Original Title: การสร้างต้นอ่อนส้มเขียวหวานและส้มโชกุนโดยวิธีเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ (Embryogenesis of Citrus reticulata (Keawan and Shokoon))
Source: doi.org/10.14456/thaidoa-agres.2001.5
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការបង្កើតកូនក្រូចឃ្វិច (ពូជ Keawan និង Shokoon) តាមរយៈវិធីសាស្ត្របណ្តុះជាលិកា

ចំណងជើងដើម៖ การสร้างต้นอ่อนส้มเขียวหวานและส้มโชกุนโดยวิธีเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ (Embryogenesis of Citrus reticulata (Keawan and Shokoon))

អ្នកនិពន្ធ៖ Jaruwan Chartisathian, Karsedis Distabanjong, Hirun Hirunpradit

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2001, Thai Agricultural Research Journal

វិស័យសិក្សា៖ Agricultural Biotechnology

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ឯកសារនេះផ្តោតលើការស្រាវជ្រាវពីបច្ចេកទេសបណ្តុះជាលិកាដើម្បីបង្កើតកូនក្រូចឃ្វិចពូជ Som Keawan និង Som Shokoon (Citrus reticulata) ដោយប្រើប្រាស់អូវុលខ្ចី។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ ការសិក្សានេះបានអនុវត្តវិធីសាស្ត្របណ្តុះជាលិកាក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ ដោយប្រៀបធៀបទំហំអូវុល និងរូបមន្តនៃមជ្ឈដ្ឋានចិញ្ចឹមផ្សេងៗគ្នាដើម្បីជំរុញការលូតលាស់កោសិកា។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Nu5 Medium for Callus Induction (MT + Malt extract + Kinetin + IAA)
ការប្រើប្រាស់មជ្ឈដ្ឋាន Nu5 សម្រាប់ជំរុញដុំកោសិកា (Callus)
មានប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់ក្នុងការជំរុញឲ្យអូវុលបង្កើតជាដុំកោសិកា (Embryogenic callus) បានល្អជាងមជ្ឈដ្ឋានផ្សេង។ ទាមទារពេលវេលាយូររហូតដល់ ៣ ខែ និងត្រូវផ្លាស់ប្តូរមជ្ឈដ្ឋានរៀងរាល់ខែដើម្បីរក្សាការលូតលាស់។ អូវុលទំហំធំនៃពូជ Shokoon ផ្តល់អត្រាបង្កើត Callus ជោគជ័យរហូតដល់ ៤០%។
Lactose/Galactose Medium without Coconut Water
ការប្រើមជ្ឈដ្ឋានមានជាតិស្ករ Lactose ឬ Galactose ដោយមិនលាយទឹកដូង
ជំរុញការបង្កើតអំប្រ៊ីយ៉ុង (Embryoid) ពីរូបរាងកោសិកាដំបូងបានយ៉ាងច្រើនសន្ធឹកសន្ធាប់ និងរហ័ស។ ជាតិស្ករប្រភេទនេះអាចមានតម្លៃថ្លៃជាងស្ករសធម្មតា និងត្រូវការការថ្លឹងថ្លែងកំហាប់ឲ្យបានច្បាស់លាស់ (៥%)។ ផ្តល់បរិមាណអំប្រ៊ីយ៉ុងកម្រិតខ្ពស់បំផុត (++++ ធៀបនឹងស្ករសដែលស្មើ -)។
Regeneration with 1.0 mg/L GA3
ការបណ្តុះពន្លកនិងឫសដោយប្រើអរម៉ូន GA3 កំហាប់ 1.0 mg/L
ជួយឲ្យអំប្រ៊ីយ៉ុងលូតលាស់ចេញជាពន្លក និងឫសបានយ៉ាងល្អ ព្រមទាំងមានរូបរាងប្រក្រតី (Normal shoots and roots)។ ប្រសិនបើប្រើកំហាប់មិនត្រឹមត្រូវ ឬមិនប្រើសោះ (0 mg/L) នឹងធ្វើឲ្យកូនរុក្ខជាតិខូចទ្រង់ទ្រាយ (Malformed)។ ផ្តល់អត្រាបង្កើតពន្លក និងឫសជាមធ្យមខ្ពស់បំផុត និងកាត់បន្ថយភាពខូចទ្រង់ទ្រាយ។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការអនុវត្តបច្ចេកទេសនេះទាមទារបន្ទប់ពិសោធន៍បណ្តុះជាលិការុក្ខជាតិដែលមានបរិក្ខារពេញលេញ សារធាតុគីមីជាក់លាក់ និងអ្នកបច្ចេកទេសជំនាញ។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះត្រូវបានធ្វើឡើងនៅក្នុងប្រទេសថៃ ដោយផ្តោតលើពូជក្រូចឃ្វិចក្នុងស្រុករបស់គេគឺ Som Keawan និង Som Shokoon។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ទិន្នន័យនេះមានសារៈសំខាន់ខ្លាំងសម្រាប់ប្រទេសកម្ពុជា ដោយសារយើងមានអាកាសធាតុស្រដៀងគ្នា និងនិយមដាំដុះពូជក្រូចប្រហាក់ប្រហែលគ្នា (ដូចជាក្រូចពោធិ៍សាត់) ដែលបច្ចុប្បន្នកំពុងរងការគំរាមកំហែងពីជំងឺផ្សេងៗ។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

