Original Title: In-vitro Culturability of Soybean Cultivars
Source: doi.org/10.31817/vjas.2024.7.2.03
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

សមត្ថភាពបណ្ដុះកោសិកាក្នុងបំពង់សាកល្បង (In-vitro) នៃពូជសណ្តែកសៀង

ចំណងជើងដើម៖ In-vitro Culturability of Soybean Cultivars

អ្នកនិពន្ធ៖ Hoang Duc Nhat Linh (Vietnam National University of Agriculture), Vu Thi Thuy Hang (Vietnam National University of Agriculture), Dinh Truong Son (Vietnam National University of Agriculture), Le Thi Tuyet Cham (Vietnam National University of Agriculture)

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 2024, Vietnam Journal of Agricultural Sciences

វិស័យសិក្សា៖ Agronomy

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ការបណ្ដុះកោសិកាសណ្តែកសៀងក្នុងបំពង់សាកល្បង (In-vitro) គឺជារឿងចាំបាច់សម្រាប់ការបង្កាត់ពូជ និងបំប្លែងហ្សែន ប៉ុន្តែវាមានការលំបាកដោយសារពូជ និងប្រភេទកោសិកាឆ្លើយតបខុសៗគ្នាចំពោះមជ្ឈដ្ឋានចិញ្ចឹម។ ការសិក្សានេះមានគោលបំណងវាយតម្លៃសមត្ថភាព និងស្វែងរកលក្ខខណ្ឌដ៏ល្អបំផុតក្នុងការបណ្ដុះកោសិកាសម្រាប់ពូជសណ្តែកសៀងចំនួន៣។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ ការស្រាវជ្រាវនេះបានធ្វើការពិសោធន៍លើប្រភេទកោសិកាដើម មជ្ឈដ្ឋានចិញ្ចឹម និងអរម៉ូនលូតលាស់ផ្សេងៗគ្នា ដើម្បីវាយតម្លៃអត្រានៃការដុះកាលុស (Callus) ពន្លក និងឫស។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
MS Medium supplemented with BA (Shoot tips & Cotyledons)
ការប្រើប្រាស់មជ្ឈដ្ឋាន MS បន្ថែមអរម៉ូន BA លើចុងពន្លកនិងកូទីលេដុង
ផ្តល់អត្រាដុះកាលុសខ្ពស់រហូតដល់ ១០០% និងជំរុញការដុះពន្លកបានយ៉ាងល្អ។ កាលុសដែលទទួលបានមានទំហំធំនិងមានពណ៌បៃតងល្អ ដែលស័ក្តិសមបំផុតសម្រាប់ការបន្តពូជ។ កំហាប់ BA ខ្ពស់ពេក (លើសពី ៣ mg/L) នឹងរារាំងដល់ការដុះឫស និងធ្វើឱ្យពន្លកដែលដុះមកខ្សោយឬខ្លីពេក។ អត្រាដុះកាលុស ១០០% និងអត្រាដុះពន្លកប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់នៅកំហាប់ BA ពី ២ ទៅ ៣ mg/L។
GB5 Medium with BA & TDZ
ការប្រើប្រាស់មជ្ឈដ្ឋាន GB5 បន្ថែមអរម៉ូន BA និង TDZ
អាចផ្តល់អត្រានៃការដុះកាលុសបានខ្ពស់ប្រហាក់ប្រហែលនឹងមជ្ឈដ្ឋាន MS ដែរ។ ការរួមបញ្ចូលគ្នារវាង BA និង TDZ បានរារាំងទាំងស្រុងដល់ការកកើតពន្លកនិងឫស ហើយកាលុសដែលទទួលបានមានទំហំតូចនិងមានពណ៌ត្នោត។ អត្រាដុះកាលុស ៩៥.៥% ប៉ុន្តែអត្រាដុះពន្លកនិងឫសធ្លាក់ចុះដល់ ០% នៅពេលមានវត្តមាន TDZ។
Hypocotyl segments as explants
ការប្រើប្រាស់អង្កត់អ៊ីប៉ូកូទីលជាកោសិកាដើម
ងាយស្រួលក្នុងការកាត់យកពីកូនរុក្ខជាតិ និងនៅតែអាចបង្កើតកាលុសបានក្នុងកម្រិតមធ្យមទៅខ្ពស់។ មានសមត្ថភាពទាបខ្លាំងក្នុងការវិវឌ្ឍទៅជាពន្លក បើធៀបនឹងការប្រើប្រាស់ចុងពន្លក ឬកូទីលេដុង។ អត្រាដុះពន្លកទាបបំផុតត្រឹមតែ ៤.០% ប៉ុណ្ណោះ ដែលមិនស័ក្តិសមសម្រាប់ការបណ្ដុះពន្លកឡើងវិញទេ។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការស្រាវជ្រាវនេះទាមទារឱ្យមានបន្ទប់ពិសោធន៍បណ្ដុះកោសិការុក្ខជាតិដែលមានឧបករណ៍ទប់ស្កាត់មេរោគ និងសារធាតុគីមីជីវសាស្ត្រស្តង់ដារ។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះត្រូវបានធ្វើឡើងនៅក្នុងប្រទេសវៀតណាម ដោយប្រើប្រាស់ពូជសណ្តែកសៀងក្នុងស្រុករបស់វៀតណាមផ្ទាល់ (DT2008, ĐT35 និង VNUAĐ2)។ ដោយសារតែសមត្ថភាពនៃការបណ្ដុះកោសិការុក្ខជាតិមានការពឹងផ្អែកយ៉ាងខ្លាំងទៅលើប្រភេទពូជ (Genotype-dependent) លទ្ធផលនេះអាចនឹងមានភាពខុសគ្នាបើអនុវត្តលើពូជសណ្តែកសៀងដែលដាំដុះនៅប្រទេសកម្ពុជា។ ដូច្នេះ វាទាមទារឱ្យមានការសាកល្បងផ្ទៀងផ្ទាត់ឡើងវិញជាមួយពូជក្នុងស្រុក។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

