Original Title: Soybean Plants and Tissue Culture Selection for Glyphosate Tolerance
Source: li01.tci-thaijo.org
Disclaimer: Summary generated by AI based on the provided document. Please refer to the original paper for full scientific accuracy.

ការជ្រើសរើសរុក្ខជាតិសណ្តែកសៀង និងការបណ្តុះជាលិកាសម្រាប់ការទ្រាំទ្រនឹងថ្នាំសម្លាប់ស្មៅ Glyphosate

ចំណងជើងដើម៖ Soybean Plants and Tissue Culture Selection for Glyphosate Tolerance

អ្នកនិពន្ធ៖ Rungsit Suwanketnikom (Department of Agronomy, Kasetsart University), Tosaporn Pronprom (Department of Agronomy, Kasetsart University), Sonthichai Chanprem (Department of Agronomy, Kasetsart University), Peerasak Srinives (Department of Agronomy, Kasetsart University)

ឆ្នាំបោះពុម្ព៖ 1992 Thai Agricultural Research Journal

វិស័យសិក្សា៖ Agronomy

១. សេចក្តីសង្ខេបប្រតិបត្តិ (Executive Summary)

បញ្ហា (The Problem)៖ ការសិក្សានេះដោះស្រាយបញ្ហានៃការគ្រប់គ្រងស្មៅចង្រៃក្នុងការដាំដុះសណ្តែកសៀង ដោយស្វែងរកពូជ Glycine max ដែលអាចទ្រាំទ្រនឹងថ្នាំសម្លាប់ស្មៅមិនរើសមុខ glyphosate ដើម្បីកាត់បន្ថយការពុលដល់ដំណាំ។

វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ ការស្រាវជ្រាវនេះបានប្រើប្រាស់វិធីសាស្ត្រជ្រើសរើសរុក្ខជាតិទាំងមូលនៅក្នុងផ្ទះកញ្ចក់ និងការជ្រើសរើសកោសិកាតាមរយៈការបណ្តុះជាលិកាក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍។

លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖

២. ការវិភាគលើប្រសិទ្ធភាព និងដែនកំណត់ (Performance & Constraints)

វិធីសាស្ត្រ (Method) គុណសម្បត្តិ (Pros) គុណវិបត្តិ (Cons) លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result)
Greenhouse Whole Plant Selection
ការជ្រើសរើសរុក្ខជាតិទាំងមូលក្នុងផ្ទះកញ្ចក់
ឆ្លុះបញ្ចាំងពីការលូតលាស់ជាក់ស្តែងរបស់រុក្ខជាតិនៅក្នុងដី និងងាយស្រួលក្នុងការវាស់វែងកម្ពស់ព្រមទាំងទម្ងន់។ វាជួយឲ្យឃើញពីការឆ្លើយតបទាំងមូលរបស់រុក្ខជាតិទៅនឹងថ្នាំសម្លាប់ស្មៅ។ ត្រូវការទំហំទីតាំងធំ ចំណាយពេលវេលាយូរក្នុងការរង់ចាំការលូតលាស់ និងអាចរងឥទ្ធិពលពីកត្តាបរិស្ថានមួយចំនួនបើទោះបីជានៅក្នុងផ្ទះកញ្ចក់ក៏ដោយ។ ពូជ Doikham និង S.J.5 បង្ហាញភាពធន់ខ្ពស់បំផុតចំពោះថ្នាំ glyphosate ក្នុងកម្រិត ០,៥ គ.ក សារធាតុសកម្ម/ហិកតា ខណៈពូជផ្សេងទៀតងាយរងគ្រោះ។
Tissue Culture (Cell Suspension Selection)
ការជ្រើសរើសតាមរយៈការបណ្តុះជាលិកា (Cell Suspension)
អាចត្រួតពិនិត្យបរិស្ថានបាន១០០% ប្រើប្រាស់កន្លែងតូច និងអនុញ្ញាតឲ្យធ្វើតេស្តលើកោសិការាប់លានក្នុងពេលតែមួយ។ វាជួយសន្សំសំចៃពេលវេលាក្នុងការស្វែងរកកោសិកាដែលធន់ទ្រាំ។ ទាមទារឧបករណ៍មន្ទីរពិសោធន៍ទំនើប អ្នកជំនាញបច្ចេកទេសច្បាស់លាស់ និងភាពក្រៀវ (sterile condition) ខ្ពស់បំផុត។ លទ្ធផលនៃកោសិកាជួនកាលមិនអាចឆ្លុះបញ្ចាំងទាំងស្រុងទៅនឹងរុក្ខជាតិពិត។ កោសិកាអាចរស់រានរហូតដល់កំហាប់ថ្នាំ 10^-2 M ហើយមានសមត្ថភាពបន្ស៊ាំខ្លួន (adapt) បន្ថែមទៀតនៅពេលផ្ទេរទៅមជ្ឈដ្ឋានដែលមានថ្នាំលើកទី២។

ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការសិក្សានេះទាមទារការបំពាក់ឧបករណ៍មន្ទីរពិសោធន៍ជីវបច្ចេកវិទ្យាកម្រិតស្តង់ដារ និងផ្ទះកញ្ចក់ (Greenhouse) សម្រាប់ការដាំដុះ។

៣. ការពិនិត្យសម្រាប់បរិបទកម្ពុជា/អាស៊ីអាគ្នេយ៍

ភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យ (Data Bias)៖

ការសិក្សានេះត្រូវបានធ្វើឡើងនៅក្នុងប្រទេសថៃ (សាកលវិទ្យាល័យ Kasetsart) ដោយប្រើប្រាស់ពូជសណ្តែកសៀង Glycine max និងប្រភេទដីជាក់លាក់របស់ប្រទេសថៃ។ នេះមានសារៈសំខាន់ និងមានភាពអំណោយផលសម្រាប់ប្រទេសកម្ពុជា ព្រោះអាកាសធាតុ និងប្រភេទដីកសិកម្មនៃប្រទេសទាំងពីរមានភាពស្រដៀងគ្នាខ្លាំង ដែលធ្វើឱ្យលទ្ធផលនេះអាចយកមកប្រៀបធៀប ឬអនុវត្តនៅកម្ពុជាបានយ៉ាងងាយស្រួល។

លទ្ធភាពនៃការអនុវត្ត (Applicability)៖

វិធីសាស្ត្រនៃការបណ្តុះជាលិកា និងការស្វែងរកពូជធន់នឹងថ្នាំសម្លាប់ស្មៅនេះ គឺមានប្រយោជន៍ និងសក្តានុពលខ្លាំងណាស់សម្រាប់វិស័យកសិកម្មនៅកម្ពុជា។

បច្ចេកទេសនេះមិនត្រឹមតែជួយដោះស្រាយបញ្ហាស្មៅចង្រៃក្នុងការដាំដុះប៉ុណ្ណោះទេ ថែមទាំងផ្តល់មូលដ្ឋានគ្រឹះដ៏រឹងមាំសម្រាប់ការស្រាវជ្រាវជីវបច្ចេកវិទ្យាកសិកម្មនៅកម្ពុជា ដើម្បីឈានទៅរកការធ្វើកសិកម្មទំនើបផងដែរ។

៤. ផែនការសកម្មភាពសម្រាប់និស្សិត (Actionable Roadmap)

ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖

  1. សិក្សាមូលដ្ឋានគ្រឹះនៃការបណ្តុះជាលិកា (Tissue Culture Foundation): និស្សិតគប្បីចាប់ផ្តើមពីការយល់ដឹងអំពីបច្ចេកទេស Tissue Culture ជាពិសេសការរៀបចំមជ្ឈដ្ឋាន Murashige and Skoog (MS) ការកែតម្រូវ pH ទៅ ៥,៨ និងការប្រើប្រាស់អរម៉ូនលូតលាស់ដូចជា 2,4-D ដើម្បីបង្កើតជា Callus
  2. ស្វែងយល់ពីយន្តការនៃថ្នាំសម្លាប់ស្មៅ Glyphosate: ស្រាវជ្រាវពីរបៀបដែលថ្នាំ Glyphosate ធ្វើសកម្មភាពទប់ស្កាត់អង់ស៊ីម EPSP synthase នៅក្នុងរុក្ខជាតិ និងសិក្សាពីយន្តការនៃភាពធន់ (Resistance mechanism) ដែលធ្វើឲ្យកោសិកាខ្លះអាចរស់រានបាន។
  3. រៀបចំការសាកល្បងខ្នាតតូចក្នុងផ្ទះកញ្ចក់ (Greenhouse Screening): ធ្វើការប្រមូលពូជសណ្តែកសៀងក្នុងស្រុកកម្ពុជា ហើយសាកល្បងបាញ់ថ្នាំ Glyphosate ក្នុងកំហាប់ផ្សេងៗគ្នា (០ ទៅ ០,៥ គ.ក/ហិកតា) ដើម្បីកំណត់កម្រិតធន់ទ្រាំបឋម (Baseline tolerance) និងកត់ត្រាកម្ពស់រុក្ខជាតិ។
  4. អនុវត្តការបណ្តុះកោសិកា (Cell Suspension Culture): បង្កើតមន្ទីរពិសោធន៍ខ្នាតតូចដោយប្រើ Rotary Shaker កំណត់ល្បឿន 120 rpm ដើម្បីបណ្តុះកោសិកាសណ្តែកសៀងក្នុងសូលុយស្យុងរាវ។ ធ្វើការបញ្ចូលថ្នាំ Glyphosate ក្នុងកំហាប់ផ្សេងៗ (10^-5 M ដល់ 10^-2 M) ទៅក្នុងសូលុយស្យុង។
  5. វាស់វែងអត្រារស់រាន និងវិភាគទិន្នន័យ (Viability Assay & Data Analysis): ប្រើប្រាស់ឧបករណ៍ Hemacytometer និងថ្នាំពណ៌ Feulgen reagent ដើម្បីរាប់ចំនួនកោសិកាដែលរស់រានមានជីវិត។ បន្ទាប់មក ប្រើប្រាស់កម្មវិធីស្ថិតិដូចជា SPSSR ដើម្បីធ្វើការវិភាគ DMRT (Duncan's Multiple Range Test) ក្នុងគោលបំណងប្រៀបធៀបពូជណាដែលល្អបំផុត។

