Original Title: Screening of Probiotic Lactic Acid Bacteria from Piglet Feces
Source: li01.tci-thaijo.org
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការពិនិត្យស្វែងរកបាក់តេរីអាស៊ីតឡាក់ទិក (Lactic Acid Bacteria) ដែលមានលក្ខណៈជាប្រូបាយអូទិកពីលាមកកូនជ្រូក

ចំណងជើងដើម៖ Screening of Probiotic Lactic Acid Bacteria from Piglet Feces

អ្នកនិពន្ធ៖ Buasai Petsuriyawong (Department of Microbiology, Faculty of Science, King Mongkut’s University of Technology Thonburi, Thailand), Nongpanga Khunajakr (Department of Microbiology, Faculty of Science, King Mongkut’s University of Technology Thonburi, Thailand)

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2011, Kasetsart J. (Nat. Sci.) 45

វិស័យសិក្សា៖ Microbiology

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ការស្រាវជ្រាវនេះដោះស្រាយបញ្ហានៃការប្រើប្រាស់ថ្នាំអង់ទីប៊ីយោទិក (Antibiotics) ហួសកម្រិតនៅក្នុងការចិញ្ចឹមសត្វ ដោយស្វែងរកប្រូបាយអូទិកថ្មីៗពីលាមកកូនជ្រូកដើម្បីប្រើប្រាស់ជាសារធាតុបន្ថែមក្នុងចំណីសត្វជំនួសវិញ។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ ការសិក្សានេះបានធ្វើការបំបែក និងវិភាគបាក់តេរីអាស៊ីតឡាក់ទិក (LAB) ជាច្រើនប្រភេទ ដោយឆ្លងកាត់ការធ្វើតេស្តលក្ខណៈសម្បត្តិជីវសាស្រ្តផ្សេងៗនៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Biochemical Identification (API 50 CHL kit)
ការកំណត់អត្តសញ្ញាណតាមបែបជីវគីមី (ប្រើឈុត API 50 CHL)
ងាយស្រួលប្រើប្រាស់ មានលក់នៅលើទីផ្សារ និងជួយកំណត់ទម្រង់នៃការបំបែកជាតិស្ករ (Carbohydrate fermentation) របស់បាក់តេរី។ មិនមានភាពសុក្រឹតគ្រប់គ្រាន់ក្នុងការកំណត់អត្តសញ្ញាណបាក់តេរីខ្លះដល់កម្រិតប្រភេទ (Species) នោះទេ ដោយការសិក្សានេះបានបង្ហាញថាវាមានការភាន់ច្រឡំក្នុងការកំណត់ឈ្មោះ។ កំណត់អត្តសញ្ញាណខុសចំពោះបាក់តេរីសក្តានុពលទាំង ៥ ប្រភេទ ដោយកំណត់ជា Leuconostoc lactis និង Lactobacillus fermentum
Molecular Identification (16S rRNA gene sequence analysis)
ការកំណត់អត្តសញ្ញាណតាមបែបម៉ូលេគុល (ការវិភាគលំដាប់ហ្សែន 16S rRNA)
មានភាពសុក្រឹត និងជាក់លាក់ខ្ពស់បំផុតក្នុងការកំណត់អត្តសញ្ញាណបាក់តេរីដល់កម្រិត Species ជាងវិធីសាស្ត្រជីវគីមីប្រពៃណី។ ត្រូវការឧបករណ៍ទំនើបៗ និងចំណាយខ្ពស់ ព្រមទាំងទាមទារអ្នកមានជំនាញច្បាស់លាស់ផ្នែកម៉ូលេគុលជីវសាស្ត្រ។ បានកំណត់អត្តសញ្ញាណយ៉ាងត្រឹមត្រូវនូវបាក់តេរី Lactobacillus amylovorus ចំនួន ១ និង Lactobacillus reuteri ចំនួន ៤ ជាមួយនឹងភាពដូចគ្នា ៩៩% (99% homology)។
In vitro Probiotic Screening Assays
ការធ្វើតេស្តវាយតម្លៃលក្ខណៈប្រូបាយអូទិកក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍
ជាវិធីសាស្ត្រចំណាយតិច និងមានប្រសិទ្ធភាពក្នុងការចម្រាញ់បាក់តេរីរាប់រយប្រភេទ មុននឹងឈានដល់ការសាកល្បងផ្ទាល់លើសត្វ។ វាត្រឹមតែជាការក្លែងធ្វើលក្ខខណ្ឌក្រពះពោះវៀនប៉ុណ្ណោះ មិនអាចធានាប្រសិទ្ធភាព ១០០% ពេលដាក់ឲ្យសត្វស៊ីជាក់ស្តែងនោះទេ។ បានចម្រាញ់បាក់តេរីចំនួន ៣១៧ ឲ្យនៅសល់ត្រឹមតែ ៥ ប្រភេទ ដែលមានសមត្ថភាពធន់នឹងអាស៊ីត ទឹកប្រមាត់ និងអាចតោងជាប់កោសិកាពោះវៀន។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការសិក្សានេះទាមទារធនធានមន្ទីរពិសោធន៍មីក្រូជីវសាស្ត្រ និងម៉ូលេគុលកម្រិតមធ្យមទៅខ្ពស់ ជាពិសេសសម្រាប់ការវិភាគហ្សែន។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះត្រូវបានធ្វើឡើងដោយសាកលវិទ្យាល័យនៅទីក្រុងបាងកក ប្រទេសថៃ ដោយប្រមូលសំណាកលាមកពីកូនជ្រូកចំនួន ១៣៦ សំណាក។ ដោយសារលក្ខខណ្ឌអាកាសធាតុ និងបរិស្ថាននៃការចិញ្ចឹមជ្រូកនៅប្រទេសថៃមានភាពស្រដៀងគ្នាច្រើនទៅនឹងប្រទេសកម្ពុជា លទ្ធផលនៃការសិក្សានេះមានតម្លៃខ្ពស់សម្រាប់ការអនុវត្តផ្ទាល់។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ កត្តាចំណី និងអនាម័យកសិដ្ឋានអាចធ្វើឱ្យប្រភេទបាក់តេរីមូលដ្ឋានមានភាពខុសគ្នាបន្តិចបន្តួច។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

