Original Title: Effects of preservation method on fruiting body formation and cordycepin production of Cordyceps militaris culture
Source: doi.org/10.34044/j.anres.2019.53.2.03
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ឥទ្ធិពលនៃវិធីសាស្ត្រថែរក្សាទុកទៅលើការបង្កើតផ្លែ និងការផលិត Cordycepin នៃការបណ្តុះផ្សិត Cordyceps militaris

ចំណងជើងដើម៖ Effects of preservation method on fruiting body formation and cordycepin production of Cordyceps militaris culture

អ្នកនិពន្ធ៖ Natthapong Singpoonga (Naresuan University), Boonsong Sang–on (Naresuan University), Peerasak Chaiprasart (Naresuan University, Chiang Mai University)

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2019 Agriculture and Natural Resources

វិស័យសិក្សា៖ Agriculture

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ការសិក្សានេះដោះស្រាយបញ្ហានៃការថយចុះគុណភាព និងស្ថិរភាពក្នុងការបណ្តុះផ្សិត Cordyceps militaris (ផ្សិតដង្កូវ) ដោយធ្វើការវាយតម្លៃស្វែងរកវិធីសាស្ត្រថែរក្សាមេផ្សិតទុកឱ្យបានល្អបំផុតក្នុងរយៈពេលយូរ។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ អ្នកស្រាវជ្រាវបានធ្វើការប្រៀបធៀបវិធីសាស្ត្រថែរក្សាទុកចំនួន ៨ ផ្សេងៗគ្នា លើវប្បធម៌មេផ្សិតរយៈពេល ៤ ខែ មុននឹងយកវាទៅបណ្តុះជាផ្លែផ្សិត។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Freezing at -80°C
ការបង្កកនៅសីតុណ្ហភាព -80°C
រក្សាគុណភាពមេផ្សិត អត្រារស់រាន និងបរិមាណសារធាតុ Cordycepin បានល្អឥតខ្ចោះក្នុងរយៈពេលយូរ។ សូលុយស្យុងគ្លីសេរ៉ុលជួយការពារការខូចខាតកោសិកាពីការកកជាទឹកកក។ ត្រូវការឧបករណ៍ទំនើប (ម៉ាស៊ីនបង្កកតម្លៃថ្លៃ) និងប្រឈមហានិភ័យខូចខាតនៅពេលមានបញ្ហាដាច់ចរន្តអគ្គិសនី។ ផ្តល់ទិន្នផលផ្លែផ្សិត ១១២.៦៦ ដើម/ដប និងកម្រិត Cordycepin ខ្ពស់បំផុត (៣.៥១ mg/g)។
Chilling at 5°C in 10% glycerol
ការក្លាសេនៅ 5°C ក្នុងសូលុយស្យុងគ្លីសេរ៉ុល 10%
