បញ្ហា (The Problem)៖ ជំងឺអុចស្លឹកបាក់តេរីគឺជាការគំរាមកំហែងយ៉ាងធ្ងន់ធ្ងរដល់ឧស្សាហកម្មគ្រាប់ពូជប៉េងប៉ោះ និងម្ទេស ហើយការធ្វើចំណាត់ថ្នាក់ប្រភេទបាក់តេរី Xanthomonas ឡើងវិញទាមទារឱ្យមានការកំណត់អត្តសញ្ញាណយ៉ាងច្បាស់លាស់នៅក្នុងប្រទេសថៃ។
វិធីសាស្ត្រ (The Methodology)៖ ការសិក្សានេះបានប្រមូល និងវិភាគបាក់តេរីចំនួន៣៨ប្រភេទ (isolates) ដោយផ្អែកលើលក្ខណៈរូបសាស្ត្រ សរីរវិទ្យា ជីវគីមី និងបច្ចេកទេសម៉ូលេគុល ដើម្បីកំណត់ប្រភេទឱ្យបានត្រឹមត្រូវ។
លទ្ធផលសំខាន់ៗ (The Verdict)៖
| វិធីសាស្ត្រ (Method) | គុណសម្បត្តិ (Pros) | គុណវិបត្តិ (Cons) | លទ្ធផលគន្លឹះ (Key Result) |
|---|---|---|---|
| Multilocus Sequence Analysis (MLSA) ការវិភាគតំណលំដាប់ហ្សែនចម្រុះ (MLSA) នៃហ្សែន gyrB, efp, dnaK, និង atpD |
មានភាពជាក់លាក់ និងត្រឹមត្រូវខ្ពស់បំផុតក្នុងការកំណត់អត្តសញ្ញាណប្រភេទបាក់តេរី ទោះបីជាការធ្វើតេស្ត PCR បរាជ័យក៏ដោយ។ | ចំណាយថវិកាច្រើន ចំណាយពេលយូរ និងទាមទារសេវាកម្មអានលំដាប់ហ្សែន (Sequencing) ព្រមទាំងចំណេះដឹងផ្នែកជីវព័ត៌មានវិទ្យា (Bioinformatics)។ | កំណត់អត្តសញ្ញាណបានយ៉ាងច្បាស់នូវបាក់តេរី X. perforans ចំនួន៨ប្រភេទ និង X. euvesicatoria ចំនួន១០ប្រភេទ។ |
| Species-specific PCR ប្រតិកម្មច្រវ៉ាក់ប៉ូលីមេរ៉ាស (PCR) ដោយប្រើប្រ៊ីម័រជាក់លាក់ |
ផ្តល់លទ្ធផលលឿន ចំណាយតិចជាង MLSA និងងាយស្រួលអនុវត្តសម្រាប់ការត្រួតពិនិត្យសំណាកទ្រង់ទ្រាយធំ។ | អាចផ្តល់លទ្ធផលអវិជ្ជមានមិនពិត (False negative) ប្រសិនបើហ្សែនរបស់បាក់តេរីក្នុងតំបន់មានការបម្រែបម្រួល ដូចដែលបានកើតឡើងចំពោះប្រ៊ីម័រ Bs-XpF/Bs-XpR។ | រកឃើញបាក់តេរី X. euvesicatoria ចំនួន១៨ប្រភេទ ប៉ុន្តែបរាជ័យក្នុងការចាប់យក X. perforans ចំនួន១០ប្រភេទទៀត។ |
| Morphological and Biochemical Tests ការធ្វើតេស្តរូបសាស្ត្រ និងជីវគីមី (Morphological and Biochemical Tests) |
ចំណាយតិចបំផុត និងជាមូលដ្ឋានគ្រឹះដ៏ល្អសម្រាប់ការបញ្ជាក់ថាសំណាកពិតជាស្ថិតក្នុងសន្តាន (Genus) Xanthomonas មែន។ | មិនអាចធ្វើការបែងចែកប្រភេទ (Species) លម្អិតនៃបាក់តេរីទាំង៤ប្រភេទនោះបានទេ ដោយសារពួកវាមានលក្ខណៈរូបសាស្ត្រដូចគ្នា។ | បញ្ជាក់ថាបាក់តេរីទាំង៣៨ប្រភេទ គឺជាសន្តាន Xanthomonas (Gram-negative, ពណ៌លឿងលើ YDC, មិនលូតលាស់លើ 5% NaCl)។ |
