តែក Sphenostylis stenocarpa ចំនួនពីរប្រភេទ (SSSWN56 និង SSSWN75)។ ទិន្នន័យនេះអាចមានកម្រិតប្រសិនបើចង់យកមកអនុវត្តផ្ទាល់លើពូជសណ្តែកក្នុងស្រុករបស់កម្ពុជា ដោយសារភាពខុសគ្នានៃសេនេទិចរុក្ខជាតិ ប៉ុន្តែគោលការណ៍នៃអ័រម៉ូនអាចប្រើជាឯកសារយោងបាន។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

ពិធីការនេះមានអត្ថប្រយោជន៍ខ្ពស់សម្រាប់ការស្រាវជ្រាវកែលម្អពូជដំណាំ និងបច្ចេកវិទ្យាជីវសាស្រ្តកសិកម្មនៅកម្ពុជា។

ជារួម នេះជាការសិក្សាជាមូលដ្ឋានដ៏ល្អមួយ ដែលអ្នកវិទ្យាសាស្ត្រកម្ពុជាអាចយកទៅកែច្នៃអនុវត្តលើរុក្ខជាតិពពួកសណ្តែកក្នុងស្រុក ដើម្បីជំរុញសន្តិសុខស្បៀង។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. រៀបចំមជ្ឈដ្ឋានបណ្តុះនិងសម្អាតមេរោគ: រៀបចំមជ្ឈដ្ឋាន MS medium ដោយបន្ថែមស្ករ អាហ្គា និងកែតម្រូវ pH ទៅ ៥,៧។ ត្រូវសម្លាប់មេរោគលើគ្រាប់ពូជដោយប្រើ 70% methylated spirit និងសារធាតុសម្អាត (bleach) មុននឹងបណ្តុះឱ្យដុះពន្លក។
  2. ជ្រើសរើសប្រភេទកោសិកា (Explant Selection): កាត់យកផ្នែកនៃដើម (Stem explant) ប្រវែង ១ សង់ទីម៉ែត្រ ពីកូនរុក្ខជាតិដែលដុះបាន ៣ សប្តាហ៍ ដោយសារផ្នែកនេះផ្តល់អត្រាបង្កើតកាលុសល្អបំផុតផ្អែកតាមការសិក្សា។
  3. អនុវត្តរូបមន្តអ័រម៉ូនជំរុញ (PGR Formulation): ប្រើប្រាស់មជ្ឈដ្ឋានទី១៤ ដោយលាយ 1.5 mg/l Kinetin និង 1.5 mg/l NAA ចូលទៅក្នុងមជ្ឈដ្ឋាន MS ដើម្បីទទួលបានការបង្កើតកាលុសដ៏មានប្រសិទ្ធភាព។
  4. តាមដាន និងប្រមូលទិន្នន័យ (Monitoring): ទុកកោសិកាបណ្តុះរយៈពេល ៣ ខែ រួចធ្វើការវាស់ប្រវែង ទទឹង និងកត់ត្រាប្រភេទកាលុស (ឧ. ផុយ ឬបង្រួម) ដោយប្រើកម្មវិធី SASSPSS សម្រាប់វិភាគទិន្នន័យបន្ត។
  5. អភិវឌ្ឍន៍ទៅជាកូនរុក្ខជាតិ (Regeneration Phase): យកកាលុសប្រភេទផុយ (Friable callus) ដែលទទួលបាន ទៅបណ្តុះក្នុងមជ្ឈដ្ឋានថ្មីដែលមានសមាមាត្រអ័រម៉ូនផ្សេងទៀត ដើម្បីជំរុញការដុះជាឫស និងពន្លកស្លឹកថ្មី។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Explant (កោសិកាបណ្តុះ) ផ្នែកតូចមួយនៃរុក្ខជាតិ (ដូចជាបំណែកស្លឹក ដើម ឬឫស) ដែលត្រូវបានកាត់យកមកបណ្តុះនៅក្នុងមជ្ឈដ្ឋានសិប្បនិម្មិត (in vitro) ដែលមានផ្ទុកសារធាតុចិញ្ចឹម ដើម្បីជំរុញឱ្យវាបង្កើតកោសិកាថ្មី ឬលូតលាស់ជាកូនរុក្ខជាតិទាំងមូល។ ដូចជាការកាត់មែក ឬស្លឹករបស់រុក្ខជាតិមួយទៅដាំក្នុងផើងដីពិសេស ដើម្បីឱ្យវាដុះជាដើមថ្មីមួយទៀត។