ពិធីការនេះផ្តល់នូវមូលដ្ឋានគ្រឹះដ៏រឹងមាំមួយ ដែលអាចយកមកអនុវត្តដើម្បីអភិវឌ្ឍកម្មវិធីបំប្លែងហ្សែន និងបង្កាត់ពូជសណ្តែកសៀងនៅកម្ពុជា។

ការអនុវត្តនិងការកែច្នៃវិធីសាស្ត្រនេះឱ្យស្របតាមបរិបទពូជក្នុងស្រុក នឹងជួយពន្លឿនការបង្កើតពូជសណ្តែកសៀងថ្មីៗដែលមានទិន្នផលខ្ពស់ និងធន់នឹងអាកាសធាតុប្រែប្រួលសម្រាប់កសិករកម្ពុជា។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. រៀបចំបន្ទប់ពិសោធន៍ និងសារធាតុគីមី: ត្រូវប្រាកដថាមានទូ Laminar Air Flow ទូនាបសម្លាប់មេរោគ និងទិញសារធាតុចិញ្ចឹមស្តង់ដារ MS medium រួមជាមួយនឹងអរម៉ូនលូតលាស់សំខាន់ៗដូចជា BA និង αNAA
  2. ការរៀបចំកោសិកាដើមក្នុងលក្ខខណ្ឌគ្មានមេរោគ: ធ្វើការសម្លាប់មេរោគលើគ្រាប់សណ្តែកសៀងពូជក្នុងស្រុក រួចបណ្ដុះវាក្នុងបំពង់សាកល្បងរយៈពេល ៧ ថ្ងៃ។ បន្ទាប់មក កាត់យកផ្នែកចុងពន្លក (Shoot tips) និងកូទីលេដុង (Cotyledons) មកប្រើជាវត្ថុធាតុដើម ដោយចៀសវាងការប្រើអង្កត់អ៊ីប៉ូកូទីល។
  3. ការជំរុញកាលុស និងពន្លក: បណ្ដុះកោសិកាដើមដែលកាត់រួច ទៅក្នុងមជ្ឈដ្ឋាន MS ដែលមានលាយអរម៉ូន BA ក្នុងកំហាប់ចន្លោះពី 2.0 ទៅ 3.0 mg/L រួចរក្សាក្នុងបន្ទប់មានសីតុណ្ហភាព ២៥°C និងមានពន្លឺ ១៦ ម៉ោងក្នុងមួយថ្ងៃ ក្នុងរយៈពេល ៦ សប្តាហ៍។
  4. ដំណាក់កាលបណ្ដុះឫស: នៅពេលកោសិកាដុះពន្លកល្មម ត្រូវប្តូរពន្លកទាំងនោះទៅកាន់មជ្ឈដ្ឋាន MS ថ្មី ដែលមិនមានលាយ BA ឬអាចបន្ថែម αNAA ក្នុងកំហាប់ប្រហែល 0.5 ទៅ 1.0 mg/L ដើម្បីជួយជំរុញឱ្យឫសលូតលាស់បានល្អមុននឹងយកទៅផ្សាំក្រៅ។
  5. ការកែសម្រួលរូបមន្តតាមពូជក្នុងស្រុក: ដោយសារតែពូជសណ្តែកសៀងកម្ពុជាអាចមានប្រតិកម្មខុសពីពូជវៀតណាម និស្សិតឬអ្នកស្រាវជ្រាវគួរតែធ្វើការតេស្តកែប្រែកំហាប់ BA បន្តិចម្តងៗជុំវិញកម្រិត 2.0 mg/L ដើម្បីស្វែងរករូបមន្តដែលផ្តល់ប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់បំផុតសម្រាប់ពូជកម្ពុជាជាក់លាក់នីមួយៗ។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
