Original Title: Induction of Onion (Allium cepa L. cv. Granex 33) Callus Formation and Embryogenesis
Source: li01.tci-thaijo.org
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការជំរុញឱ្យមានការបង្កើតកាឡូស (Callus) និងអំប្រ៊ីយ៉ូនៃខ្ទឹមបារាំង (Allium cepa L. cv. Granex 33)

ចំណងជើងដើម៖ Induction of Onion (Allium cepa L. cv. Granex 33) Callus Formation and Embryogenesis

អ្នកនិពន្ធ៖ Niran Juntawong (Dept. of Botany, Faculty of Science, Kasetsart University), Prasart Kaumanee, Malee Nanankorn, Surirat Khewhok

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 1993 Agriculture and Natural Resources

វិស័យសិក្សា៖ Plant Tissue Culture

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ការសិក្សានេះផ្តោតលើការប្រៀបធៀបការលូតលាស់ និងការធ្វើឌីផេរ៉ង់ស្យែលរវាងជាលិកាផ្នែកគល់ និងស្រទាប់មើមរបស់ខ្ទឹមបារាំង (Allium cepa L. cv. Granex 33) ដើម្បីរកលក្ខខណ្ឌអរម៉ូនល្អបំផុតសម្រាប់ការបណ្តុះជាលិកា។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ ការស្រាវជ្រាវនេះបានអនុវត្តការបណ្តុះជាលិកាខ្ទឹមបារាំងនៅលើមជ្ឈដ្ឋានចិញ្ចឹម (Culture media) ផ្សេងៗគ្នាដោយប្រើប្រាស់អរម៉ូនលូតលាស់។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Basal Plate Culture (MS + 1.0 mg/l 2,4-D)
ការបណ្តុះជាលិកាគល់ខ្ទឹមលើមជ្ឈដ្ឋាន MS លាយ 1.0 mg/l 2,4-D
អាចបង្កើតបានជាកាឡូសហាប់ណែន (Compact callus) ល្អ និងមានសមត្ថភាពខ្ពស់ក្នុងការកកើតជាអំប្រ៊ីយ៉ូ និងកូនរុក្ខជាតិពេញលេញ។ ទាមទារពេលវេលាយូរ (ប្រហែល ២៣ សប្តាហ៍សរុប) និងការផ្លាស់ប្តូរមជ្ឈដ្ឋានចិញ្ចឹមជាច្រើនដំណាក់កាល។ ទទួលបានកូនខ្ទឹមបារាំងពេញលេញចំនួន ៧ ដើម ក្នុងមួយដុំកាឡូស (Plantlet regeneration)។
Basal Plate Culture (Modified MS + 3.3 mg/l Dicamba)
ការបណ្តុះជាលិកាគល់ខ្ទឹមលើមជ្ឈដ្ឋាន Modified MS លាយ 3.3 mg/l Dicamba
មានប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់ក្នុងការជំរុញការបង្កើតបរិមាណកាឡូសហាប់ណែនបានច្រើនបំផុតក្នុងរយៈពេលខ្លី (៦ សប្តាហ៍)។ កាឡូសដែលទទួលបានពីមជ្ឈដ្ឋាននេះ មិនមានសមត្ថភាពលូតលាស់បន្តទៅជាកូនរុក្ខជាតិ (Plantlets) បានទេនៅក្នុងការពិសោធន៍។ ទទួលបានបរិមាណកាឡូសកម្រិតខ្ពស់បំផុត (+++) ប៉ុន្តែមិនទទួលបានកូនរុក្ខជាតិ (០ ដើម)។
Bulb Scale Tissue Culture
ការបណ្តុះជាលិកាស្រទាប់មើមខ្ទឹមបារាំង
មានភាពងាយស្រួលក្នុងការប្រមូលយកសំណាកជាលិកាមកធ្វើការបណ្តុះ។ បង្កើតបានត្រឹមតែកាឡូសផុយ (Friable callus) ក្នុងបរិមាណតិចតួច ដែលមិនអាចលូតលាស់ទៅជាកូនរុក្ខជាតិបាន។ មិនមានការកកើតជាអំប្រ៊ីយ៉ូ ឬកូនរុក្ខជាតិពីជាលិកាប្រភេទនេះឡើយ។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការស្រាវជ្រាវនេះទាមទារបន្ទប់ពិសោធន៍បណ្តុះជាលិការុក្ខជាតិស្តង់ដារ ដែលបំពាក់ដោយឧបករណ៍សម្លាប់មេរោគ និងសារធាតុគីមីកសិកម្មជាក់លាក់។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះត្រូវបានអនុវត្តនៅក្នុងបន្ទប់ពិសោធន៍នៃសាកលវិទ្យាល័យកសេតសាស្ត្រ (Kasetsart University) ទីក្រុងបាងកក ប្រទេសថៃ ដោយផ្តោតលើពូជខ្ទឹមបារាំង Granex 33 តែមួយប៉ុណ្ណោះ។ ដោយសារប្រទេសថៃ និងកម្ពុជាមានអាកាសធាតុ និងលក្ខខណ្ឌបរិស្ថានស្រដៀងគ្នា លទ្ធផលនេះអាចយកមកអនុវត្តបាន ប៉ុន្តែគប្បីមានការសាកល្បងបន្ថែមលើពូជខ្ទឹមក្នុងស្រុកដើម្បីផ្ទៀងផ្ទាត់ប្រសិទ្ធភាព។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