៥. វាក្យសព្ទបច្ចេកទេស (Technical Glossary)

ពាក្យបច្ចេកទេស ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition)
Glyphosate (ថ្នាំសម្លាប់ស្មៅ Glyphosate) ជាប្រភេទថ្នាំសម្លាប់ស្មៅសកម្មរាលដាល (systemic) ដែលមិនរើសមុខ វាធ្វើការដោយជ្រាបចូលទៅក្នុងរុក្ខជាតិ ហើយទៅទប់ស្កាត់ដំណើរការសំយោគអាស៊ីតអាមីណូសំខាន់ៗ ដែលធ្វើឱ្យរុក្ខជាតិឈប់លូតលាស់និងងាប់។ ដូចជាថ្នាំបំពុលដែលចូលទៅកាត់ផ្តាច់ប្រព័ន្ធផលិតស្បៀងរបស់រុក្ខជាតិ ធ្វើឱ្យរុក្ខជាតិអត់អាហារស្លាប់។
Tissue culture (ការបណ្តុះជាលិកា) ជាបច្ចេកទេសកសិកម្មជីវសាស្ត្រ ដែលគេយកបំណែកតូចៗនៃរុក្ខជាតិ (ដូចជាចុងត្រួយ ឬស្លឹក) ទៅបណ្តុះនៅក្នុងមជ្ឈដ្ឋានសិប្បនិម្មិត ដែលមានសារធាតុចិញ្ចឹមគ្រប់គ្រាន់ ក្នុងលក្ខខណ្ឌគ្មានមេរោគ ដើម្បីបំបែកជាកោសិកា ឬលូតលាស់ជារុក្ខជាតិថ្មីរាប់ពាន់ដើម។ ដូចជាការយកកូនមែកឈើមួយចំអាម ទៅដាំក្នុងទូកញ្ចក់ពិសេសដែលមានជីគ្រប់គ្រាន់ ដើម្បីឱ្យវាដុះជាដើមថ្មីដ៏ច្រើនសន្ធឹកសន្ធាប់ដោយមិនបាច់ប្រើគ្រាប់ពូជ។
Cell suspension (ការព្យួរកោសិកាក្នុងសូលុយស្យុងរាវ) ជាការបណ្តុះកោសិការុក្ខជាតិឱ្យនៅដាច់ៗពីគ្នា និងអណ្តែតនៅក្នុងមជ្ឈដ្ឋានទឹករាវ (Liquid medium) ដែលត្រូវបានរលាក់ជានិច្ច ដើម្បីឱ្យកោសិកាទទួលបានអុកស៊ីហ្សែន និងសារធាតុចិញ្ចឹមស្មើៗគ្នា ដែលងាយស្រួលក្នុងការធ្វើតេស្តបន្ស៊ាំជាមួយសារធាតុគីមី។ ដូចជាការបណ្តែតគ្រាប់តាប៉្យូកាក្នុងទឹកដោះគោក្រឡុក ដែលគ្រាប់នីមួយៗអាចស្រូបយករសជាតិទឹកដោះគោបានស្មើៗគ្នាពីគ្រប់ទិសទី។
EPSP (5-enolpyruvylshikimic acid-3-phosphate) synthase (អង់ស៊ីម EPSP synthase) ជាអង់ស៊ីមដ៏សំខាន់មួយនៅក្នុងរុក្ខជាតិដែលទទួលខុសត្រូវលើការផលិតអាស៊ីតអាមីណូប្រភេទក្លិនប្រហើរ (aromatic amino acids)។ វាក៏ជាគោលដៅចម្បងតែមួយគត់ដែលថ្នាំសម្លាប់ស្មៅ Glyphosate វាយប្រហារដើម្បីសម្លាប់រុក្ខជាតិ។ ដូចជាម៉ាស៊ីនភ្លើងកណ្តាលនៅក្នុងរោងចក្រ បើមានគេមកបិទម៉ាស៊ីននេះ (ដោយថ្នាំ Glyphosate) រោងចក្រទាំងមូលនឹងគាំងលែងដំណើរការ។
