Original Title: In Vitro Culture of Indica Rice (Oryza sativa L. cv. Nang Mol S 4)
Source: li01.tci-thaijo.org
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការបណ្តុះជាលិកាស្រូវប្រភេទ Indica (Oryza sativa L. cv. Nang Mol S 4) ក្នុងកែវពិសោធន៍

ចំណងជើងដើម៖ In Vitro Culture of Indica Rice (Oryza sativa L. cv. Nang Mol S 4)

អ្នកនិពន្ធ៖ Suriyun Cha-um, Srisom Surawattananon, Kramolpun Namwongprom, Chalermchai Wongwattana

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 1997, Kasetsart Journal (Natural Science)

វិស័យសិក្សា៖ Plant Biotechnology

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ការសិក្សានេះផ្តោតលើការស្រាវជ្រាវរកលក្ខខណ្ឌល្អបំផុតសម្រាប់ការបង្កើតកាលីស (Callus) និងការលូតលាស់ឡើងវិញនៃដើមស្រូវប្រភេទ Indica (Oryza sativa L. cv. Nang Mol S 4) តាមរយៈការបណ្តុះជាលិកាក្នុងកែវពិសោធន៍។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ ការស្រាវជ្រាវនេះបានអនុវត្តការបណ្តុះអំប្រ៊ីយ៉ុងស្រូវដោយប្រើប្រាស់មជ្ឈដ្ឋានសារធាតុចិញ្ចឹម MS លាយជាមួយកំហាប់អរម៉ូនលូតលាស់ផ្សេងៗគ្នា និងការសាកល្បងក្រោមលក្ខខណ្ឌពន្លឺខុសៗគ្នា។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Callus Induction with 2.0 mg/l 2,4-D in Dark
ការបណ្ដុះកាលីស (Callus) ដោយប្រើអរម៉ូន 2,4-D កំហាប់ ២.០ មីលីក្រាម/លីត្រ ក្នុងទីងងឹត
ទទួលបានអត្រាកកើតកាលីសខ្ពស់បំផុត និងមានទម្ងន់ធ្ងន់ (ប្រភេទ Embryogenic callus) ដែលល្អសម្រាប់ការបណ្ដុះដើមបន្ត។ ត្រូវការគ្រប់គ្រងលក្ខខណ្ឌពន្លឺឱ្យងងឹតជិតល្អក្នុងបន្ទប់ពិសោធន៍។ អត្រាកកើតកាលីស ៥៧% និងទទួលបានទិន្ទុគុណភាពខ្ពស់បំផុត (2.20 a) ធៀបនឹងកម្រិតអរម៉ូនផ្សេងទៀត។
Callus Induction with 2.0 mg/l 2,4-D in Light
ការបណ្ដុះកាលីសដោយប្រើអរម៉ូន 2,4-D កំហាប់ ២.០ មីលីក្រាម/លីត្រ ក្នុងទីមានពន្លឺ