In-vitro regeneration (ការបណ្ដុះកោសិកាក្នុងបំពង់សាកល្បង) ដំណើរការនៃការយកកោសិកា ជាលិកា ឬសរីរាង្គរុក្ខជាតិទៅបណ្ដុះនៅក្នុងបំពង់សាកល្បង ដែលមានមជ្ឈដ្ឋានចិញ្ចឹមសិប្បនិម្មិតក្នុងលក្ខខណ្ឌគ្មានមេរោគ ដើម្បីជំរុញឱ្យកោសិកាទាំងនោះបែងចែក និងលូតលាស់ក្លាយជារុក្ខជាតិថ្មីមួយពេញលេញ។ ដំណើរការនេះចាំបាច់សម្រាប់ការបង្កាត់ពូជ និងការបំប្លែងហ្សែន។ ដូចជាការយកមែកឈើដ៏តូចមួយទៅដាំក្នុងកែវដែលមានទឹកថ្នាំជីវជាតិពិសេស ដើម្បីឱ្យវាដុះជាដើមឈើថ្មីមួយនៅក្នុងបន្ទប់ពិសោធន៍។
Callus (កាលុស ឬដុំកោសិកាមិនទាន់បែងចែករូបរាង) បណ្ដុំកោសិការុក្ខជាតិដែលប្រមូលផ្តុំគ្នាជាដុំៗ ប៉ុន្តែមិនទាន់មានរូបរាងច្បាស់លាស់ (មិនទាន់ក្លាយជាស្លឹក ឫស ឬដើម) ដែលដុះចេញពីមុខរបួសនៃជាលិកាដើម (Explant) ពេលមានការជំរុញពីអរម៉ូនលូតលាស់។ វាជាមូលដ្ឋានគ្រឹះដំបូងមុនពេលកោសិកាវិវឌ្ឍទៅជាពន្លកឬឫស។ ដូចជាសាច់ខ្ចីដែលទើបតែដុះពកនៅត្រង់មុខរបួស មុនពេលវាវិវឌ្ឍក្លាយជាស្បែកធម្មតាវិញ។
Explant (កោសិកាដើម ឬជាលិកាពូជ) បំណែកតូចៗនៃរុក្ខជាតិ (ដូចជាចុងពន្លក កូទីលេដុង ឬបំណែកដើម) ដែលត្រូវបានកាត់យកមកប្រើប្រាស់ជាវត្ថុធាតុដើមសម្រាប់បណ្ដុះនៅក្នុងបំពង់សាកល្បង ដើម្បីបង្កើតជារុក្ខជាតិថ្មីទាំងមូល។ ដូចជាគ្រាប់ពូជ ឬដើមដំឡូងដែលយើងកាត់ជាកង់ៗដើម្បីយកទៅដាំបន្តឱ្យដុះជាដើមថ្មី។
Cotyledon (កូទីលេដុង ឬស្លឹកដំបូងនៃអំប្រ៊ីយ៉ុង) ផ្នែកមួយនៃអំប្រ៊ីយ៉ុងរុក្ខជាតិដែលមានតួនាទីផ្ទុកអាហារបម្រុងសម្រាប់ចិញ្ចឹមកូនរុក្ខជាតិពេលទើបតែពន្លកចេញពីគ្រាប់ដំបូងបង្អស់។ ក្នុងការសិក្សានេះ វាត្រូវបានគេរកឃើញថាជាកោសិកាដើមដ៏មានប្រសិទ្ធភាពបំផុតសម្រាប់ការបណ្ដុះកោសិកា។ ដូចជាកញ្ចប់អាហារតូចមួយដែលរុំជាប់នឹងទារករុក្ខជាតិ ដើម្បីផ្តល់កម្លាំងឱ្យវាដុះចេញពីដីមុនពេលវាអាចបង្កើតស្លឹកពិតប្រាកដ។