វិធីសាស្ត្រ និងការរកឃើញនៅក្នុងការស្រាវជ្រាវនេះមានអត្ថប្រយោជន៍យ៉ាងខ្លាំងសម្រាប់វិស័យកសិកម្មនៅកម្ពុជា ជាពិសេសក្នុងបរិបទនៃការកាត់បន្ថយការប្រើប្រាស់ថ្នាំអង់ទីប៊ីយោទិក។

ការផ្លាស់ប្តូរពីការប្រើប្រាស់ថ្នាំអង់ទីប៊ីយោទិក មកប្រើប្រាស់ប្រូបាយអូទិកដែលចម្រាញ់ចេញពីសត្វក្នុងស្រុក នឹងជួយលើកកម្ពស់សុខភាពសត្វ និងកាត់បន្ថយបញ្ហាស៊ាំនឹងថ្នាំយ៉ាងមានប្រសិទ្ធភាពនៅកម្ពុជា។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. សិក្សាពីបច្ចេកទេសបំបែក និងបណ្ដុះបាក់តេរី: អនុវត្តការបណ្ដុះបាក់តេរីអាស៊ីតឡាក់ទិក (LAB) ដោយប្រើប្រាស់មជ្ឈដ្ឋាន MRS agar ដែលមានបន្ថែម CaCO3 និងអនុវត្តបច្ចេកទេស Dilution plate count នៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍។
  2. អនុវត្តការធ្វើតេស្តសកម្មភាពប្រឆាំងអតិសុខុមប្រាណ: រៀនធ្វើតេស្តដោយប្រើវិធីសាស្ត្រ Agar well diffusion method ដើម្បីពិនិត្យសមត្ថភាពរបស់ LAB ក្នុងការសម្លាប់ ឬទប់ស្កាត់ការលូតលាស់របស់បាក់តេរីបង្កជំងឺផ្សេងៗ (ដូចជា SalmonellaE. coli)។
  3. វាយតម្លៃលក្ខណៈសម្បត្តិប្រូបាយអូទិក (In vitro): សាកល្បងបាក់តេរីដែលរើសបានទៅក្នុងលក្ខខណ្ឌក្លែងធ្វើជាក្រពះ (អាស៊ីត pH 2.0-3.0) និងពោះវៀនតូច (ទឹកប្រមាត់ 0.3% oxgall) រយៈពេល ៣ ទៅ ៦ ម៉ោង ដើម្បីវាស់ស្ទង់អត្រារស់រានមានជីវិត។
  4. ប្រើប្រាស់បច្ចេកទេសម៉ូលេគុលសម្រាប់ការកំណត់អត្តសញ្ញាណ: ស្វែងយល់ពីការចម្រាញ់ DNA និងការប្រើប្រាស់បច្ចេកទេស PCR ជាមួយនឹង Primer 27f និង 1525r សម្រាប់ការចាប់យកលំដាប់ហ្សែន 16S rDNA។
  5. វិភាគទិន្នន័យ DNA ជាមួយកម្មវិធីជីវព័ត៌មានវិទ្យា: យកលទ្ធផលនៃលំដាប់ DNA (Sequence) ទៅវិភាគដោយប្រើប្រាស់កម្មវិធី BLAST របស់ស្ថាប័ន NCBI លើប្រព័ន្ធអ៊ីនធឺណិត ដើម្បីផ្ទៀងផ្ទាត់ និងស្វែងរកឈ្មោះបាក់តេរីជាក់លាក់កម្រិត Species។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Lactic Acid Bacteria (LAB) (បាក់តេរីអាស៊ីតឡាក់ទិក) ក្រុមបាក់តេរីដែលមានសមត្ថភាពផលិតអាស៊ីតឡាក់ទិក (Lactic acid) តាមរយៈការបំបែកជាតិស្ករ។ នៅក្នុងការអនុវត្តជាក់ស្តែង បាក់តេរីទាំងនេះត្រូវបានគេប្រើប្រាស់ជាប្រូបាយអូទិក ព្រោះវាជួយបញ្ចុះកម្រិត pH ក្នុងពោះវៀន និងទប់ស្កាត់ការលូតលាស់របស់បាក់តេរីបង្កជំងឺ។ ដូចជាកងទ័ពល្អប្រចាំការក្នុងពោះវៀន ដែលបញ្ចេញសារធាតុជូរ (អាស៊ីត) ដើម្បីដេញមេរោគអាក្រក់មិនឲ្យរស់នៅបាន។
Probiotic (ប្រូបាយអូទិក / អតិសុខុមប្រាណមានប្រយោជន៍) អតិសុខុមប្រាណរស់ (ជាទូទៅគឺបាក់តេរី ឬផ្សិត) ដែលផ្តល់ផលប្រយោជន៍ដល់សុខភាពម៉ាស៊ីន (មនុស្ស ឬសត្វ) នៅពេលដែលត្រូវបានផ្តល់ឲ្យក្នុងបរិមាណសមស្រប។ ពួកវាធ្វើការដោយជួយសម្រួលការរំលាយអាហារ ពង្រឹងប្រព័ន្ធភាពស៊ាំ និងកម្ចាត់មេរោគក្នុងក្រពះពោះវៀន។ ដូចជាកងកម្លាំងជំនួយដែលយើងបញ្ជូនចូលទៅក្នុងរាងកាយសត្វ ដើម្បីជួយថែរក្សាសុខភាពក្រពះពោះវៀនឲ្យរឹងមាំ និងមិនងាយឈឺ។
Bile salt hydrolase (BSH) (អង់ស៊ីមបំបែកអំបិលទឹកប្រមាត់) ជាអង់ស៊ីមមួយប្រភេទដែលផលិតដោយបាក់តេរីប្រូបាយអូទិកមួយចំនួន។ វាមានតួនាទីបំបែកអំបិលទឹកប្រមាត់ក្នុងពោះវៀនតូច ដែលជួយឲ្យបាក់តេរីទាំងនោះអាចរស់រានមានជីវិតបាន (ធន់នឹងទឹកប្រមាត់) និងថែមទាំងមានឥទ្ធិពលជួយបញ្ចុះកម្រិតកូឡេស្តេរ៉ុល (Cholesterol) ក្នុងឈាមទៀតផង។ ដូចជាអាវក្រោះវេទមន្តដែលជួយការពារបាក់តេរីល្អៗ មិនឲ្យរលាយស្លាប់នៅពេលជួបនឹងទឹកប្រមាត់ដ៏កាចសាហាវនៅក្នុងពោះវៀន។
16S rDNA sequence analysis (ការវិភាគលំដាប់ហ្សែន 16S rDNA) ជាបច្ចេកទេសម៉ូលេគុលជីវសាស្ត្រមួយដែលគេប្រើដើម្បីកំណត់អត្តសញ្ញាណប្រភេទបាក់តេរីឲ្យបានច្បាស់លាស់ និងសុក្រឹតបំផុត ដោយធ្វើការអាន និងប្រៀបធៀបកូដសេនេទិច (DNA) នៃផ្នែក 16S ដែលមានលក្ខណៈពិសេសខុសៗគ្នារវាងបាក់តេរីនីមួយៗ។ ដូចជាការស្កេនក្រអៅដៃ ឬការអានបាកូដ (Barcode) របស់មនុស្សម្នាក់ៗ ដើម្បីដឹងច្បាស់ថាគាត់ឈ្មោះអ្វី និងមានប្រវត្តិមកពីណា។