ងាយស្រួលរៀបចំដោយមិនចាំបាច់បិទបាំងពន្លឺក្នុងបន្ទប់ពិសោធន៍។ កាលីសមានការលូតលាស់យឺត ទម្ងន់ស្រាល និងមានពណ៌ត្នោតមិនសូវល្អសម្រាប់ការលូតលាស់ជាដើមឡើយ។ អត្រាកកើតកាលីសធ្លាក់ចុះមកត្រឹម ៥១% ឯទម្ងន់កាលីសមានកម្រិតទាបជាងក្នុងទីងងឹត។
Shoot Regeneration with 1.0 mg/l Kinetin + 1.0 g/l Casein hydrolysate
ការបណ្ដុះដើមដោយប្រើ Kinetin ១.០ មីលីក្រាម/លីត្រ + Casein hydrolysate ១.០ ក្រាម/លីត្រ
ជួយបង្កើនការលូតលាស់របស់កោសិកា និងជំរុញឱ្យកាលីសលូតលាស់ជាដើមស្រូវបានច្រើនបំផុត។ ទាមទារការលាយសារធាតុអរម៉ូន និងអាស៊ីតអាមីណូច្រើនមុខបញ្ចូលគ្នា ដែលអាចបង្កើនថ្លៃដើមនិងភាពស្មុគស្មាញក្នុងការរៀបចំ។ ផ្តល់អត្រាដុះដើមខ្ពស់បំផុត (២៦.៣%) និងមានចំនួនដើមជាមធ្យម ៦.៤ ដើមក្នុងមួយដុំកាលីស។
Root Induction with MS + 2.0 mg/l IBA vs MS-free hormone
ការបណ្ដុះឫសលើមជ្ឈដ្ឋាន MS + IBA ២.០ មីលីក្រាម/លីត្រ ធៀបនឹងមជ្ឈដ្ឋាន MS គ្មានអរម៉ូន
ការប្រើប្រាស់ IBA ជួយឱ្យដើមស្រូវដុះឫសបានចំនួនច្រើនបំផុត។ ចំណែកឯការមិនប្រើអរម៉ូនជួយឱ្យឫសលូតលាស់បានវែងល្អ។ នៅពេលប្រើ IBA កំហាប់ខ្ពស់ ឫសដែលដុះមកមានប្រវែងខ្លី (ជាមធ្យម ២ សង់ទីម៉ែត្រ) ធៀបនឹងការមិនប្រើអរម៉ូន។ មជ្ឈដ្ឋានមាន IBA ២.០ មីលីក្រាម/លីត្រ ផ្តល់ចំនួន ២៣ ឫស/ដើម ខណៈមជ្ឈដ្ឋានគ្មានអរម៉ូនផ្តល់ ១៣ ឫស/ដើម តែមានប្រវែងវែងជាង (៣ សង់ទីម៉ែត្រ)។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការសិក្សានេះតម្រូវឱ្យមានមន្ទីរពិសោធន៍បណ្ដុះជាលិការុក្ខជាតិស្តង់ដារ និងសារធាតុគីមីមួយចំនួនសម្រាប់លាយមជ្ឈដ្ឋានចិញ្ចឹម។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះត្រូវបានធ្វើឡើងនៅប្រទេសថៃ ដោយប្រើប្រាស់គ្រាប់ពូជស្រូវ Indica Nang Mol S 4។ ដោយហេតុថាប្រទេសកម្ពុជាមានលក្ខខណ្ឌអាកាសធាតុស្រដៀងគ្នា និងភាគច្រើនសព្វថ្ងៃដាំដុះស្រូវប្រភេទ Indica ទិន្នន័យនៃការសិក្សានេះមានភាពពាក់ព័ន្ធនិងអាចយកមកអនុវត្តជាមូលដ្ឋានគ្រឹះជាមួយពូជស្រូវក្នុងស្រុករបស់កម្ពុជាបានយ៉ាងល្អ។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