ការចំណាយលើធនធាន (Resource Cost)៖ ការអនុវត្តវិធីសាស្ត្រនេះទាមទារឱ្យមានមន្ទីរពិសោធន៍ម៉ូលេគុលបំពាក់ដោយឧបករណ៍ទំនើបៗ និងអ្នកជំនាញផ្នែកជីវព័ត៌មានវិទ្យាសម្រាប់ការវិភាគទិន្នន័យ។
ការសិក្សានេះត្រូវបានធ្វើឡើងដោយប្រើប្រាស់សំណាកពីតំបន់ភាគខាងជើង ឦសាន និងកណ្តាលនៃប្រទេសថៃ ចន្លោះឆ្នាំ១៩៨៧-២០១៨។ ដោយសារកម្ពុជាមានអាកាសធាតុត្រូពិចក្ដៅសើម និងការដាំដុះបន្លែស្រដៀងគ្នា ពូជបាក់តេរីនៅកម្ពុជាអាចមានហ្សែនស្រដៀងគ្នា ប៉ុន្តែចាំបាច់ត្រូវមានការសិក្សាដោយផ្ទាល់នៅកម្ពុជា ដើម្បីចៀសវាងការបរាជ័យក្នុងការប្រើប្រាស់ប្រ៊ីម័រ (Primers) បរទេសដែលមិនត្រូវគ្នានឹងពូជក្នុងស្រុក។
វិធីសាស្ត្រនិងលទ្ធផលនៃការសិក្សានេះ មានសារៈសំខាន់យ៉ាងខ្លាំងសម្រាប់ការគ្រប់គ្រងជំងឺរុក្ខជាតិ និងការត្រួតពិនិត្យភូតគាមអនាម័យ (Phytosanitary inspection) នៅប្រទេសកម្ពុជា។
ការរួមបញ្ចូលបច្ចេកទេស MLSA ជាមួយ PCR នឹងជួយស្ថាប័នស្រាវជ្រាវកម្ពុជាដោះស្រាយបញ្ហាលទ្ធផលអវិជ្ជមានមិនពិត (False negative) និងពង្រឹងគុណភាពនៃឧស្សាហកម្មគ្រាប់ពូជបន្លែក្នុងស្រុក។
ដើម្បីអនុវត្តតាមការសិក្សានេះ និស្សិតគួរអនុវត្តតាមជំហានខាងក្រោម៖
| ពាក្យបច្ចេកទេស | ការពន្យល់ជាខេមរភាសា (Khmer Explanation) | និយមន័យសាមញ្ញ (Simple Definition) |
|---|---|---|
| Multilocus Sequence Analysis (MLSA) (ការវិភាគតំណលំដាប់ហ្សែនចម្រុះ) | ជាបច្ចេកទេសម៉ូលេគុលដែលគេប្រើប្រាស់ដើម្បីកំណត់អត្តសញ្ញាណ និងចំណាត់ថ្នាក់មេរោគ ដោយធ្វើការប្រៀបធៀបតំណលំដាប់នៃហ្សែនគោល (Housekeeping genes) ជាច្រើនកន្លែងក្នុងពេលតែមួយ។ វាផ្តល់ភាពជាក់លាក់ និងសុក្រឹតភាពខ្ពស់ក្នុងការបែងចែកប្រភេទ (Species) ជាងការមើលលើរូបរាងខាងក្រៅ ឬការប្រើប្រាស់ហ្សែនតែមួយកន្លែង។ | ដូចជាការផ្ទៀងផ្ទាត់អត្តសញ្ញាណមនុស្សម្នាក់ដោយមើលទាំងក្រសែភ្នែក ខ្ចៅដៃ និងទម្រង់មុខព្រមៗគ្នា ជំនួសឱ្យការមើលតែស្នាមខ្ចៅដៃមួយមុខ ដើម្បីឲ្យកាន់តែច្បាស់លាស់។ |
| Housekeeping genes (ហ្សែនគោល / ហ្សែនរក្សាមុខងារកោសិកា) | ជាប្រភេទហ្សែនដែលតែងតែបញ្ចេញសកម្មភាព (Express) ជាប់ជានិច្ចនៅក្នុងកោសិកា ដើម្បីរក្សាមុខងាររស់រានមានជីវិតជាមូលដ្ឋាន (ឧទាហរណ៍ ហ្សែន gyrB, efp, dnaK)។ ដោយសារវាមានវត្តមានគ្រប់ពេល និងមិនងាយមានបម្រែបម្រួលលឿនពេក គេតែងយកវាធ្វើជាគោលសម្រាប់វិភាគប្រៀបធៀបរកពូជអម្បូររបស់បាក់តេរី។ | ដូចជាគ្រឹះ ឬសសរផ្ទះដែលមិនអាចខ្វះបាន ទោះបីជាផ្ទះនោះមានម៉ូដខុសគ្នាយ៉ាងណាក៏ដោយ ក៏រចនាសម្ព័ន្ធទ្រទ្រង់នេះតែងតែមានជានិច្ចគ្រប់ផ្ទះទាំងអស់។ |