Simulated gastric and intestinal fluids (សូលុយស្យុងក្លែងធ្វើជាទឹកក្រពះ និងទឹកពោះវៀន) ជាសារធាតុរាវដែលផ្សំឡើងនៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ (មានផ្ទុកអាស៊ីតកម្រិត pH ទាប ឬទឹកប្រមាត់) ដើម្បីយកមកត្រាប់តាមលក្ខខណ្ឌជាក់ស្តែងនៃប្រព័ន្ធរំលាយអាហាររបស់សត្វ។ វាត្រូវបានប្រើសម្រាប់សាកល្បងមើលថាតើបាក់តេរីអាចរស់បានឬអត់មុននឹងយកទៅឲ្យសត្វស៊ីផ្ទាល់។ ដូចជាទីលានហ្វឹកហាត់កងទ័ពក្លែងក្លាយ ដែលបង្កើតឡើងដើម្បីសាកល្បងភាពធន់របស់ទាហាន (បាក់តេរី) មុននឹងបញ្ជូនទៅសមរភូមិពិតប្រាកដក្នុងពោះវៀនសត្វ។
Antibiotic susceptibility (ភាពងាយរងគ្រោះ ឬភាពស៊ាំនឹងថ្នាំអង់ទីប៊ីយោទិក) ជាការធ្វើតេស្តដើម្បីវាស់ស្ទង់ថាតើបាក់តេរីមួយប្រភេទអាចត្រូវបានសម្លាប់ដោយថ្នាំអង់ទីប៊ីយោទិក (Antibiotic) ឬមួយក៏វាមានភាពស៊ាំ។ សម្រាប់ប្រូបាយអូទិក ការមានភាពស៊ាំនឹងថ្នាំមួយចំនួនគឺជាចំណុចល្អ ព្រោះវាអនុញ្ញាតឲ្យគេប្រើប្រូបាយអូទិកនោះស្របពេលសត្វកំពុងលេបថ្នាំព្យាបាលជំងឺបាន។ ដូចជាការធ្វើតេស្តសាកល្បងបាញ់គ្រាប់កាំភ្លើង (ថ្នាំពេទ្យ) ទៅលើវត្ថុណាមួយ ដើម្បីចង់ដឹងថាវាអាចធ្លុះ (ស្លាប់) ឬមានអាវក្រោះការពារ (រស់)។
API 50 CHL kit (ឈុតសាកល្បង API 50 CHL) ជាឈុតឧបករណ៍ធ្វើតេស្តរហ័សតាមបែបជីវគីមី ដែលប្រើសម្រាប់កំណត់អត្តសញ្ញាណបាក់តេរី (ពិសេស Lactobacillus) ដោយពិនិត្យមើលសមត្ថភាពរបស់វាក្នុងការស៊ី និងបំបែកជាតិស្ករ (Carbohydrates) ចំនួន ៥០ ប្រភេទផ្សេងៗគ្នា។ ដូចជាការយកម្ហូប ៥០ មុខផ្សេងៗគ្នាមកឲ្យមនុស្សម្នាក់ញ៉ាំ ដើម្បីទាយមើលថាគាត់ជាជនជាតិអ្វីដោយផ្អែកលើចំណូលចិត្តម្ហូបរបស់គាត់។
Epithelial cells adherence (ការតោងជាប់កោសិកាស្រទាប់ខាងក្នុង) ជាសមត្ថភាពរបស់បាក់តេរីប្រូបាយអូទិកក្នុងការតោងភ្ជាប់ខ្លួនវាទៅនឹងកោសិកាស្រទាប់ខាងក្នុងនៃជញ្ជាំងពោះវៀន។ ដំណើរការនេះជួយការពារមិនឲ្យបាក់តេរីបង្កជំងឺមានកន្លែងតោង (ប្រកួតប្រជែងយកកន្លែង) និងជួយឲ្យប្រូបាយអូទិករស់នៅបន្តពូជក្នុងពោះវៀនបានយូរ។ ដូចជាសមត្ថភាពរបស់ដើមវល្លិ៍ក្នុងការតោងជាប់នឹងជញ្ជាំងផ្ទះយ៉ាងរឹងមាំ ដើម្បីកុំឲ្យខ្យល់បក់ប៉ើង ឬសត្វល្អិតផ្សេងៗមកតោងដណ្តើមយកកន្លែង។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