មានតម្លៃថោក ងាយស្រួលអនុវត្តដោយគ្រាន់តែប្រើប្រាស់ទូទឹកកកធម្មតា និងអាចថែរក្សាលក្ខណៈជីវសាស្ត្រ និងទិន្នផលបានល្អប្រសើរ។ ប្រហែលជាមិនអាចរក្សាទុកបានក្នុងរយៈពេលច្រើនឆ្នាំដូចការបង្កកនៅ -80°C នោះទេ (ត្រូវការការសិក្សាបន្ថែមសម្រាប់រយៈពេលវែងជាង ៤ខែ)។ ផ្តល់ទិន្នផលផ្លែផ្សិត ១១១.៣៣ ដើម/ដប និងកម្រិត Cordycepin (៣.៤៥ mg/g)។
Chilling at 5°C on dried rice grains (35°C)
ការរក្សាទុកលើគ្រាប់អង្ករសម្ងួត 35°C នៅ 5°C
ជាវិធីសាស្ត្រចំណាយតិចបំផុត ប្រើប្រាស់វត្ថុធាតុដើមក្នុងស្រុក (អង្ករ) ងាយស្រួលសម្រាប់កសិករ និងរក្សាទិន្នផលផ្លែបានល្អ។ ងាយខូចគុណភាព ឬងាប់កោសិកាប្រសិនបើសីតុណ្ហភាពសម្ងួតអង្ករខ្ពស់ពេក (ឧទាហរណ៍ 55°C) ដែលធ្វើឱ្យបាត់បង់សំណើមចាំបាច់។ ផ្តល់ទិន្នផលផ្លែផ្សិត ១១០.៣៣ ដើម/ដប និងកម្រិត Cordycepin (៣.៣៥ mg/g)។
Subculturing
ការបណ្តុះបន្ត ឬចម្លងមេបន្តបន្ទាប់ (Subculturing)
ជាវិធីសាស្ត្រប្រពៃណីដែលកសិករខ្នាតតូចតែងតែប្រើប្រាស់ និងងាយស្រួលបំផុតក្នុងការបន្តពូជ។ ការចម្លងបន្តច្រើនដងធ្វើឱ្យខូចគុណភាពហ្សែន ទំហំផ្លែផ្សិតតូច និងធ្លាក់ចុះបរិមាណសារធាតុសកម្ម Cordycepin យ៉ាងធ្ងន់ធ្ងរ។ នៅជំនាន់ទី៣ ទិន្នផលធ្លាក់ចុះមកត្រឹម ៦៦.៦៦ ដើម/ដប និង Cordycepin ធ្លាក់ដល់កម្រិតទាបបំផុត (០.៥៤ mg/g)។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការសិក្សានេះបានបង្ហាញពីតម្រូវការធនធានដែលប្រែប្រួលពីតម្លៃថោកបំផុត (ទូទឹកកកធម្មតា និងអង្ករ) រហូតដល់ឧបករណ៍បន្ទប់ពិសោធន៍តម្លៃថ្លៃ អាស្រ័យលើវិធីសាស្ត្រដែលត្រូវបានជ្រើសរើស។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះត្រូវបានអនុវត្តនៅប្រទេសថៃ ដោយប្រើប្រាស់អង្ករសក្នុងស្រុក (Sao-Hai) និងពូជផ្សិត Cordyceps militaris ពីក្រុមហ៊ុនពាណិជ្ជកម្មថៃ។ ទិន្នន័យនេះមានសារៈសំខាន់ និងស័ក្តិសមខ្លាំងសម្រាប់កម្ពុជា ដោយសារប្រទេសទាំងពីរមានអាកាសធាតុ លក្ខខណ្ឌកសិកម្ម និងការប្រើប្រាស់ពូជស្រូវស្រដៀងគ្នា ដែលអនុញ្ញាតឱ្យកសិករខ្មែរអាចយកបច្ចេកទេសនេះមកអនុវត្តបានដោយងាយស្រួល។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