បច្ចេកទេសនេះមានសក្តានុពលខ្ពស់ក្នុងការអភិវឌ្ឍវិស័យកសិកម្មនៅកម្ពុជា ពិសេសក្នុងការផលិតកូនក្រូចពូជសុទ្ធដែលគ្មានជំងឺ។

ការធ្វើជាម្ចាស់លើបច្ចេកទេស Embryogenesis នេះ នឹងជួយឲ្យកម្ពុជាកាត់បន្ថយការនាំចូលកូនរុក្ខជាតិពីប្រទេសជិតខាង និងធានាបាននូវនិរន្តរភាពនៃការដាំដុះដំណាំក្រូច។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. រៀបចំសារធាតុគីមី និងមជ្ឈដ្ឋានចិញ្ចឹម (Preparation of Culture Media): រៀបចំមជ្ឈដ្ឋាន MT basal medium ដោយបន្ថែម Malt extract (500 mg/L) និងអរម៉ូន BA (2 mg/L) សម្រាប់រូបមន្ត Nu2 ឬ Kinetin (1 mg/L) + IAA (0.1 mg/L) សម្រាប់រូបមន្ត Nu5។
  2. ការជ្រើសរើសផ្លែ និងសម្លាប់មេរោគ (Explant Selection & Sterilization): បេះផ្លែក្រូចខ្ចីទំហំ ០.៦ ទៅ ០.៨ សង់ទីម៉ែត្រ យកមកលាងសម្អាត រួចត្រាំសម្លាប់មេរោគក្នុងសូលុយស្យុង Clorox 10% លាយជាមួយ Tween-20 ចំនួន ២ ដំណក់ រយៈពេល ១០ នាទី មុននឹងលាងទឹកស្អាត (Distilled water) ២ ដង។
  3. ការវះកាត់យកអូវុលបណ្តុះ (Ovule Extraction for Callus Induction): ប្រើប្រាស់ Stereomicroscope នៅក្នុងទូ Laminar Flow Hood ដើម្បីវះកាត់យកអូវុលពីក្នុងផ្លែ (ជ្រើសរើសអូវុលធំ) ដាក់បណ្តុះក្នុងមជ្ឈដ្ឋានជំរុញ Callus រយៈពេល ៣ ខែ ដោយផ្លាស់ប្តូរមជ្ឈដ្ឋានរៀងរាល់ខែ។
  4. ការជំរុញការលូតលាស់អំប្រ៊ីយ៉ុង (Embryoid Development): នៅពេលទទួលបាន Embryogenic Callus ត្រូវផ្ទេរវាទៅកាន់មជ្ឈដ្ឋានថ្មីដែលមានផ្ទុកជាតិស្ករ Lactose 5%Galactose 5% (ដោយមិនប្រើទឹកដូង) ដើម្បីជំរុញឲ្យកើតជា Embryoid រាងបេះដូង (Heart shape)។
  5. ការបណ្តុះពន្លក និងឫស (Shoot/Root Regeneration): ផ្ទេរ Embryoid ទៅមជ្ឈដ្ឋានចុងក្រោយដែលមានបន្ថែមអរម៉ូន GA3 កំហាប់ 1.0 mg/L រក្សាទុកក្នុងសីតុណ្ហភាព ២៥-២៧ អង្សាសេ រយៈពេល ៥ ខែ រហូតដល់ចេញពន្លកនិងឫសពេញលេញ ទើបអាចយកទៅផ្សាំក្រៅ (Acclimatization) បាន។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Embryogenic callus (ដុំកោសិកាអំប្រ៊ីយ៉ូហ្សេនិច) ជាបណ្ដុំកោសិការុក្ខជាតិដែលមិនទាន់មានរូបរាងច្បាស់លាស់ (undifferentiated cells) ដែលត្រូវបានជំរុញឲ្យកើតចេញពីជាលិកាដើម (ដូចជាអូវុល) ហើយមានសក្តានុពលអាចបន្តលូតលាស់ទៅជាអំប្រ៊ីយ៉ុង ឬកូនរុក្ខជាតិថ្មីបាន។ ប្រៀបដូចជាដុំដីឥដ្ឋទន់ៗ ដែលគេអាចយកទៅសូនជារូបរាងអ្វីក៏បាន (ក្នុងទីនេះគឺលូតលាស់ជាកូនក្រូច)។