| Polymerase chain reaction (PCR) (ប្រតិកម្មច្រវ៉ាក់ប៉ូលីមេរ៉ាស) | ជាបច្ចេកទេសបន្ទប់ពិសោធន៍ដែលប្រើដើម្បីបង្កើតច្បាប់ចម្លងនៃបំណែក DNA ជាក់លាក់ណាមួយរបស់មេរោគពីចំនួនតិចតួច ឱ្យទៅជាចំនួនរាប់លានច្បាប់ចម្លង ក្នុងរយៈពេលខ្លី។ ការធ្វើបែបនេះជួយឱ្យអ្នកវិទ្យាសាស្ត្រអាចមើលឃើញ និងវិភាគបានថា តើសំណាកនោះពិតជាមានផ្ទុក DNA របស់មេរោគដែលគេកំពុងស្វែងរក ឬយ៉ាងណា។ | ដូចជាការយកអត្ថបទមួយវគ្គតូចចេញពីសៀវភៅក្រាស់មួយ ហើយយកទៅថតចម្លង (Copy) រាប់លានសន្លឹក ដើម្បីចែកឱ្យគេមើលឃើញគ្រប់ៗគ្នាដោយងាយស្រួល។ |
| Pathogenicity test (ការធ្វើតេស្តសមត្ថភាពបង្កជំងឺ) | ជាការពិសោធន៍ដោយយកមេរោគដែលញែកបានពីទីវាល (Isolates) ទៅចាក់បញ្ចូល ឬលាបលើរុក្ខជាតិសាកល្បងដែលមានសុខភាពល្អ ក្នុងលក្ខខណ្ឌគ្រប់គ្រងបាន ដើម្បីតាមដាន និងបញ្ជាក់ថាតើមេរោគនោះពិតជាភ្នាក់ងារបង្កជំងឺ និងអាចបង្កើតឱ្យមានរោគសញ្ញាដូចដើមប្រាកដមែនឬយ៉ាងណា (យោងតាមគោលការណ៍ Koch's postulates)។ | ដូចជាការយកជនសង្ស័យទៅធ្វើត្រាប់តាមសកម្មភាពបទល្មើសឡើងវិញនៅកន្លែងកើតហេតុ ដើម្បីបញ្ជាក់ថាគេពិតជាអ្នកប្រព្រឹត្តមែន។ |
| Phylogenetic tree (មែកធាងប្រវត្តិវិវត្ត) | ជាគំនូរបំព្រួញរាងដូចមែកធាង ដែលបង្ហាញពីទំនាក់ទំនងញាតិសន្តាន និងប្រវត្តិវិវត្តន៍រវាងប្រភេទជីវិតផ្សេងៗគ្នា (ដូចជាពូជបាក់តេរី Xanthomonas ផ្សេងៗ) ដោយផ្អែកលើភាពស្រដៀងគ្នានៃហ្សែនរបស់ពួកវា។ មេរោគដែលមានហ្សែនស្រដៀងគ្នាខ្លាំង នឹងស្ថិតនៅលើមែកតែមួយ ឬនៅក្បែរគ្នាបំផុត។ | ដូចជាតារាងមែកធាងគ្រួសារ (Family tree) ដែលបង្ហាញថាអ្នកណាជាបងប្អូនបង្កើត អ្នកណាជាបងប្អូនជីដូនមួយ ដោយផ្អែកលើខ្សែស្រឡាយដូនតា។ |
| Type strain (ស្ត្រេនអត្តសញ្ញាណគោល / សំណាកបាក់តេរីគោល) | ជាសំណាកបាក់តេរីដើមដំបូងគេបំផុតដែលត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណ ដាក់ឈ្មោះ និងរក្សាទុកជាផ្លូវការនៅក្នុងធនាគារមេរោគអន្តរជាតិ។ គេប្រើប្រាស់វាជាស្តង់ដារគោលសម្រាប់យកមេរោគផ្សេងៗដែលរកឃើញថ្មី មកប្រៀបធៀបដើម្បីបញ្ជាក់ថាវាពិតជាប្រភេទ (Species) តែមួយឬក៏អត់។ | ដូចជាគីឡូក្រាមស្តង់ដារអន្តរជាតិដែលគេរក្សាទុកនៅទីក្រុងប៉ារីស ដែលគេយកធ្វើជាគោលសម្រាប់ថ្លឹងផ្ទៀងផ្ទាត់ភាពត្រឹមត្រូវនៃជញ្ជីងទាំងអស់នៅលើពិភពលោក។ |
អត្ថបទដែលបានបោះពុម្ពនៅលើ KhmerResearch ដែលទាក់ទងនឹងប្រធានបទនេះ៖
ប្រធានបទ និងសំណួរស្រាវជ្រាវដែលទាក់ទងនឹងឯកសារនេះ ដែលអ្នកអាចស្វែងរកបន្ថែម៖