វិធីសាស្ត្រដែលបានលើកឡើងក្នុងស្រាវជ្រាវនេះមានអត្ថប្រយោជន៍ និងសក្តានុពលយ៉ាងខ្លាំងសម្រាប់ការអភិវឌ្ឍវិស័យបណ្តុះផ្សិតឱសថនៅប្រទេសកម្ពុជា។

ការផ្លាស់ប្តូរពីទម្លាប់នៃការបណ្តុះបន្ត (Subculturing) មកប្រើប្រាស់វិធីសាស្ត្រក្លាសេកម្រិត 5°C ជាមួយគ្លីសេរ៉ុល ឬអង្ករសម្ងួត នឹងជួយកសិករខ្មែរក្នុងការរក្សាគុណភាពផ្សិតឱសថ និងបង្កើនការប្រកួតប្រជែងលើទីផ្សារយ៉ាងមានប្រសិទ្ធភាព។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. រៀបចំមជ្ឈដ្ឋានបណ្តុះ និងអនុវត្តបច្ចេកទេសปลอดមេរោគ: ស្វែងយល់និងអនុវត្តបច្ចេកទេសปลอดមេរោគ (Aseptic technique) ព្រមទាំងរៀបចំមជ្ឈដ្ឋានបណ្តុះ Potato Dextrose Agar (PDA) និង Potato Dextrose Broth (PDB) សម្រាប់ចិញ្ចឹមមេផ្សិតដំបូង។
  2. សាកល្បងបច្ចេកទេសរក្សាទុកតម្លៃទាប: អនុវត្តការរក្សាទុកមេផ្សិត Cordyceps militaris ក្នុងទូទឹកកកធម្មតា (5°C) ដោយបែងចែកជាពីរក្រុម៖ មួយប្រើប្រាស់សូលុយស្យុង Glycerol 10% និងមួយទៀតប្រើគ្រាប់អង្ករសម្ងួតនៅសីតុណ្ហភាពចន្លោះ 35°C ទៅ 45°C រយៈពេល ៤ ខែ។
  3. តាមដានការលូតលាស់ និងការបង្កើតផ្លែផ្សិត: បន្ទាប់ពីររក្សាទុក ត្រូវយកមេផ្សិតមកបណ្តុះលើមជ្ឈដ្ឋានអង្ករ ដើម្បីសង្កេតមើលអត្រារស់រាន ទំហំកូឡូនី និងកត់ត្រាទិន្នផលផ្លែផ្សិតដែលទទួលបានធៀបនឹងពូជដើម។
  4. វិភាគកម្រិតសារធាតុសកម្ម: សហការជាមួយមន្ទីរពិសោធន៍ក្នុងស្រុក (ដូចជាវិទ្យាស្ថានប៉ាស្ទ័រ ឬ RUA) ដែលមានម៉ាស៊ីន HPLC ដើម្បីវាយតម្លៃកម្រិតសារធាតុ Cordycepin នៅក្នុងផ្លែផ្សិតដែលបានប្រមូលផល។
  5. ពង្រីកផលិតកម្មពាណិជ្ជកម្ម: ជ្រើសរើសវិធីសាស្ត្រដែលរក្សាគុណភាពនិងបរិមាណ Cordycepin បានល្អជាងគេ ដើម្បីធ្វើការពង្រីកផលិតកម្មជាទ្រង់ទ្រាយធំ (Scale-up) និងរៀបចំយុទ្ធសាស្ត្រទីផ្សារលក់ផលិតផល។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Mycelia (សរសៃមេផ្សិត) គឺជាផ្នែកលូតលាស់នៃផ្សិតដែលមានទម្រង់ជាសរសៃឆ្មារៗពណ៌ស ដែលមានតួនាទីស្រូបយកសារធាតុចិញ្ចឹមពីមជ្ឈដ្ឋានជុំវិញដើម្បីលូតលាស់ និងរៀបចំខ្លួនបង្កើតជាផ្លែផ្សិត។ ប្រៀបដូចជាឫសរបស់រុក្ខជាតិដែលចាក់ចូលទៅក្នុងដីដើម្បីស្រូបយកជីជាតិ មុនពេលវាដុះចេញជាដើម និងផ្លែ។
Cordycepin (សារធាតុករឌីសេពីន) ជាសារធាតុសកម្មជីវសាស្ត្រ (Bioactive compound) ដ៏សំខាន់មួយប្រភេទដែលចម្រាញ់ចេញពីផ្សិត Cordyceps ដែលវាមានមុខងារជាឱសថជួយប្រឆាំងនឹងវីរុស មហារីក ជំងឺទឹកនោមផ្អែម និងការរលាកផ្សេងៗ។ ប្រៀបដូចជាវីតាមីនឬថ្នាំស័ក្តិសិទ្ធិធម្មជាតិដែលលាក់ខ្លួននៅក្នុងផ្លែផ្សិត សម្រាប់យកមកផលិតជាថ្នាំព្យាបាលជំងឺ។