Organogenesis (ការកកើតសរីរាង្គ) ដំណើរការជីវសាស្ត្រដែលកោសិកាកាលុស (Callus) ចាប់ផ្តើមបែងចែកមុខងារ និងវិវឌ្ឍរូបរាងរបស់ខ្លួនទៅជាសរីរាង្គផ្សេងៗនៃរុក្ខជាតិ ដូចជាដុះចេញជាឫស ដើម និងស្លឹក ក្រោមការបញ្ជារបស់អរម៉ូននៅក្នុងមជ្ឈដ្ឋានចិញ្ចឹម។ ដូចជាជាងស្ថាបត្យករដែលចាប់ផ្តើមយកដុំឥដ្ឋ (កោសិកា) មកតម្រៀបសាងសង់ជាបន្ទប់ ដំបូល ឬសសរ (ឫស ពន្លក) ដើម្បីបង្កើតជាផ្ទះមួយដ៏ពេញលេញ។
Plant growth regulators (អរម៉ូនលូតលាស់រុក្ខជាតិ) សារធាតុគីមី ឬអរម៉ូនសំយោគ (ដូចជា BA, TDZ, ឬ NAA) ដែលអ្នកវិទ្យាសាស្ត្របន្ថែមទៅក្នុងមជ្ឈដ្ឋានចិញ្ចឹមក្នុងបរិមាណតិចតួច ដើម្បីបញ្ជា ឬជំរុញឱ្យកោសិការុក្ខជាតិប្រែប្រួល ដូចជាជួយឱ្យឆាប់ដុះកាលុស លូតលាស់ ដុះពន្លក ឬបញ្ចេញឫសតាមការចង់បាន។ ដូចជាថ្នាំប៉ូវឬវីតាមីនដែលយើងឱ្យទៅក្មេងដើម្បីជួយជំរុញឱ្យគេលូតកម្ពស់ ឬឡើងទម្ងន់ឱ្យចំគោលដៅ។
Hypocotyl (អង្កត់អ៊ីប៉ូកូទីល) ផ្នែកនៃដើមកូនរុក្ខជាតិដែលស្ថិតនៅចន្លោះខាងក្រោមស្លឹកកូទីលេដុង និងខាងលើឫសដំបូងបង្អស់។ ក្នុងការសិក្សានេះ វាត្រូវបានកាត់យកមកធ្វើជាកោសិកាដើម សម្រាប់ការបណ្ដុះ ប៉ុន្តែផ្តល់អត្រាដុះពន្លកទាបជាងចុងពន្លកនិងកូទីលេដុង។ ដូចជាក និងប្រអប់ទ្រូងនៃកូនរុក្ខជាតិ ដែលជាផ្នែកតភ្ជាប់រវាងឫសជើងនិងស្លឹកដែលជាដៃ។
MS medium (មជ្ឈដ្ឋានចិញ្ចឹម MS ឬ Murashige and Skoog) ប្រភេទនៃរូបមន្តទឹក ឬចាហួយចិញ្ចឹមសិប្បនិម្មិតកម្រិតស្តង់ដារ ដែលផ្ទុកទៅដោយសារធាតុចិញ្ចឹម រ៉ែខនិជ វីតាមីន និងស្ករគ្រប់គ្រាន់ សម្រាប់ទ្រទ្រង់កោសិការុក្ខជាតិឱ្យអាចរស់រាន និងលូតលាស់បាននៅក្នុងបំពង់សាកល្បងដោយមិនបាច់មានដី។ ដូចជាស៊ុបពិសេសដែលផ្សំឡើងពីជីវជាតិគ្រប់មុខ ដើម្បីចិញ្ចឹមកោសិការុក្ខជាតិដែលមិនទាន់មានឫសឱ្យមានអាហារហូបគ្រប់គ្រាន់ដើម្បីរស់រានមានជីវិត។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