Callus (កាលុស) បណ្តុំនៃកោសិការុក្ខជាតិដែលមិនទាន់មានរូបរាងច្បាស់លាស់ (undifferentiated cells) ដែលដុះឡើងនៅត្រង់តំបន់កាត់នៃកោសិកាបណ្តុះ ក្រោមឥទ្ធិពលនៃអ័រម៉ូន។ វាអាចបន្តវិវឌ្ឍទៅជាឫស ពន្លក ឬស្លឹកបាន ប្រសិនបើប្រើប្រាស់អ័រម៉ូនបានត្រឹមត្រូវ។ ដូចជាសាច់ខ្ចីដែលទើបតែដុះឡើងនៅពេលដែលយើងមុតដៃ មុននឹងវាប្រែទៅជាស្បែកធម្មតាវិញ។
Plant Growth Regulators / PGR (និយតករកំណើនរុក្ខជាតិ) ជាសារធាតុគីមី ឬអ័រម៉ូនសិប្បនិម្មិត ដែលគេបន្ថែមចូលទៅក្នុងមជ្ឈដ្ឋានបណ្តុះកោសិកា ដើម្បីបញ្ជា និងជំរុញឱ្យរុក្ខជាតិធ្វើការបែងចែកកោសិកា បង្កើតកាលុស ដុះឫស ឬដុះពន្លក។ ដូចជាវីតាមីនបំប៉ន ឬថ្នាំជំរុញដែលគ្រូពេទ្យផ្តល់ឱ្យដើម្បីជួយឱ្យក្មេងលូតលាស់លឿន និងមានសុខភាពល្អតាមគោលដៅជាក់លាក់ណាមួយ។
Friable callus (កាលុសផុយ) ជាប្រភេទកាលុសដែលមានសភាពទន់ ផុយៗ និងមានកោសិការលុងៗជាប់គ្នា។ កាលុសប្រភេទនេះមានសក្តានុពលខ្ពស់បំផុតក្នុងការយកទៅបំបែក និងបណ្តុះជាកូនរុក្ខជាតិថ្មី (regeneration) ធៀបនឹងកាលុសដែលហាប់ណែន។ ដូចជាដីខ្សាច់ដែលធូរងាយស្រួលយករុក្ខជាតិទៅដាំ ផ្ទុយពីដីឥដ្ឋដែលហាប់ណែនពិបាកក្នុងការដាំដុះ។
Somaclonal variation (បម្រែបម្រួលសេនេទិចតាមរយៈកោសិកាលូតលាស់) ការប្រែប្រួលនៃលក្ខណៈសេនេទិច (DNA) ដែលកើតឡើងដោយចៃដន្យលើកូនរុក្ខជាតិដែលត្រូវបានបណ្តុះចេញពីមន្ទីរពិសោធន៍ (tissue culture)។ ការប្រែប្រួលនេះអាចផ្តល់នូវលក្ខណៈល្អៗថ្មីៗ ដូចជាធន់នឹងជំងឺ ដើម្បីយកទៅបង្កាត់ពូជបន្ត។ ដូចជាការថតចម្លងឯកសារមួយច្រើនដង ហើយចៃដន្យមានឯកសារមួយសន្លឹកមានអក្សរខុសប្លែកពីគេ ដែលអក្សរថ្មីនោះបែរជាមានន័យល្អជាងមុនទៅវិញ។
Auxin (អុកស៊ីន) ជាក្រុមនៃអ័រម៉ូនរុក្ខជាតិ (PGR) ដូចជា NAA ឬ IAA ដែលដើរតួយ៉ាងសំខាន់ក្នុងការជំរុញការលូតលាស់កោសិកាតាមបណ្តោយ និងជាពិសេសត្រូវបានគេប្រើប្រាស់ដើម្បីជំរុញឱ្យកោសិកាដុះចេញជាឫស។ ដូចជាមេបញ្ជាការដែលចេញបញ្ជាឱ្យកោសិកាប្រមូលផ្តុំគ្នាដើម្បីសាងសង់គ្រឹះ (ឫស) របស់អគារ (រុក្ខជាតិ)។
Cytokinin (ស៊ីតូគីនីន) ជាក្រុមនៃអ័រម៉ូនរុក្ខជាតិ (ដូចជា Kinetin ឬ BAP) ដែលធ្វើការសហការជាមួយអុកស៊ីន (Auxin) ដើម្បីជំរុញការបែងចែកកោសិកា (Cell division) និងត្រូវបានគេប្រើដើម្បីជំរុញការដុះពន្លកឬស្លឹក។ ដូចជាមេបញ្ជាការម្នាក់ទៀតដែលចេញបញ្ជាឱ្យកោសិកាសាងសង់ផ្នែកដំបូល និងបង្អួច (ពន្លកនិងស្លឹក) របស់អគារ។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