Subculturing (ការចម្លងបន្តមេផ្សិត) គឺជាបច្ចេកទេសផ្ទេរកោសិកា ឬសរសៃមេផ្សិតពីមជ្ឈដ្ឋានចាស់ដែលខ្វះសារធាតុចិញ្ចឹម ទៅកាន់មជ្ឈដ្ឋានថ្មីដើម្បីឱ្យវាបន្តការលូតលាស់និងរស់រានបានយូរ ប៉ុន្តែការធ្វើបែបនេះច្រើនដងពេកអាចធ្វើឱ្យខូចគុណភាពហ្សែន។ ប្រៀបដូចជាការកាត់មែករុក្ខជាតិពីដើមចាស់ យកទៅដាំក្នុងផើងដីថ្មីដើម្បីឱ្យវាបន្តរស់ ប៉ុន្តែបើកាត់តៗគ្នាច្រើនជំនាន់ពេក ដើមថ្មីនឹងលែងសូវផ្តល់ផ្លែល្អ។
Cryoprotectant (សារធាតុការពារការកកកោសិកា) ជាសារធាតុរាវ (ឧទាហរណ៍ដូចជា Glycerol) ដែលត្រូវបានគេប្រើប្រាស់សម្រាប់លាយជាមួយកោសិការបស់មេផ្សិតមុនពេលយកទៅបង្កក ដើម្បីការពារកុំឱ្យមានការកកជាគ្រាប់ទឹកកកស្រួចៗដែលអាចចាក់ទម្លុះធ្វើឱ្យងាប់កោសិកា។ ប្រៀបដូចជាទឹកស្អំម៉ាស៊ីន (Coolant) ដែលគេចាក់ចូលក្នុងរថយន្ត ដើម្បីការពារកុំឱ្យទឹកកកក្នុងម៉ាស៊ីនពេលអាកាសធាតុត្រជាក់ខ្លាំង។
Fruiting body (ផ្លែផ្សិត ឬតួផ្សិត) គឺជាផ្នែកនៃផ្សិតដែលដុះលេចឡើងមកក្រៅ ដើម្បីបង្កើតជាស្ព័រ (Spore) សម្រាប់ការបន្តពូជ និងជាផ្នែកដែលស្តុកទុកសារធាតុចិញ្ចឹមនិងឱសថច្រើនជាងគេ។ ប្រៀបដូចជាផ្លែប៉ោមដែលដុះចេញពីដើមប៉ោម ដែលជាផ្នែកសម្រាប់យើងប្រមូលផលយកទៅបរិភោគ។
High performance liquid chromatography / HPLC (ក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីអង្គធាតុរាវកម្រិតខ្ពស់) គឺជាម៉ាស៊ីនវិភាគកម្រិតខ្ពស់នៅក្នុងបន្ទប់ពិសោធន៍ ដែលមានតួនាទីញែកធាតុផ្សំ កំណត់អត្តសញ្ញាណ និងវាស់ស្ទង់បរិមាណជាក់លាក់នៃសារធាតុនីមួយៗ (ដូចជាបរិមាណ Cordycepin) ដែលមាននៅក្នុងវត្ថុរាវ។ ប្រៀបដូចជាម៉ាស៊ីនច្រោះដ៏ឆ្លាតវៃ ដែលអាចរាប់បានយ៉ាងច្បាស់ថានៅក្នុងទឹកក្រូចមួយកែវ មានជាតិស្ករចំនួនប៉ុន្មានគ្រាប់ និងមានជាតិពណ៌ចំនួនប៉ុន្មាន។
Viability (អត្រារស់រានមានជីវិត) គឺជារង្វាស់ដែលបញ្ជាក់ពីសមត្ថភាពរបស់កោសិកាមេផ្សិតក្នុងការបន្តរស់រានមានជីវិត និងអាចលូតលាស់បានឡើងវិញ បន្ទាប់ពីឆ្លងកាត់ដំណើរការរក្សាទុកក្នុងសីតុណ្ហភាពត្រជាក់ ឬការសម្ងួតក្នុងរយៈពេលយូរ។ ប្រៀបដូចជាការវាស់ស្ទង់មើលថា តើគ្រាប់ពូជដែលយើងទុកក្នុងទូទឹកកកអស់១ឆ្នាំ អាចយកមកសាបព្រោះដុះបានប៉ុន្មានភាគរយ។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