វិធីសាស្ត្របណ្តុះជាលិកានេះមានសារៈសំខាន់ណាស់សម្រាប់វិស័យកសិកម្មនៅកម្ពុជា ពិសេសក្នុងការផលិតពូជដំណាំដែលគ្មានជំងឺ។

ជារួម បច្ចេកទេសបណ្តុះជាលិកានេះផ្តល់នូវមូលដ្ឋានគ្រឹះដ៏រឹងមាំមួយ សម្រាប់ការធ្វើទំនើបកម្មប្រព័ន្ធផលិតពូជដំណាំ និងការធានាសន្តិសុខស្បៀងនៅក្នុងប្រទេសកម្ពុជា។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. រៀបចំបន្ទប់ពិសោធន៍ និងឧបករណ៍: ត្រូវធានាថាមន្ទីរពិសោធន៍មានបំពាក់ Laminar Flow Cabinet សម្រាប់ការកាត់តជាលិកា និងម៉ាស៊ីន Autoclave សម្រាប់សម្លាប់មេរោគលើសម្ភារៈ និងមជ្ឈដ្ឋានចិញ្ចឹម ដើម្បីរក្សាលក្ខខណ្ឌគ្មានមេរោគ។
  2. ការរៀបចំមជ្ឈដ្ឋានចិញ្ចឹមសម្រាប់ការបង្កើតកាឡូស (Callus Induction): ផ្សំមជ្ឈដ្ឋាន MS Medium ដោយបន្ថែមអរម៉ូន 1.0 mg/l 2,4-D ស្ករ 30 g/l និងវ៉ារ 6.5 g/l រួចកែតម្រូវ pH និងយកទៅចំហុយសម្លាប់មេរោគ។
  3. ការរៀបចំជាលិកា និងការបណ្តុះ (Inoculation): កាត់យកផ្នែកគល់ (Basal plate) នៃខ្ទឹមបារាំង សម្លាប់មេរោគលើផ្ទៃដោយប្រើសូលុយស្យុង Tween 20 និងទឹកសម្លាប់មេរោគ រួចដាក់បណ្តុះលើមជ្ឈដ្ឋានដែលបានរៀបចំ ហើយរក្សាទុកក្នុងបន្ទប់ងងឹតសីតុណ្ហភាព ២៥ អង្សាសេ។
  4. ការជំរុញឱ្យកកើតជាកូនរុក្ខជាតិ (Embryogenesis & Regeneration): ក្រោយ ៦សប្តាហ៍ ត្រូវប្តូរកាឡូសទៅមជ្ឈដ្ឋានថ្មីដែលមាន 0.1 mg/l IAA និង 1.0 mg/l BAP រយៈពេល ១៥សប្តាហ៍ មុននឹងប្តូរទៅមជ្ឈដ្ឋាន Hormone-free MS Medium ឱ្យដុះឫសពេញលេញ។
  5. ការផ្សាំកូនរុក្ខជាតិទៅក្នុងមជ្ឈដ្ឋានខាងក្រៅ (Acclimatization): យកកូនខ្ទឹមបារាំងចេញពីដប លាងជម្រះវ៉ារចេញដោយប្រុងប្រយ័ត្ន ហើយដាំក្នុងកូនថង់ដែលមានល្បាយដីសំបូរជីវជាតិ ក្នុងរោងកញ្ចក់ (Greenhouse) ដើម្បីឱ្យរុក្ខជាតិស៊ាំនឹងបរិយាកាសខាងក្រៅ មុននឹងយកទៅដាំនៅចម្ការ។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Callus (កាឡូស) កាឡូសគឺជាបណ្តុំនៃកោសិការុក្ខជាតិដែលមិនទាន់មានទម្រង់ច្បាស់លាស់ (undifferentiated cells) ដែលកកើតឡើងនៅពេលជាលិការុក្ខជាតិរងរបួស ឬត្រូវបានបណ្តុះនៅក្នុងមជ្ឈដ្ឋានសិប្បនិម្មិតដែលមានអរម៉ូនលូតលាស់។ នៅក្នុងការបណ្តុះជាលិកា គេអាចបំប្លែងកាឡូសឱ្យទៅជាឫស ឬដើមវិញបាន។ ដូចជាដីឥដ្ឋទន់ៗ ដែលយើងអាចយកទៅសូនជារូបរាងអ្វីក៏បាន (ដូចជាបង្កើតជាឫស ឬស្លឹកជាដើម)។