បច្ចេកទេសបណ្ដុះជាលិកានេះមានសារៈសំខាន់ខ្លាំងណាស់សម្រាប់ការអភិវឌ្ឍវិស័យកសិកម្មនៅកម្ពុជា ជាពិសេសក្នុងការកែលម្អពូជ និងរក្សាពូជស្រូវសុទ្ធល្អ។

ជារួម ការអនុវត្តបច្ចេកទេសបណ្ដុះជាលិកានេះអាចជួយបង្កើនគុណភាពពូជស្រូវ និងធានាបាននូវសន្តិសុខស្បៀងនៅកម្ពុជាតាមរយៈការបង្កើតពូជដែលលូតលាស់បានល្អ ទោះបីជាត្រូវការទុនវិនិយោគលើមន្ទីរពិសោធន៍បន្តិចក៏ដោយ។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. ការរៀបចំនិងការសម្លាប់មេរោគលើគ្រាប់ពូជ (Sterilization Phase): និស្សិតត្រូវស្វែងយល់ពីការប្រើប្រាស់ Laminar Flow Hood និងអនុវត្តការបកសំបកគ្រាប់ស្រូវ រួចយកទៅលាងសម្លាប់មេរោគជាមួយ Tween-20 និងត្រាំក្នុងសូលុយស្យុង Clorox (Sodium hypochlorite) 70% រយៈពេល ៣-៥ នាទី បន្ទាប់មកលាងទឹកស្អាតដែលបានសម្លាប់មេរោគ (Sterile water) ៣ ដង។
  2. ការរៀបចំមជ្ឈដ្ឋាន និងការបណ្ដុះកាលីស (Media Preparation & Callus Induction): អនុវត្តការលាយមជ្ឈដ្ឋាន MS (Murashige and Skoog) ដោយបន្ថែមអរម៉ូន 2,4-D កំហាប់ 2.0 mg/l និងយកទៅចំហុយសម្លាប់មេរោគដោយ Autoclave។ បន្ទាប់មកដាក់គ្រាប់ស្រូវដែលសម្លាប់មេរោគរួចលើមជ្ឈដ្ឋាននេះ ហើយរក្សាទុកក្នុងបន្ទប់ងងឹត (សីតុណ្ហភាព 25±2°C) រយៈពេល ៤ សប្តាហ៍។
  3. ការបណ្ដុះដើម (Shoot Regeneration): ជ្រើសរើសយកកាលីសដែលមានលក្ខណៈល្អ (ពណ៌លឿងខ្ចី) ទៅបណ្ដុះលើមជ្ឈដ្ឋាន MS ថ្មីដែលមានបន្ថែម Kinetin 1.0 mg/l និង Casein hydrolysate 1.0 g/l។ ដំណាក់កាលនេះត្រូវរក្សាទុកក្រោមពន្លឺ ១៦ ម៉ោងក្នុងមួយថ្ងៃ (កម្រិតពន្លឺ 38 µmol m-2 s-1) រហូតទាល់តែដុះចេញជាដើមស្រូវ។
  4. ការបណ្ដុះឫស (Rooting Phase): នៅពេលដើមស្រូវមានកម្ពស់ប្រហែល ២ សង់ទីម៉ែត្រ ត្រូវកាត់បំបែកដើមនីមួយៗទៅបណ្ដុះក្នុងមជ្ឈដ្ឋាន MS ដែលគ្មានអរម៉ូន ឬបន្ថែម IBA 2.0 mg/l ដើម្បីជម្រុញការលូតលាស់ឫសឱ្យបានច្រើន និងទុកឱ្យលូតលាស់រយៈពេល ៤ សប្តាហ៍។
  5. ការផ្សាំកូនស្រូវ និងការយកទៅដាំក្នុងធម្មជាតិ (Acclimatization): យកកូនស្រូវដែលដុះឫសល្អចេញពីកែវពិសោធន៍ លាងសម្អាតចាហួយចេញ រួចត្រាំក្នុងថ្នាំសម្លាប់ផ្សិត Benomyl 40% ai រយៈពេល ២-៣ នាទី។ បន្ទាប់មកយកទៅដាំក្នុងកូនថាសដែលមានដីភក់ ហើយរក្សាទុកឱ្យស៊ាំនឹងបរិយាកាសធម្មជាតិរយៈពេល ១ ខែមុននឹងយកទៅស្ទូង។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