Callus (កាលុស / ដុំកោសិកា) ជាបណ្តុំនៃកោសិការុក្ខជាតិដែលបន្តពូជយ៉ាងលឿនតាមរយៈការបណ្តុះជាលិកា ប៉ុន្តែមិនទាន់វិវឌ្ឍទៅជាសរីរាង្គច្បាស់លាស់ណាមួយ (ដូចជាឫស ដើម ឬស្លឹក) នៅឡើយទេ រហូតទាល់តែមានការផ្តល់អរម៉ូនបន្ថែម។ ដូចជាដុំដីឥដ្ឋទន់ៗដែលត្រៀមរួចជាស្រេចសម្រាប់យកទៅសូនជារូបរាងផ្សេងៗ (ឫស ដើម ស្លឹក) តាមសេចក្តីត្រូវការ។
Phytotoxicity (ការពុលដល់រុក្ខជាតិ) ជាកម្រិតនៃផលប៉ះពាល់ ឬការខូចខាតដែលបង្កឡើងដោយសារធាតុគីមី (ដូចជាថ្នាំសម្លាប់ស្មៅ ថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិត ឬជីក្នុងកម្រិតលើស) ទៅលើការលូតលាស់ រូបរាង និងរចនាសម្ព័ន្ធរបស់រុក្ខជាតិ។ ដូចជាអាការៈប្រតិកម្មថ្នាំ ឬពុលចំណីអាហារ ដែលកើតមានលើមនុស្សនៅពេលទទួលទានរបស់ខុស។
Hemacytometer (ឧបករណ៍រាប់កោសិកា) ជាបន្ទះកញ្ចក់ពិសេសម្យ៉ាងមានក្រឡាតូចៗ ដែលគេប្រើប្រាស់រួមជាមួយមីក្រូទស្សន៍ ដើម្បីរាប់ចំនួនកោសិកាជាក់លាក់ដែលមាននៅក្នុងបរិមាណសូលុយស្យុងរាវមួយ។ វគ្គនេះជួយតាមដានអត្រារស់រានមានជីវិតរបស់កោសិកា។ ដូចជាក្រឡាអុកតូចៗដែលគេគូសលើកញ្ចក់ ដើម្បីងាយស្រួលរាប់ចំនួនស្រមោចដែលកំពុងវារកាត់ក្នុងតំបន់នីមួយៗ ដោយមិនឱ្យច្រឡំគ្នា។
Feulgen reagent (ថ្នាំពណ៌ Feulgen) ជាសារធាតុគីមីម្យ៉ាងដែលប្រើសម្រាប់លាបពណ៌ទៅលើ DNA នៅក្នុងកោសិកា ដើម្បីធ្វើឱ្យកោសិកាមានពណ៌ក្រហម ឬស្វាយ ដែលជួយឱ្យអ្នកស្រាវជ្រាវងាយស្រួលមើលឃើញ និងរាប់ចំនួនកោសិកាដែលនៅរស់នៅក្រោមមីក្រូទស្សន៍។ ដូចជាការបាញ់ថ្នាំពណ៌បញ្ចាំងពន្លឺទៅលើមនុស្សនៅក្នុងទីងងឹត ដើម្បីងាយស្រួលរាប់ចំនួនថាមានមនុស្សប៉ុន្មាននាក់កំពុងឈរនៅទីនោះ។

៦. ប្រធានបទពាក់ព័ន្ធ (Further Reading)

អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖

ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