Embryogenesis (ការកកើតអំប្រ៊ីយ៉ូ) ដំណើរការដែលកោសិការុក្ខជាតិ ឬកាឡូសលូតលាស់បំបែកខ្លួន និងផ្លាស់ប្តូររូបរាងទៅជាអំប្រ៊ីយ៉ូសិប្បនិម្មិត (Somatic embryo) ដែលមានសមត្ថភាពលូតលាស់ទៅជាកូនរុក្ខជាតិពេញលេញដោយមិនបាច់ឆ្លងកាត់ការបង្កកំណើតដោយកេសរផ្កាឡើយ។ ដូចជាដំណើរការនៃការវិវត្តពីស៊ុតទៅជាកូនមាន់ញាស់ ដែលត្រៀមខ្លួនចេញមកក្រៅ។
Basal plate (ជាលិកាគល់ខ្ទឹម) ផ្នែកខាងក្រោមបង្អស់នៃមើមខ្ទឹម ដែលជាចំណុចតភ្ជាប់រវាងឫស និងស្រទាប់សាច់មើម។ ផ្នែកនេះមានកោសិកាដែលសកម្មខ្លាំង (Meristematic tissue) ងាយស្រួលក្នុងការជំរុញឱ្យលូតលាស់ និងបង្កើតជាលិកាថ្មី។ ដូចជាគ្រឹះនៃអគារ ដែលទ្រទ្រង់ និងផ្តល់មូលដ្ឋានសម្រាប់ការសាងសង់ជាន់ ឬផ្នែកផ្សេងៗបន្តបន្ទាប់។
Murashige and Skoog medium (MS) (មជ្ឈដ្ឋានចិញ្ចឹម MS) ជាល្បាយសូលុយស្យុងសារធាតុចិញ្ចឹមស្តង់ដារមួយប្រភេទដែលផ្ទុកទៅដោយសារធាតុរ៉ែ វីតាមីន និងស្ករ ដែលត្រូវបានប្រើប្រាស់យ៉ាងទូលំទូលាយបំផុតនៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍សម្រាប់បណ្តុះជាលិការុក្ខជាតិ ដើម្បីជំនួសឱ្យដី។ ដូចជាទឹកដោះគោម្សៅដែលគេលាយយ៉ាងពិសេសសម្រាប់ទារក ដើម្បីផ្តល់ជីវជាតិគ្រប់គ្រាន់ឱ្យទារកលូតលាស់លឿនក្នុងដប។
Plantlets (កូនរុក្ខជាតិ) កូនរុក្ខជាតិវ័យក្មេងតូចៗដែលទទួលបានពីការបណ្តុះជាលិកានៅក្នុងដបពិសោធន៍ ដែលលូតលាស់មានទាំងឫស ដើម និងស្លឹកពេញលេញ ត្រៀមខ្លួនរួចរាល់សម្រាប់ការយកទៅផ្សាំដាំនៅខាងក្រៅ។ ដូចជាទារកដែលកើតមកមានអវយវៈគ្រប់គ្រាន់ ហើយត្រៀមខ្លួនធំធាត់នៅក្នុងពិភពខាងក្រៅ។
Growth regulators (អរម៉ូនលូតលាស់រុក្ខជាតិ) សារធាតុគីមីសំយោគ (ដូចជា 2,4-D, Dicamba, IAA, BAP) ដែលគេបន្ថែមទៅក្នុងមជ្ឈដ្ឋានចិញ្ចឹមក្នុងបរិមាណតិចតួចបំផុត ដើម្បីបញ្ជាឱ្យកោសិការុក្ខជាតិបំបែកខ្លួន បង្កើតជាកាឡូស បញ្ចេញឫស ឬពន្លកដើម។ ដូចជាចង្កូតរថយន្តដែលបញ្ជាប្រាប់រថយន្តឱ្យបត់ឆ្វេង ឬស្តាំ ឬទៅមុខតាមការចង់បានរបស់អ្នកបើកបរ។
Friable callus (កាឡូសផុយ) ប្រភេទកាឡូសដែលមានសភាពធូររលុង កោសិកាមិនសូវតោងជាប់គ្នាណែនល្អ ដែលធ្វើឱ្យវាងាយនឹងបំបែកចេញពីគ្នា។ នៅក្នុងការសិក្សានេះ កាឡូសប្រភេទនេះមិនមានសមត្ថភាពអាចបំប្លែងទៅជាកូនរុក្ខជាតិ (Plantlets) វិញបានទេ។ ដូចជាដុំបាយដែលគេសង្កត់មិនសូវណែន ពេលប៉ះបន្តិចវានឹងរលាជ្រុះបែកចេញពីគ្នា។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