Somatic embryogenesis (ការបង្កើតអំប្រ៊ីយ៉ុងសូម៉ាទិច) គឺជាដំណើរការដែលកោសិកាធម្មតារបស់រុក្ខជាតិ (មិនមែនជាកោសិកាបន្តពូជដូចជាមេជីវិតឈ្មោល ឬញី) ត្រូវបានជំរុញនៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ឲ្យវិវឌ្ឍទៅជាអំប្រ៊ីយ៉ុង និងលូតលាស់ជាកូនរុក្ខជាតិពេញលេញ។ ដូចជាការយកកោសិកាស្បែកមួយសរសៃមកបណ្តុះបង្កើតបានជាមនុស្សម្នាក់ទៀត ដោយមិនបាច់មានការបង្កកំណើតពីឪពុកម្តាយ។
Immature ovule (អូវុលខ្ចី) ជាផ្នែកមួយនៃកេសរញីរបស់ផ្កាដែលមិនទាន់បង្កកំណើតពេញលេញ ឬគ្រាប់ខ្ចីៗដែលមាននៅក្នុងផ្លែតូចៗ (ទំហំ ០.៦-០.៨ សង់ទីម៉ែត្រ) ដែលគេយកមកប្រើប្រាស់ជាប្រភពកោសិកាដើមសម្រាប់បណ្តុះក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍។ ដូចជាស៊ុតដែលមិនទាន់ក្លាយជាកូនមាន់ ដែលត្រូវគេយកមកចិញ្ចឹមក្នុងទូភ្ញាស់ដើម្បីបង្កើតជាជីវិតថ្មី។
Murashige & Tucker basal medium (មជ្ឈដ្ឋានមូលដ្ឋាន Murashige & Tucker) ជារូបមន្តសូលុយស្យុង ឬចាហួយដែលផ្ទុកទៅដោយសារធាតុចិញ្ចឹមចាំបាច់ (រ៉ែ វីតាមីន) ដែលត្រូវបានរចនាឡើងជាពិសេសសម្រាប់ផ្គត់ផ្គង់ដល់ការលូតលាស់របស់កោសិការុក្ខជាតិអំបូរក្រូច នៅក្នុងបំពង់សាកល្បង។ ប្រៀបដូចជារូបមន្តទឹកដោះគោម្សៅដែលគេឆុងសម្រាប់ទារកទើបកើត ដើម្បីឲ្យពួកគេឆាប់ធំធាត់។
Gibberellin / GA3 (អរម៉ូនជីបេរ៉េលីន) ជាប្រភេទអរម៉ូនលូតលាស់របស់រុក្ខជាតិ (Plant growth regulator) ដែលត្រូវបានគេបន្ថែមទៅក្នុងមជ្ឈដ្ឋានបណ្តុះ ដើម្បីជំរុញឲ្យអំប្រ៊ីយ៉ុងលូតលាស់ចេញជាពន្លក និងឫសប្រក្រតី ព្រមទាំងការពារកុំឲ្យមានការខូចទ្រង់ទ្រាយ។ ដូចជាវីតាមីនជំនួយកម្ពស់និងសាច់ដុំ ដែលជួយឲ្យកុមារលូតលាស់មានរូបរាងកាយមាំមួន និងមានសុខភាពល្អ។
Malform embryo (អំប្រ៊ីយ៉ុងខូចទ្រង់ទ្រាយ) ជាអំប្រ៊ីយ៉ុង ឬកូនរុក្ខជាតិដែលលូតលាស់ខុសប្រក្រតី មានរូបរាងមិនល្អ ឬមិនអាចបន្តការលូតលាស់ទៅជាកូនរុក្ខជាតិពេញលេញបាន ដោយសារកង្វះអរម៉ូន ឬសារធាតុចិញ្ចឹមត្រឹមត្រូវ (ដូចជាខ្វះ GA3 នៅក្នុងការពិសោធន៍នេះ)។ ដូចជាកូនក្មេងដែលកើតមកមានពិការភាពពីកំណើត ដោយសារម្ដាយខ្វះជីវជាតិពេលមានផ្ទៃពោះ។
Totipotency (តូទីប៉ូតង់ស៊ី) ជាសមត្ថភាពពីធម្មជាតិដ៏ពិសេសរបស់កោសិការុក្ខជាតិ ដែលកោសិកាតែមួយអាចបំបែកខ្លួន និងវិវឌ្ឍទៅជាសរីរាង្គគ្រប់ផ្នែកទាំងអស់ (ឫស ដើម ស្លឹក) រហូតក្លាយជារុក្ខជាតិមួយដើមពេញលេញ។ ដូចជាឥដ្ឋមួយដុំដែលមានមន្តអាគម អាចប្រែក្លាយខ្លួនវាទៅជាផ្ទះមួយខ្នងទាំងមូលបានដោយខ្លួនឯង។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