In Vitro Culture (ការបណ្តុះជាលិកាក្នុងកែវពិសោធន៍) បច្ចេកទេសបណ្តុះកោសិកា ជាលិកា ឬសរីរាង្គរុក្ខជាតិនៅក្នុងកែវ ឬដបពិសោធន៍ដែលគ្មានមេរោគ ដោយផ្គត់ផ្គង់សារធាតុចិញ្ចឹមនិងអរម៉ូនចាំបាច់ក្នុងបរិស្ថានដែលត្រូវបានគ្រប់គ្រងយ៉ាងតឹងរ៉ឹង។ ដូចជាការដាក់ចិញ្ចឹមទារកក្នុងកែវពិសោធន៍ ដោយផ្តល់ចំណីតាមបំពង់សិប្បនិម្មិតដើម្បីឱ្យគេធំធាត់។
Callus (កាលីស ឬ ដុំកោសិកា) ជាដុំកោសិកាដែលមិនទាន់មានរូបរាងជាសរីរាង្គច្បាស់លាស់ (គ្មានស្លឹក គ្មានឫស) ដែលកើតចេញពីការបំបែកខ្លួនយ៉ាងលឿនរបស់កោសិការុក្ខជាតិនៅពេលដែលវាស្ថិតនៅលើមជ្ឈដ្ឋានចិញ្ចឹមដែលមានអរម៉ូនជំរុញ។ ដូចជាដុំដីឥដ្ឋទន់ៗដែលគេត្រៀមទុកសម្រាប់សូនជារូបរាងផ្សេងៗនៅពេលក្រោយ។
Embryogenic callus (កាលីសដែលអាចលូតលាស់ជាអំប្រ៊ីយ៉ុង) ប្រភេទកាលីសពិសេសដែលមានសមត្ថភាពខ្ពស់ក្នុងការលូតលាស់ និងអភិវឌ្ឍខ្លួនទៅជាកូនរុក្ខជាតិថ្មីយ៉ាងពេញលេញ (មានដើមនិងឫស) ដែលផ្ទុយពី non-embryogenic callus ដែលមិនអាចដុះជាដើមបាន។ ដូចជាគ្រាប់ពូជដែលត្រៀមខ្លួនរួចជាស្រេចដើម្បីពន្លកជាដើមថ្មីដ៍រឹងមាំ។
2,4-dichlorophenoxyacetic acid (អរម៉ូន 2,4-D) ជាប្រភេទអរម៉ូនសំយោគក្នុងក្រុម Auxin ដែលគេប្រើប្រាស់ញឹកញាប់បំផុតដើម្បីជំរុញឱ្យកោសិការុក្ខជាតិបំបែកខ្លួនបង្កើតជាកាលីសក្នុងដំណាក់កាលដំបូងនៃការបណ្តុះជាលិកា។ ដូចជាថ្នាំប៉ូវដែលបញ្ជាឱ្យកោសិការុក្ខជាតិបន្តពូជយ៉ាងលឿនដោយមិនទាន់ត្រូវបង្កើតជារូបរាងជារុក្ខជាតិ។
Kinetin (គីនេទីន) ជាអរម៉ូនរុក្ខជាតិក្នុងក្រុម Cytokinin ដែលមានតួនាទីជំរុញការបំបែកកោសិកា និងជួយជំរុញយ៉ាងខ្លាំងដល់កាលីសដើម្បីឱ្យវាដុះចេញជាពន្លក ឬដើមថ្មី។ ដូចជាអ្នកបញ្ជាការដែលប្រាប់ដុំកោសិកាឱ្យឈប់បំបែកខ្លួនផ្តេសផ្តាស ហើយចាប់ផ្តើមបង្កើតជាស្លឹកនិងដើម។
Indolebutyric acid (អរម៉ូន IBA) ជាអរម៉ូនសំយោគក្នុងក្រុម Auxin មួយប្រភេទទៀត ដែលគេនិយមប្រើដើម្បីជំរុញការលូតលាស់ឫសរបស់កូនរុក្ខជាតិមុនពេលយកវាទៅដាំនៅខាងក្រៅ។ ដូចជាជីបំប៉នពិសេសដែលប្រាប់កូនរុក្ខជាតិឱ្យប្រញាប់ចាក់ឫសឱ្យបានវែងនិងច្រើន។
Murashige and Skoog medium (មជ្ឈដ្ឋាន MS) ជារូបមន្តសារធាតុចិញ្ចឹមស្តង់ដារ និងពេញនិយមបំផុត ដែលមានផ្ទុកទៅដោយរ៉ែខនិជ វីតាមីន និងប្រភពកាបូនចាំបាច់សម្រាប់ចិញ្ចឹមជាលិការុក្ខជាតិក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍។ ដូចជារូបមន្តទឹកដោះគោម្សៅដែលមានជីវជាតិគ្រប់គ្រាន់សម្រាប់ទារកលូតលាស់ដោយមិនបាច់ញ៉ាំបាយ។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